杨旭
- 作品数：4 被引量：39H指数：3
- 供职机构：武汉科技大学医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 雷公藤红素对U937细胞Notch 1、NF-κB信号蛋白通路的调控作用被引量：23
- 2010年
- 背景与目的:白血病是高度依赖NF-κB的恶性肿瘤,NF-κB与肿瘤的发生和转移以及肿瘤细胞的增殖、凋亡、耐药相关,现已证实NF-κB家族是Notch信号通路的一个靶基因。本研究探讨雷公藤红素对白血病U937细胞凋亡和细胞中Notch1、NF-κB表达水平的影响。方法:以不同浓度雷公藤红素(0.25～16.0μmol/L)分别作用于U937细胞12～60h,MTT法检测细胞增殖活性,透射电子显微镜、流式细胞术观察雷公藤红素对U937细胞凋亡的影响,Western blot、RT-PCR法分别检测雷公藤红素对U937细胞内Notch1通路蛋白、基因表达水平的调控作用,激光共聚焦显微技术检测细胞凋亡时NF-κB的核浆分布变化。结果:雷公藤红素能明显抑制U937细胞增殖,具有浓度依赖和时间依赖性。此外,雷公藤红素以浓度依赖性方式诱导U937细胞凋亡,并伴随明显的凋亡细胞形态学改变,而雷公藤红素的凋亡诱导效应可能与其将细胞阻滞于G0/G1期有关。雷公藤红素对Notch1通路蛋白及基因表达水平均有不同程度的抑制作用,该抑制作用呈明显的量效关系。NF-κB在胞核表达减少,胞浆表达增多。与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素明显抑制U937细胞的增殖,并诱导其凋亡,其抗白血病效应可能与下调Notch1信号通路以及NF-κB蛋白表达有关。
- 王晓南吴青杨旭张连生吴一品卢聪
- 关键词：雷公藤红素U937细胞NOTCH1NF-ΚB凋亡
- 槲皮素抑制磷脂酰肌醇-3激酶／Akt通路的体外抗肿瘤作用研究被引量：3
- 2013年
- 目的 研究槲皮素对白血病NB4细胞的抗肿瘤效应和磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）／Akt、bcl-2及Bax在槲皮素诱导NB4细胞凋亡中的作用，探讨其可能的作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性，Hoechst 33258荧光染色及流式细胞术观察槲皮素对NB4细胞凋亡的影响，Western blot检测槲皮素对NB4细胞相关蛋白的表达变化，激光共聚焦显微技术检测细胞凋亡时Akt的胞核、胞质分布变化。结果 槲皮素（20～160 μmol／L）能明显抑制NB4细胞增殖，具有剂量-时间依赖性。20、40、80 μmol／L槲皮素作用24 h后，其总凋亡率分别为（9.25±0.11）%、（20.83±2.10）%、（41.43±2.90）%，与空白对照组的（2.17±1.12）%比较差异有统计学意义（t值分别为4.14、6.56、7.02，P＜0.05），细胞凋亡呈剂量依赖性并伴随明显的凋亡细胞形态学改变，而槲皮素的凋亡诱导效应可能与其诱导NB4细胞周期阻滞于G2／M期有关。槲皮素对PI3K／Akt表达水平显著降低，导致凋亡抑制因子bc1-2表达受阻，同时Bax表达增加，但对总Akt蛋白没有明显影响，Akt在胞核表达减少，胞质表达增多，与空白对照相比差异具有统计学意义（F＝15.12，P＜0.05）。结论 槲皮素能够通过多条信号途径促进白血病NB4细胞发生凋亡，发挥较强的抗白血病效应，因而PI3K／Akt通道有望成为白血病诊治的新靶标。
- 杨旭景雪源张玉曾文刘泽民吴青王晓南
- 关键词：槲皮素磷脂酰肌醇-3激酶AKTBAXNB4细胞
- 臭氧暴露诱发小鼠急性肺部损伤及抗氧化剂的拮抗作用
- 2020年
