张伟宏
- 作品数：9 被引量：11H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达的影响
- 目的探讨籽鹅产蛋性能基因α-烯醇化酶(Alpha-enolase,ENO1)对籽鹅卵泡颗粒细胞Bcl-2和Caspase-3mRNA表达的影响,为研究ENO1功能与禽类卵泡发育机制奠定理论基础。材料方法选取8月龄东北籽鹅...
- 计红杨焕民王建发郭景茹张虹亮王江璐张伟宏
- 关键词：颗粒细胞BCL-2CASPASE-3
- 添加鼠李糖乳杆菌和布氏乳杆菌对青贮黑麦草和青贮玉米微生物群集的影响
- 本文在青贮黑麦草和青贮玉米中添加鼠李糖乳杆菌和布氏乳杆菌,研究其对微生物群集的影响。青贮饲料贮藏时间为14,56和120天。添加L.buchneri的青贮黑麦草细菌与真菌群集都很稳定。大肠菌中的Erwinia persi...
- 李雁冰吴凌王建发张伟宏
- 关键词：DGGE青贮
- 文献传递
- ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡基因Bcl-2表达的影响被引量：1
- 2013年
- 本试验将原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞转染ENO1腺病毒过表达载体,应用实时荧光定量PCR方法检测ENO1过表达对颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量的影响。结果发现ENO1过表达使卵泡颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。提示ENO1可能通过使Bcl-2基因表达量增加,从而抑制籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡,促进卵泡的发育。
- 王江璐计红张伟宏赫荣贺郭景茹郭丽杨焕民
- 关键词：籽鹅BCL-2基因颗粒细胞
- 籽鹅卵泡颗粒细胞烯醇化酶过表达模型的建立及其对孕酮分泌的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:建立α-烯醇化酶(ENO1)腺病毒过表达载体转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞模型,探讨ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响。方法:采用ENO1腺病毒过表达载体以梯度感染复数值(MOI)100、250、350、400pfu/cell转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞,于转染后24 h、48 h,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达。双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)研究ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响。结果:最佳转染条件是,当MOI为350 pfu/cell,转染48 h后,转染率达100%;通过荧光定量PCR与Western blot法,检测到ENO1 mRNA与蛋白均过表达(P<0.01);与培养液组和腺病毒空载体组相比较,ENO1过表达使颗粒细胞孕酮分泌量极显著增加(P<0.01)。结论:ENO1过表达会使体外原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞孕酮分泌量增加。
- 张伟宏计红王江璐赫荣贺杨焕民
- 关键词：过表达孕酮颗粒细胞
- 抗应激复合添加剂对模拟运输应激大鼠血液相关生化指标的影响被引量：3
- 2015年
- 将30只清洁级Wistar大鼠随机分为试验组、普通对照组及应激对照组。试验组用自拟抗应激复合添加剂(维生素C+维生素E+碳酸氢钾+γ-氨基丁酸,羧甲基纤维素钠助悬)进行灌胃,2对照组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液。1周后利用摇床模拟运输应激,检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血糖(GLU)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、糖皮质激素(GC)以及部分细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α)等应激血清标志物水平。结果显示,大鼠经2 h模拟运输应激后,各项指标均有不同程度升高,而自拟抗应激添加剂对运输应激引起的CK、ACTH、GC、IL-2、IL-4和IL-6水平升高有明显的抑制作用;表明自拟的抗应激复合添加剂对抵抗大鼠运输应激具有较好的效果。
- 赫荣贺甄莉郭景茹张伟宏王江璐杨焕民
- 关键词：运输应激抗应激添加剂生化指标
- ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞生殖激素受体表达量及分泌功能的影响
- 烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)是一种在细胞质和细胞核中均表达的糖酵解酶,主要是能催化2-磷酸甘油脱水,生成含有高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸。在前期工作中,本项目组发现籽鹅快速生长的卵泡中ENO1相对表达量显著高...
- 张伟宏
- 关键词：颗粒细胞腺病毒载体籽鹅
- 文献传递
- 籽鹅不同等级卵泡生殖相关激素受体基因的表达被引量：2
- 2017年
- 目的:检测籽鹅不同等级卵泡不同生殖相关激素受体mR NA的表达。方法:选用1只8月龄产蛋期籽鹅,处死后分离各级别卵泡(F1、F2、F3、F4、F5、SYF、LWF),采用实时荧光定量PCR方法检测促卵泡激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)、雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)6种生殖相关激素受体mR NA的表达量变化。结果:SYF和LWF中LHR、GHR和IFGBP-1 mR NA表达量较低,而F1-F5级卵泡中表达量较高;SYF和LWF中ERβmR NA表达量较高,而等级卵泡中表达量较低。结论:本实验研究了不同等级卵泡FSHR、LHR、ERα、ERβ、GHR和IGFBP-1 mR NA的变化规律,为研究禽类产蛋机制提供基础数据。
- 计红马莉张伟宏李悦连帅郭文晋袁建斌郭景茹刘艳芝甄莉杨焕民
- 关键词：籽鹅卵泡激素受体表达量
- 热休克蛋白70过表达对过氧化氢诱导BRL细胞caspase 3表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨热休克蛋白（heat shock protein,Hsp）70过表达对过氧化氢（hydrogen peroxide,H_2O_2）诱导Buffalo大鼠肝细胞（BRL细胞）cleaved caspase 3表达的影响。方法将BRL细胞分为6组：空白对照组、Ad-CMV-Null组、Ad-CMV-Hsp70组、H_2O_2组、Ad-CMV-Null＋H_2O_2组和Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组,Ad-CMV-Null、Ad-CMV-Hsp70、AdCMV-Null＋H_2O_2、Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组分别加入1×10~7 PFU/ml的Ad-CMV-Null或Ad-CMV-Hsp70培养48 h后,H_2O_2、Ad-CMV-Null＋H_2O_2和Ad-CMV-Hsp70＋H_2O_2组分别加入150μmol/L H_2O_2处理2 h,空白对照、Ad-CMVNull和Ad-CMV-Hsp70组分别加入培养液培养。分别采用实时荧光定量PCR检测细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平,Western blot法检测细胞中Hsp70及cleaved caspase 3蛋白的表达水平。结果与H_2O_2组相比,Ad-CMVHsp70＋H_2O_2组细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均显著升高（P〈0.01）,cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降（P〈0.01）。结论Hsp70可抑制caspase 3的激活最终保护BRL细胞,减少凋亡损伤。
- 计红张伟宏连帅王慧马莉李悦郭景茹郭文晋李士泽杨焕民
- 关键词：热休克蛋白70CASPASE过氧化氢
- 表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达被引量：3
- 2013年
- 为构建表达籽鹅α-烯醇化酶(ENO1)基因的重组腺病毒,本研究利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中,并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框切下,连接到腺病毒骨架的pAdxsi载体中。采用PacⅠ酶切,将其线性化,并转染至293(R)细胞进行病毒的包装,制备重组腺病毒。实验结果显示,制备的表达ENO1重组腺病毒的滴度达到1.1×1011pfu/mL。将重组腺病毒感染籽鹅卵泡颗粒细胞后,荧光定量RT-PCR与western blot检测显示细胞中ENO1基因和蛋白表达水平显著高于正常细胞(p<0.05),这些结果为研究ENO1生物学活性及功能奠定了基础。
- 计红王江璐张伟宏郭景茹杨焕民柳巨雄李士泽孔凡志
- 关键词：重组腺病毒颗粒细胞
