戴红梅
- 作品数:43 被引量:85H指数:5
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- Scytovirin在大肠杆菌中的可溶性表达被引量:1
- 2008年
- 目的:获得Scytovirin(SVN)蛋白及其多克隆抗体。方法:按照NCBI上公布的SVN基因序列设计合成引物,合成SVN基因,构建pET32c-SVN原核表达重组质粒,经限制性酶切分析、DNA序列测定插入片段正确;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达;用离子交换层析法及金属亲合层析法纯化蛋白,采用Tris-Tricine系统分析;以经过纯化的蛋白为抗原免疫白兔,制备SVN多克隆抗体。结果:对表达产物进行了分离纯化,SVN纯度达到91%;用纯化的样品制备了多克隆抗体,抗血清效价为1∶102400。结论:SVN在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并制备了其多克隆抗体,为进一步深入研究SVN提供了材料。
- 冯欣刘刚戴红梅汤国营游松
- 关键词:可溶性表达多克隆抗体
- 重组人表皮生长因子的中试工艺研究
- 1994年
- 人表皮生长因子(hEGF)是最早发现最早应用于临床的多肽生长因子之一,由53个氨基酸组成,分子量约为6200Da。它具有多种生物学功能,能促进表皮和上皮细胞的增殖,刺激多种培养细胞的生长,增强蛋白质及DNA合成等。在临床上主要用于创烧伤救治。
- 朱厚础汤国营王勇波胥照平戴红梅孙澎马清钧
- 关键词:中试工艺烧伤救治人表皮生长因子多肽生长因子
- 一种工程菌及其在生产紫穗槐-4, 11-二烯中的应用
- 本发明公开了一种工程菌及其在生产紫穗槐-4,11-二烯中的应用。本发明提供了一种工程菌,是在大肠杆菌中导入如下基因得到的重组菌:紫穗槐-4,11-二烯合酶基因、HMG-CoA还原酶基因、HMG-CoA合酶基因、甲羟戊酸激...
- 方宏清吴涛孙旭戴红梅李树龙
- 胸腺肽α1-Spl DnaX内含肽融合蛋白的切割动力学研究
- 2011年
- 目的:研究胸腺肽α1(Tα1)与Spl DnaX内含肽融合蛋白AS的体外切割动力学。方法:构建Tα1和SplDnaX内含肽的融合表达载体pET-AS,转化大肠杆菌BL21(DE3),经乳糖诱导获得可溶性表达的融合蛋白AS,用镍亲和层析纯化该蛋白;综合评价温度、β-巯基乙醇(β-ME)浓度和诱导切割时间对Spl DnaX内含肽介导融合蛋白AS自切割释放Tα1的影响。结果:在大肠杆菌中诱导表达了融合蛋白AS,经镍柱纯化获得该蛋白;随着温度升高和β-ME浓度增加,诱导切割时间延长,Spl DnaX内含肽介导的切割率逐渐增大;最终采用300 mmol/Lβ-ME切割24 h,融合蛋白的硫解切割率大于90%。结论:通过对Spl DnaX内含肽的诱导切割条件进行摸索,确定了最适宜的切割条件,为利用该方法制备Tα1和其他小分子多肽提供了技术基础。
- 曹赛戴红梅李树龙谢迟方宏清
- 关键词:胸腺肽Α1融合蛋白
- 重组人表皮生长因子对大鼠表皮细胞促生长作用的观察被引量:4
- 1996年
- 利用体外培养的自体表皮细胞来覆盖烧伤切痂创面已成为当前烧伤整形领域的一个研究课题。其中一个重要的问题是如何促使培养的表皮细胞尽快地增值,扩展成片,以应用于创面的修复和愈合。 人表皮生长因子(hEGF)是存在于人体内的一种重要的多肽生长因子。
- 孙同柱吴志谷耿淼周宝桐胥照平戴红梅朱厚础
- 关键词:促生长作用人表皮生长因子RHEGF生长面创伤中心
- 一种制备N-末端乙酰化的胸腺素α1的方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种制备N-末端乙酰化的胸腺素α1的方法及其专用工程菌。该工程菌,是将胸腺素α1的编码基因与N-末端乙酰转移酶的编码基因导入宿主菌中得到的;所述N-末端乙酰转移酶为如下a)或b)的蛋白质:a)由序列表中序列7...
