崔杰峰
- 作品数：58 被引量：230H指数：8
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同银染法和上样模式对双向凝胶电泳影响的初步分析被引量：1
- 2003年
- 崔杰峰刘银坤申华莉张予孙瑞霞
- 关键词：银染法双向凝胶电泳蛋白质组学
- 人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白质的鉴定及生物信息学分析被引量：2
- 2008年
- 糖蛋白质组学方法鉴定人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白质,将有助于发现肝癌、慢性肝病相关异常核心岩藻糖基化蛋白质.应用凝集素亲和层析技术、双向电泳(2-DE)联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白表达谱,图谱均点数为(130±3)个,挖取90个蛋白质点进行质谱鉴定,数据库搜索及去冗余后,共鉴定53种蛋白质,主要分布于pI5～9,分子质量为10～100ku区域处.Gene Ontology分类发现它们参与体内代谢等过程,应用NetNGlyc对它们进行糖基化位点预测,并通过蛋白质免疫沉淀联合凝集素亲和印迹对其中的结合珠蛋白前体,α烯醇化酶的核心岩藻糖基化进行了再验证.以上结果提示,凝集素层析、2-DE联合MALDI-TOF-MS/MS分析是一种鉴定某种特定类型糖蛋白的高通量检测方法,所建立的表达谱可用于发现疾病发生、发展中相关的异常核心岩藻糖基化蛋白质.
- 代智樊嘉周俭柏斗胜邱双健康晓楠崔杰峰郭坤李岩刘银坤
- 人肝细胞性肝癌组织转移相关分子的比较蛋白质组学研究被引量：33
- 2005年
- 目的应用比较蛋白质组学方法研究肝细胞性肝癌(HCC)转移相关的关键蛋白分子。方法用双向凝胶电泳(2DE)对有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织总蛋白进行分离,两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定,并在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。结果鉴定出16个差异表达蛋白,包括S100钙结合蛋白(S100)、热休克蛋白27(HSP27)、细胞角蛋白18(CK18)等。对在转移性HCC组织中表达显著增高的HSP27,应用western blot分析在蛋白水平上验证了2-DE结果,RT-PCR检测出两组间mRNA水平也存在差异,但不显著,免疫组织化学检测显示HSP27主要定位于肝细胞胞浆内。结论HCC转移与多种蛋白表达相关,其中HSP27高表达可能在转移中发挥作用,可能为潜在的判断HCC 转移的分子标记或控制转移的治疗靶点。
- 宋海燕刘银坤崔杰峰张丽君代智冯钜涛冯久贤申华莉杨芃原
- 关键词：肝癌组织癌转移蛋白质组学HCC热休克蛋白27
- 肝癌转移复发的临床蛋白质组学研究现状及进展被引量：2
- 2009年
- 肝细胞性肝癌（HCC）是一种多基因参与、多因素、病理机制复杂的常见恶性肿瘤。该病多发于非洲、中国和东南亚地区，全世界每年约50～100万人死于肝癌。在我国，肝癌死亡率位居恶性肿瘤第二位，约50％以上的原发性肝癌发生在我国。通常肝癌早期诊治较难，病情进展快且预后差。目前可能获得治愈的主要方法依然是手术切除，但临床研究资料显示，肝癌术后的总体生存率较低，大肝癌术后5年生存率仅为34．6％，小肝癌术后5年生存率也仅有62．9％。
- 杨蓉崔杰峰刘银坤
- 关键词：肝细胞性肝癌临床研究资料转移复发
- 蛋白质组学在某些癌症早期检测中的研究进展被引量：2
- 2003年
- 崔杰峰刘银坤
- 关键词：蛋白质组学癌症
- 用双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术分析HBV感染肝组织蛋白质组被引量：2
- 2007年
- 目的比较正常肝组织与HBV感染肝组织中蛋白质表达谱的改变,筛查在HBV致病过程中相关蛋白质分子表达的不同。方法应用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,对3例正常肝组织(A组),3例HBV感染肝组织(B组,均为组织HBsAg阳性,外周血HBsAg阳性、抗-HBe阳性、抗-HBc阳性)的蛋白质组表达谱进行差异分析,应用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪对差异蛋白质点进行了鉴定。结果相同条件下对各组总蛋白样品分别进行3次双向电泳,各组检测到的蛋白点数如下:A组(1125±56)个,B组(1203±42)个。以各组中2-DE效果好、点数多的一块胶作为参考胶,分别进行2组间的匹配分析,筛选出两组之间差异大于或等于2倍的蛋白点40个。应用质谱鉴定出人线粒体醛脱氢酶H链、结合珠蛋白Hp2、抗过氧化物蛋白2等22种蛋白质。结论HBV感染所致慢性炎症能使肝组织表现出明显的差异性蛋白表达谱。
- 秦雪谢丽陈晓燕代智崔杰峰康晓楠彭宽舒宏李山刘银坤
- 关键词：肝炎病毒乙型肝炎乙型蛋白质组学
- 双向凝胶电泳一飞行时间质谱分析AFB1诱发树鼩肝癌形成中蛋白质组成分
- 目的比较AFB1诱发的树鼩肝细胞癌形成过程中不同阶段的蛋白质表达谱的改变,筛查在AFB1诱发的肝癌发生发展中起重要作用的关键蛋白质分子。方法用双向电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法(MALDI-TOF-...
