张宁
- 作品数：7 被引量：14H指数：3
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- 发文基金：国家重点基础研究发展计划新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
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- 绵羊Noggin基因的克隆、序列分析与原核表达
- 2012年
- 根据同源序列克隆原理设计一对引物,以绵羊脑组织总RNA的反转录产物为模板,利用RT-PCR扩增绵羊Noggin基因cDNA全长编码区,克隆到pMD-18T载体。测序验证后,提取pT-Noggin质粒经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切回收目的条带,亚克隆到pET41a原核表达载体,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。序列分析表明,绵羊Noggin基因的cDNA全长编码区(GenBank登录号为FJ751853)为699bp,编码232个氨基酸,与其他哺乳动物氨基酸序列同源性达到95%以上。SDS-PAGE结果显示,诱导表达的融合蛋白大小为60ku,与预期蛋白大小一致。Western blot检测结果显示,该蛋白为His融合蛋白。说明成功克隆了绵羊Noggin基因的编码区序列,构建了原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达出目的融合蛋白。
- 贺三刚张宁张雪梅刘明军李文蓉
- 关键词：绵羊原核表达
- 转Noggin基因生产促毛囊生长细毛羊的研究
- 毛囊的性状和皮肤组织结构决定了羊毛的品质和产量。本研究目的是获得转noggin基因的细毛羊，观察其对细毛羊毛囊生长的影响，进而培育出促进毛囊生长的转基因细毛羊品系。
- 贺三刚张雪梅张宁刘晨曦汪立芹陈童黄俊成李文蓉刘明军
- 绵羊Follistatin基因表达及其结构域的功能分析被引量：7
- 2010年
- 为研究羊Follistatin基因的功能,提取了绵羊卵巢总RNA,通过RT-PCR方法获得羊FollistatincDNA的完整开放阅读框(1038bp)。去除信号肽序列后与原核表达载体pET41a连接,构建重组表达质粒pFSsig-,经大肠杆菌诱导表达获得FSsig-蛋白(66kDa)。通过RT-PCR克隆了包含N端和结构域1的Follistatin突变体(FSN+D1),将FSN+D1片段插入慢病毒载体(pLEX-MCS)构建了pFS-N+D1慢病毒重组表达质粒。在293T细胞中进行慢病毒的包装,再感染绵羊肌肉原代细胞,得到稳定表达FSN+D1的肌肉细胞系,通过细胞生长曲线结果显示稳定表达FSN+D1的肌肉细胞明显比正常肌肉细胞增殖快,且差异极显著(P<0.01),表明绵羊FSN+D1结构域有促进肌肉细胞生长的功能。
- 张宁张雪梅刘明军谭立新
- 关键词：原核表达慢病毒细胞生长曲线
- 绵羊高效转基因技术研究
- 刘明军马润林黄俊成李文蓉张雪梅汪立芹贺三刚林嘉鹏刘晨曦张宁唐森玛依拉
- 转基因技术能够突破种间隔离和实现多基因聚合，应用发展前景广阔。家畜转基因技术存在效率低、无法实现条件性控制表达、缺乏系统的分子检测和安全评价技术等瓶颈，制约了技术的发展和应用。该项目建立了以慢病毒载体和核移植为核心的绵羊...
- 关键词：
- 关键词：绵羊
- 新疆多胎绵羊主效基因的研究与应用
- 史洪才牛志刚刘明军黄俊成白杰武坚米热尼沙•库尔班袁燕谈锐高志英艾斯卡尔•玉素因张宁
- 绵羊的多胎性(一胎产多羔性)是绵羊高产的基础，多胎羊一胎产多羔，生产力和经济效益极显著地高于单胎羊，利用绵羊多胎主效基因及地方品种多胎性能分子遗传机制的研究成果，进行分子辅助育种，培育新型多胎肉羊，提纯复壮地方品种的多胎...
- 关键词：
- 关键词：绵羊饲养管理良种繁育分子育种技术
- 新疆褐牛与荷斯坦牛隐性乳房炎与体细胞数、病原菌种类的比较被引量：4
- 2009年
- 本试验以新疆乌鲁木齐市地区一大中型奶牛场的新疆褐牛、荷斯坦牛奶样为研究对象,对奶样进行了病原菌分离培养,同时对不同品种牛体细胞数与菌落形成单位（colony-forming unit,CFU）、体细胞数与不同年龄进行了统计分析。结果表明,2个品种牛感染病原菌种类稍有差别且新疆褐牛感染葡萄球菌的机率明显高于荷斯坦牛 荷斯坦牛比新疆褐牛更容易患乳房炎 新疆褐牛、荷斯坦牛体细胞在小于20万/mL时均与体细胞大于50万/mL时的CFU值呈显著差异（P〈0.05）,而这2个品种牛的体细胞在20~50万/mL时分别与体细胞小于20万/mL、大于50万/mL时的CFU值均无显著差异（P〉0.05）,初步推测体细胞数和细菌总数之间没有必然联系,还受其它因素影响 此外,随着年龄增长,褐牛和荷斯坦牛的体细胞评分（somatic cell score,SCS）都呈上升趋势,且不同品种间的SCS差异显著。
- 张雪梅刘明军谭立新张宁玛依拉
- 关键词：隐性乳房炎体细胞数菌落形成单位
- 奶牛隐性乳房炎的病原检测与小白鼠致病性研究被引量：3
- 2009年
- 本研究以新疆乌鲁木齐地区的2个奶牛场隐性乳房炎患牛为试验对象,共分离鉴定出21种91株引起奶牛乳房炎的主要病原菌,其中葡萄球菌28株(30.78%),链球菌21株(23.07%),杆菌25株(27.48%),其他细菌17株(18.67%)。对主要病原菌通过动物试验确定致病力较强的菌为金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌和大肠杆菌。同时对17大类主要病原菌共30种药物的药敏试验结果表明,在奶牛隐性乳房炎中应用较多的青霉素、四环素等抗生素对常见致病菌几乎无效,而左氧氟沙星、呋喃妥因、头孢噻肟、阿米卡星则显示出较好的抑菌作用。
- 张雪梅刘明军杨波谭立新张宁玛依拉
- 关键词：奶牛隐性乳房炎病原菌药敏试验