- 方宏清张旭戴红梅李树龙陈惠鹏
- 文献传递
- 人乙酰肝素酶的小分子多肽抑制剂
- 本发明公开了一种人乙酰肝素酶小分子多肽抑制剂的氨基酸序列及一组具有人乙酰肝素酶小亚基(8kD)结合活性的小肽,属于生物医学领域。抑制人乙酰肝素酶活性的小肽,其氨基酸序列从N末端到C末端为序列表SEQ ID NO.1。在表...
- 刘刚程慧君陈惠鹏汤国营戴红梅
- 文献传递
- 野生革耳(Panus rudis)漆酶的异源表达和酶学性质改良
- <正>漆酶是一类含铜的多酚氧化酶,它的合成分泌存在有一系列翻译后加工过程(如糖基化等),异源表达比较困难,产量和活性都不高。此外,漆酶的某些性质,如氧化还原电位较低、高温易失活等,也都阻碍了它在造纸、环保等产业中的实际应...
- 杨建强刘刚汤国营戴红梅朱厚础
- 文献传递
- rimJ基因缺失不影响大肠杆菌BL21(DE3)生长的温度敏感性
- 2010年
- 目的:研究rimJ基因对大肠杆菌BL21(DE3)菌株生长的温度敏感性的影响。方法:利用SceⅠ-Red同源重组技术将大肠杆菌BL21(DE3)基因组中的rimJ基因缺失,得到rimJ缺失突变菌;比较缺失突变株和原始菌株在不同温度(25℃、37℃、42℃)下的最大比生长速率,利用统计学方法分析rimJ基因的缺失对BL21(DE3)菌株生长的温度敏感性是否有影响。结果:rimJ基因被成功敲除;统计分析结果表明缺失突变株和原始菌株的最大比生长速率没有明显区别。结论:rimJ基因缺失对大肠杆菌BL21(DE3)生长的温度敏感性无影响。
- 颛孙丹丹方宏清戴红梅李树龙谢迟陈惠鹏
- 关键词:大肠杆菌BL21(DE3)比生长速率温度敏感性
- 大肠杆菌ptsHIcrr操纵子的快速敲除及敲除菌生长性能测定被引量:5
- 2010年
- 敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)ptsHIcrr操纵子,考察敲除菌株生长特性并将其与ptsG敲除菌进行比较。利用I-SceⅠ特异性切割和Red同源重组方法成功构建了大肠杆菌DH5α△ptsHIcrr敲除菌。在LB培养基中,DH5α△ptsHIcrr的生长行为与DH5α和DH5α△ptsG明显不同,其最高菌密度是DH5α和DH5α△ptsG的近2倍,而DH5α△ptsG生长行为与DH5α无明显差异。但在含1%葡萄糖的LB中,DH5α△ptsHIcrr和DH5α△ptsG均表现出生长优势,最高菌密度依次是DH5α的2.8和2倍;培养液中最终乙酸含量分别是DH5α的12.2%、47%。在M9修饰培养基中,DH5α△ptsHIcrr比生长速率(1/h)和比葡萄糖消耗速率[g/(g.h)]明显低于DH5α,并略低于DH5α△ptsG。结果说明,ptsHIcrr操纵子敲除菌改变了葡萄糖的代谢速率,并呈现与ptsG基因敲除菌不同的代谢特点。
- 周军智邹永康戴红梅李树龙蔡亚非方宏清
- 关键词:RED同源重组大肠杆菌