- 为了研究臭氧(ozone,O_(3))诱发小鼠肺损伤的作用以及褪黑素(melatonin,MT)的保护机制,本研究以雄性Balb/c小鼠为受试动物,进行连续7 d、每天3 h的急性O_(3)暴露,在保护组每天口服暴露5 mg·kg^(-1)MT。实验小鼠随机分为4组:(1)生理盐水对照组(Control);(2)褪黑素对照组(MT);(3)臭氧暴露组(2.14 mg·m^(-3)O_(3));(4)臭氧暴露+褪黑素保护组(2.14 mg·m^(-3)O_(3)+MT)。最后一次臭氧暴露后,制备小鼠肺泡灌洗液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A的含量;取部分肺组织制作肺匀浆并提取总mRNA,用于检测肺组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,以及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、NADPH:醌氧化还原酶1(NQO-1)mRNA的表达。此外,采用苏木精-伊红染色(H&E stain)观察小鼠肺组织病理学改变。结果表明,与对照组相比,2.14 mg·m^(-3)O_(3)暴露组小鼠肺组织MDA含量上升,IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A表达增加;GSH含量以及Nrf2、HO-1、NQO-1的mRNA相对表达量下降,且差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与O_(3)暴露组相比,MT保护组小鼠肺组织MDA含量下降,IL-1β、IL-33、IL-4和IL-17A表达下降,且GSH含量以及Nrf2、HO-1和NQO-1的mRNA相对表达量相应上升。此外,小鼠肺组织病理切片观察结果表明,O_(3)暴露组小鼠肺组织出现炎细胞浸润和气道重塑现象,使用抗氧化剂MT处理后可减轻相应病理学改变。综上所述,2.14 mg·m^(-3)O_(3)暴露可造成小鼠肺组织氧化损伤,诱发炎症,导致肺组织病理学改变;抗氧化剂的使用可增加Nrf2及其下游抗氧化酶的表达,缓解氧化应激,降低炎症因子水平,这验证了O_(3)暴露引起的肺部损伤是通过氧化性损伤机制介导的。
- 郑子龙陈雨珊杨旭杨旭曾燕
- 关键词：臭氧褪黑素
- 雷公藤红素对白血病细胞Akt信号通路的影响及在细胞凋亡中的作用被引量：19
- 2011年
- 目的研究雷公藤红素(celastrol)对人类白血病细胞株K562细胞Akt信号通路的影响及其作用。方法应用MTT法检测细胞增殖活性,Annexin V/PI双标法、Hoechst33258染色法和DNA ladder法检测细胞凋亡,Western Blot法检测Caspase家族成员及Akt信号通路相关蛋白在雷公藤红素作用前后的表达或磷酸化情况,并进一步分析其对雷公藤红素诱导细胞凋亡作用的影响。结果雷公藤红素以剂量-时间依赖性方式抑制K562细胞增殖,其24h半数抑制量(IC50)是(2.15±0.11)μmol/L;并以剂量依赖性方式诱导K562细胞凋亡,2.0μmol/L雷公藤红素处理24h后出现明显的DNA剪切现象,伴有典型的细胞凋亡形态学改变。雷公藤红素诱导细胞凋亡过程中伴随Caspase-3、8的活化,50μmol/L Caspase抑制剂z-VAD-fmk可阻断雷公藤红素作用的K562细胞凋亡。雷公藤红素降低K562细胞Akt信号通路中p-Ak,t Survivin和Bcl-2的表达,25μmol/LWORT(PI3K-Akt抑制剂)可显著提高雷公藤红素诱导K562细胞凋亡的作用。结论雷公藤红素显著抑制K562细胞增殖,通过活化Caspase途径诱导K562细胞凋亡。雷公藤红素诱导细胞凋亡过程中伴Akt磷酸化水平的降低,雷公藤红素参与PI3K-Akt抑制剂协同诱导K562细胞的凋亡。
- 王晓南吴青杨旭张连生吴一品卢聪
- 关键词：雷公藤红素K562细胞AKCASPASE-8
