孙瑞霞
- 作品数：64 被引量：256H指数：10
- 供职机构：复旦大学附属中山医院中心实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同银染法和上样模式对双向凝胶电泳影响的初步分析被引量：1
- 2003年
- 崔杰峰刘银坤申华莉张予孙瑞霞
- 关键词：银染法双向凝胶电泳蛋白质组学
- 槐耳浸膏对人肝癌高转移细胞系转移的抑制作用研究被引量：9
- 2006年
- [目的]探索槐耳浸膏抑制肝癌细胞转移的机制,为槐耳浸膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据。[方法]将高转移潜能人肝癌细胞系(MHCC97H)分别与槐耳浸膏(1.0mg/ml,3.0mg/ml,5.0mg/ml,10.0mg/ml)及DMEM(含10%胎牛血清)作用24h,测定其肿瘤细胞黏附率、运动抑制率及侵袭抑制率。[结果]各组MHCC97H细胞经槐耳浸膏作用24h后,其细胞黏附率明显下降,而运动抑制率及侵袭抑制率明显上升,与对照组相比差别均有统计学意义,且槐耳浸膏浓度与肿瘤细胞黏附率、运动抑制率及侵袭抑制率均有相关性。[结论]槐耳浸膏能明显抑制肝癌细胞的黏附、运动及侵袭能力,故可以阻抑肝癌细胞的转移。
- 李立新叶胜龙王艳红孙瑞霞薛琼陈洁高东梅汤钊猷
- 关键词：槐耳浸膏肝癌细胞系
- 骨桥蛋白促进人肝癌细胞株SMMC-7721恶性表型的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究骨桥蛋白（OPN）对低侵袭性人肝癌细胞株SMMC-7721恶性表型的影响。方法pcDNA3．1（-）／OPN重组质粒转染SMMC-7721细胞，以空质粒转染作对照，用RT-PCR反应、Westernblot检测OPN表达水平，用ELISA检测细胞培养上清液OPN、MMP-2、-9、尿激酶纤溶酶原活化因子（uPA）水平，并用体外功能试验观察转染前后恶性表型的变化。结果重组质粒转染SMMC-7721后OPN表达明显升高，细胞培养上清液OPN为（3．02±0．12）ng／ml，对照组为（1．43±0．07）ng／ml，MMP-2重组质粒转染组为（43．04±3．06）ng／ml，对照组为（22．15±4．34）ng／ml、uPA重组质粒转染组水平明显高于空质粒转染组，分别为（4．78±0．70）ng／ml和（1．61±0．34）ng／ml，两组差异均有统计学意义，t值分别为19．89、6．81和7．03，P值均〈0．01。MMP-9水平分别为（7．82±2．25）ng／ml和（7．70±1．92）ng／ml，两组差异无统计学意义。体外功能试验提示SMMC-7721转染OPN重组质粒后细胞黏附、运动和侵袭能力明显增强，细胞黏附率为75．33％±10．59％，对照组为57．34%±2．52%，t=2．86，P〈0．05。运动试验透膜细胞数分别为（14．3±2．5）个和（6．3±1．5）个，t=4．70，P〈0．05。侵袭试验透膜细胞数分别为（8．2±1．5）个和（4．1±1．3）个，t=4．11，P〈0．05。而细胞增殖能力无明显改变。结论OPN可能是通过增加MMP-2、uPA分泌促进人肝癌细胞株SMMC-7721的恶性表型。
- 陈荣新薛同春叶胜龙孙瑞霞赵燕汤钊猷
- 关键词：肝细胞细胞系骨桥蛋白
- 热休克蛋白27在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达及机制研究被引量：12
- 2007年
