赵路
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:河南省杰出青年科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技攻关计划更多>>
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- TSC2反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响
- 2011年
- 目的:探讨抑癌基因TSC2反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响.方法:运用阳离子脂质体介导TSC2的反义寡聚核苷酸(ASODN)转染食管癌Ec9706细胞,并分5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L3组作为实验组.以终浓度为15μmol/L正义寡核苷酸(SODN)/无关寡核苷酸(N-ODN)及未转染组分别作为无关对照组、细胞对照组.分别在转染后连续培养24 h、48 h、72 h这3个不同时间点,用MTT检测细胞的增殖情况;免疫细胞化学检测TSC2蛋白表达:RT-PCR检测tsc2mRNA表达.用TUNEL检测转染后48 h细胞的凋亡情况.结果:同一时间点,不同浓度的TSC2反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞增殖有不同的促进作用,实验组与正义组、无关组及正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),以浓度为15μmol/L作用最强:实验组各组凋亡指数均低于对照组,且与对照组相比,差异具有统计学意义(13.11±0.13,9.31±0.29,4_38±0.43vs 16.46±0.43,16.63±0.34,16.23±0.45,均P<0.05).同一浓度的TSC2反义寡核苷酸,在不同时间点对食管癌EC9706细胞增殖的促进作用,随时间的增加而增强,以72 h作用最强.同一时间,不同浓度的TSC2反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞TSC2基因的表达有不同程度的抑制作用,实验组与正义、无关及正常对照组相比,差异有统计学意义(F蛋白=50.60、330.69及1221.28,均P<0.05;FmRNA=260.23、572.22及1004.35,均P<0.05),以浓度为15μmol/L作用最强;同一浓度的TSC2反义寡核苷酸,在不同时间内对食管癌EC9706细胞TSC2基因的表达的抑制作用,随时间的增加而增强,以72 h作用最强.结论:抑癌基因TSC2反义寡核苷酸可促进食管癌EC9706细胞增殖、抑制其凋亡.
- 冯付明杨娟杨娟赵路张红李晟磊赵路
- 关键词:反义寡核苷酸EC9706细胞增殖凋亡
- 食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织差异表达基因的筛选被引量:2
- 2011年
- 目的:研究食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织的差异表达基因,为寻找食管鳞癌早期诊断高敏感性,高特异性的分子指标提供理论依据.方法:分别抽提人食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织总mRNA,逆转录成cDNA,用单标法以Cy3-dUTP为标记制成探针,与基因芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因,并用生物信息学方法做进一步分析.结果:在45051个人类全基因组芯片中依Ratio实验组(癌组织)/对照组(正常食管组织)>4.0或<0.25的数据项,共发现1113条差异表达基因,其中464条上调,649条下调.经生物信息学分析,表明包含多种功能基因.RT-PCR验证其中3条基因,表达方向与芯片检测结果一致,符合预期结果.结论:在食管鳞癌的发生、发展中存在着大量异常表达基因;基因芯片是一高效筛选食管癌相关基因的方法.
- 赵路杨娟于婧张红高冬玲陈奎生
- 关键词:基因芯片食管鳞癌差异表达基因
- RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响被引量:3
- 2011年
- 目的研究RNA干扰抑制食管癌EC9706细胞中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法以PDK1siRNA转染EC9706细胞,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测PDK1mRNA和蛋白的表达以及下游Akt蛋白的磷酸化水平。分别以四甲基偶氮唑蓝(MTF)法、流式细胞术、Transwell侵袭实验和裸鼠移植瘤实验检测PDK1 siRNA对EC9706细胞增殖、凋亡、侵袭以及体内抑瘤能力的影响。结果与未转染组相比,PDK1siRNA转染细胞后继续培养24、48和72h时,PDK1 mRNA的表达均明显降低,抑制率分别为(28.5±4.2)%、(51.1±5.7)%和(60.6±4.1)%,PDK1蛋白和Akt蛋白的磷酸化水平也明显降低(P〈0.05)。PDK1siRNA能有效抑制EC9706细胞的增殖、侵袭并促进细胞凋亡,且能抑制裸鼠移植瘤的生长并降低移植瘤组织中PDK1蛋白的表达。结论PDK1可能与食管癌细胞的增殖、凋亡和侵袭等生物学行为密切相关,是肿瘤基因治疗的有效靶点。
- 于婧陈奎生李亚南杨娟赵路
- 关键词:RNA干扰食管肿瘤EC9706细胞裸鼠
- 基因芯片在筛选食管鳞癌组织及周围正常食管黏膜组织差异表达基因中的应用
- 食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其中河南省林州市食管癌的发病率高达150/10万。食管癌进展迅速,侵袭性强且常伴有淋巴结转移,易复发,预后差。常规手术治疗及放、化疗效果均不能令人满意。所以,寻求食管癌治疗的新方法为当前研...
- 赵路
- 关键词:基因芯片食管鳞癌