张尊平
- 作品数：121 被引量：431H指数：15
- 供职机构：中国农业科学院果树研究所更多>>
- 发文基金：国家葡萄产业技术体系建设项目国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 一种简化的苹果田间苗脱毒及繁育方法
- 本发明公开了一种简化的苹果田间苗脱毒及繁育方法。属于农业栽培技术领域。包括以下步骤：植物材料的前处理、脱毒处理、茎尖再生、再生植株的病毒检测和无毒苹果苗的繁育。本发明利用苹果嫩稍进行组织培养，材料容易获取，缩短了试管苗的...
- 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳
- 文献传递
- 葡萄病毒研究最新进展被引量：12
- 2014年
- 对近5年关于葡萄病毒分离鉴定、基因组及遗传变异、传毒介体、寄主互作、检测技术、脱毒和抗病毒技术等方面的最新研究进展进行了综述。
- 任芳董雅凤张尊平范旭东胡国君周俊
- 关键词：葡萄病毒
- 苹果茎痘病毒双重RT-PCR检测体系的建立及应用被引量：3
- 2019年
- 病毒病是危害苹果(Malus domestica)的一类重要病害。已报道的苹果病毒种类很多,在我国发生普遍的主要有苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)、苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)、苹果花叶病毒(Apple mosaic virus,ApM V)以及苹果锈果类病毒(Apple scar skid viroid,ASSVd)[1~3]。
- 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳张梦妍
- 关键词：APPLEAPPLESTEMPITTINGVIRUSVIRUS
- 苹果无病毒母本树和苗木检疫规程
- 本标准规定了苹果无病毒母本树和苗木的检疫规程。本标准适用于培育苹果无病毒接穗和砧木的母本树及繁育的无病毒苹果苗木。
- 董雅凤张尊平刘凤之王福祥周宗山杨俊玲蔡明吴立峰何峻
- 关键词：苹果检疫
- 文献传递
- 李属坏死环斑病毒辽宁桃树分离物基因组分析被引量：2
- 2017年
- 采用RT-PCR和RACE技术,克隆了李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)辽宁桃树分离物全长基因组。用Vector NTI Advance 11软件进行基因组结构注释。用SDTv.1.0软件分析该分离物与Gen Bank中公布的其他PNRSV分离物间的核酸一致性,并用MEGA5.0软件和RDP3软件对各PNRSV分离物进行系统发育分析和重组分析。结果显示:PNRSV辽宁桃树分离物基因组由3条正义单链RNA组成。RNA1由3 332个核苷酸构成,具有一个开放阅读框(nt 30~3 167),编码一个约117.0k D的复制酶相关蛋白P1。RNA2由2 591个核苷酸构成,具有一个开放阅读框(nt 27~2 426),编码一个约99.0 k D的复制酶相关蛋白P2。RNA3由1 943个核苷酸构成,具有两个互不重叠的开放阅读框分别编码一个运动蛋白(nt 175~1 026)和一个外壳蛋白(nt 1 100~1 774),这两个开放阅读框的间隔区为73个核苷酸。PNRSV辽宁桃树分离物的RNA1、RNA2和RNA3与其他已经公布的PNRSV分离物间,核酸序列一致性分别为91.8%~98.8%,93.3%~99.2%和87.7%~99.0%。基于RNA1、RNA2和RNA3全长序列构建的系统发育进化树,分别将已报道的PNRSV分离物划分为3个、2个和3个组,PNRSV辽宁桃树分离物分别属于RNA1Ⅰ组、RNA2Ⅰ组和PV96组。基于RNA1、RNA2和RNA3全长序列进行的重组分析表明各PNRSV分离物基因组间不存在重组。PNRSV辽宁桃树分离物基因组序列是世界首个来源于桃树的PV96组基因组序列。
- 李正男张双纳张尊平范旭东任芳胡国君董雅凤
- 关键词：李属坏死环斑病毒基因组运动蛋白外壳蛋白
- 基于巢式反转录-聚合酶链式反应技术检测葡萄病毒A和葡萄病毒B被引量：2
- 2019年
- 皱木复合病在世界范围内普遍发生,是引起葡萄木质部畸形的一类病害的统称,在沙地葡萄、Kober5BB和LN33品种上表现茎痘、茎沟和栓皮等症状,其中葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)与Kober5BB品种上出现茎沟症状有关,而葡萄病毒B(Grapevine virus B,GVB)与LN33品种上出现栓皮症状有关。
- 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳
- 关键词：检出率反转录-聚合酶链式反应
- 葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立被引量：19
- 2012年
- 以复合感染4种病毒的‘红地球’(Red Globe)葡萄样品为试材,对影响多重PCR的dNTPS浓度、Taq酶浓度、引物浓度、退火温度及模板量进行了调整和优化,建立了能同时检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus-3,GLRaV-3)、沙地葡萄茎痘相关病毒(Grapevine rupestris stem pitting associated virus,GRSPaV)、葡萄病毒B(Grapevine virusB,GVB)和葡萄病毒A(Grapevine virusA,GVA)的多重RT-PCR方法。灵敏度测验结果显示,多重RT-PCR与单一RT-PCR检测灵敏度基本一致。多重RT-PCR获得的特异性片段大小分别为905、546、460和196bp,经过克隆、测序及序列比对,表明其序列与已报道的病毒序列具有较高的同源性。对7个已知带病毒的葡萄样品进行检测验证的结果表明,所建立的多重RT-PCR技术可用于大量田间样品中这些病毒的检测。
- 范旭东董雅凤张尊平任芳李亚惠
- 关键词：多重RT-PCR
- 苹果茎痘病毒外壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：5
- 2010年
- 利用基因重组技术将苹果茎痘病毒Applestempittingvirus(ASPV)完整cp基因在大肠杆菌中表达,以纯化蛋白为抗原免疫新西兰兔制备其抗血清,并采用ACP-ELISA法测定其效价和应用PAS-ELISA法对其抗血清的有效性进行初步鉴定。结果显示,cp基因获得了高效表达,表达产物与Anti-His抗体产生特异性免疫反应。制备的抗血清具有较强的特异性,效价为1:800。PAS-ELISA检测结果显示,9个苹果样品中有8个样品与RT-PCR检测结果一致,仅1个样品RT-PCR检测为阳性,而PAS-ELISA检测为阴性。表明所制备的抗血清具有一定的应用潜力。
- 李丽丽张志宏董雅凤张尊平范旭东裴光前
- 关键词：苹果茎痘病毒外壳蛋白抗血清
- 苹果茎痘病的诊断与防治实用技术
- 2020年
- 苹果茎痘病分布广泛,世界各地栽培的苹果树均受到该病危害。感病的嫁接苗易发生枯死现象,高接换头的苹果树,几年后发生整株急剧衰退现象,造成树体生长阻滞,甚至死亡。1田间症状苹果茎痘病在多个主栽品种上呈潜伏侵染,不表现症状,在感病苹果品种的木质部产生茎痘斑,在某些敏感的梨苹果茎痘病毒在指示植物光辉苹果上的症状品种上出现叶脉变黄,出现叶片坏死斑、果实畸形等症状。
- 闫文涛胡国君岳强冀志蕊张尊平仇贵生周宗山王雅偲
- 关键词：高接换头树体生长潜伏侵染果实畸形痘病田间症状
- 葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化被引量：3
- 2018年
- 葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。
- 任芳张尊平范旭东胡国君李正男董雅凤
- 关键词：外壳蛋白基因植物表达载体烟草