- 秦雪代智崔杰峰李瑗刘银坤苏建家曹骥欧超李山陈晓燕王剑
- 关键词：树鼩蛋白质表达谱
- 文献传递
- 人肝癌细胞系转移相关分子的比较蛋白质组学研究
- 该研究通过对转移潜能高、低的人肝癌细胞系(MHCC97H/MHCC97L)和不转移人肝癌细胞系(Hep3B)的全蛋白质组表达谱差异分析,筛出一些有潜在应用价值的差异蛋白,同时采用反义核酸技术和与侵袭生物学特性有关的鉴定方...
- 崔杰峰
- 关键词：人肝癌细胞系2-DES100A4
- 高低转移潜能肝癌细胞系差异糖蛋白质组学研究
- 目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种由多因素引发的恶性肿瘤,其转移和复发是影响患者预后和生存期限的重大障碍.肝癌发生中细胞表面的糖链通常发生变化,而该变化与HCC的转移关系密切...
- 代智刘银坤冯巨涛宋海燕申华丽张丽君崔杰峰
- 文献传递
- 转移潜能不同人肝癌细胞系差异蛋白Annexin1的功能解析被引量：5
- 2005年
- 解析比较蛋白质组学筛出的差异蛋白Annexin1的生物学功能,证实其是否在肝癌转移复发中发挥作用.分别以RT-PCR、蛋白质印迹及细胞免疫化学对差异蛋白Annexin1在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达情况进行再验证,然后构建Annexin1反义表达质粒,转染高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97H,通过对MHCC97H细胞的运动、侵袭、凋亡、生长周期、MMPs分泌、克隆形成等系列检测,观察目的蛋白表达降低对其生物学行为的影响,特别是转移特性的影响.验证结果均证实Annexin1在有转移潜能人肝癌细胞系MHCC97L、MHCC97H中呈高表达.转染Annexin1反义重组表达质粒后,MHCC97H细胞中Annexin1的表达被成功抑制.依据MHCC97H/pcDNA3.1(+)ASAnnexin1,MHCC97H/pcDNA3.1(+),MHCC97H的检测排序,转染反义重组质粒后的MHCC97H细胞穿过上室底膜的细胞数(运动实验)分别为:11.13±3.31,18.88±2.03,21.86±3.38;穿过人工基底膜细胞数(侵袭实验)分别是:16.43±2.23,16.40±1.57,16.86±1.52;细胞平均集落形成率(克隆形成实验)分别为:(14.33±0.46)%,(19.35±0.49)%,(20.25±0.35)%;MHCC97H细胞凋亡比例(FCM分析)依次为22.2%,6.44%,6.97%;细胞周期各时相的比例依次为:G0-G1期79.5%/76.34%/80.5%,S期13.26%/14.4%/9.69%,G2-M期7.25%/9.26%/9.81%;细胞培养上清MMP9的定量结果依次为:26.37!g/L,28.00"g/L,31.90#g/L;MMP2定量结果依次为29.46$g/L,26.37%g/L,26.53&g/L.明胶酶谱分析细胞培养上清显示,转染Annexin1反义重组表达质粒的MHCC97H细胞分泌的MMP9活性与对照比变化不明显.综合上述结果发现,转染Annexin1反义表达质粒MHCC97H细胞运动能力及集落形成率明显降低,凋亡细胞的比例增加,而侵袭潜能,细胞周期时相,细胞分泌MMP2、MMP9的量均变化不明显.提示,差异蛋白Annexin1可能通过影响细胞凋亡和细胞运动在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用.
- 崔杰峰刘银坤代智周海君宋海燕张丽君张予孙瑞霞陈洁汤钊猷
- 关键词：人肝癌细胞系