- 利用不同转移潜能肝癌细胞系探讨热休克蛋白27(HSP27)参与肝癌细胞转移潜能形成的可能分子机制.细胞免疫荧光技术、RT-PCR和免疫印迹技术显示,HSP27在转移潜能不同的肝癌细胞Hep3B、MHCC97L和MHCC97H中定位于细胞浆,亦可见于细胞核,HSP27 mRNA和蛋白质的表达水平与肝癌细胞转移潜能呈正相关.高转移潜能肝癌细胞系MHCC97H的HSP27 RNA干扰试验结果显示,HSP27 RNA干扰后MHCC97H的侵袭(MHCC97H组:21.36±2.92;对照RNAi组:19.88±2.23;RNAi组:11.40±2.05)、运动能力(MHCC97H组:26.35±3.29;对照RNAi组:24.43±3.17;RNAi组:10.92±2.27)明显减弱,细胞凋亡显著增加(MHCC97H组:15.12%;对照RNAi组:17.56%;RNAi组:27.64%).同时进行信号转导基因芯片检测发现,HSP27干扰后核因子κB(NF-κB)通路抑制,并且免疫印迹显示细胞核内活化的NF-κBp65减少,细胞内磷酸化IκBα降低.另外,免疫共沉淀检测发现,在肝癌细胞内HSP27可与IKKβ、IκBα共沉淀,且在HSP27RNA干扰后IKKβ与IKKα结合能力下降.这些结果提示,HSP27可能通过参与细胞内NF-κB通路的激活,影响细胞凋亡和细胞运动,在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用.
- 郭坤刘银坤周海君代智陈洁孙瑞霞孙强玲卢雯静康晓楠
- 关键词：热休克蛋白27信号转导RNA干扰
- 表达IL-24基因的溶瘤腺病毒对肝癌细胞的抑制作用
- 2011年
- 目的研究携带IL-24基因的溶瘤腺病毒对肝癌细胞抑制生长和转移的作用。方法构建Ad．HS4．AFP．E1A／IL-24，病毒的复制由人甲胎蛋白启动子控制，携带IL-24基因。检测病毒在不同细胞系中的选择性复制，以及对高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97-H的生长抑制、诱导凋亡和抑制转移能力（侵袭、运动、黏附）的作用。结果Ad．HS4．AFP．E1A／IL-24在肝癌细胞SMMC-7721、Hep3B和MHCC97-H中选择性表达，而不影响正常肝细胞L02（P〈0．05）。Ad．HS4．AFP．E1A／IL-24可明显抑制MHCC97-H细胞的增殖，诱导其凋亡，并抑制其体外运动、侵袭和黏附能力（P〈0．01）。RT—PCR和明胶酶谱显示其抑制肝癌作用与抑制MMP-2的表达有关。结论携带IL-24基因的溶瘤腺病毒能够选择性抑制肝癌细胞的增殖并抑制其转移。
- 陈漪韩丹刘彬彬梁旻孙瑞霞任正刚王艳红叶胜龙
- 关键词：IL-24基因治疗
- 槐耳浸膏诱导肝癌细胞凋亡的实验研究被引量：12
- 2005年
- 目的:探索槐耳浸膏抑制肝癌细胞增殖的机理,为槐耳浸膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据。方法:将MHCC97H肝癌细胞株分别与DMEM,槐耳浸膏(1 mg／ml,3 mg／ml,5 mg／ml,10 mg／ml)及5-FU(10μg／ml)作用24 h、48 h、72 h,在流式细胞仪上分别测定其细胞凋亡率。结果:不同浓度槐耳浸膏组在每一时段上诱导肝癌细胞凋亡率明显高于对照组。其凋亡率的升高有明显的剂量相关性。槐耳浸膏高浓度10mg／ml组的凋亡率与5-FU组相当。槐耳浸膏诱导肝癌细胞凋亡的作用随时间的延长而增加。结论: 槐耳浸膏能明显诱导肝癌细胞的凋亡,从而抑制肝癌细胞的增殖,为临床治疗肝肿瘤提供了依据。
- 李立新叶胜龙王艳红孙瑞霞薛琼陈洁高东梅汤钊猷
- 关键词：槐耳浸膏肝癌细胞凋亡
- 肝细胞癌细胞诱导和体外培养的大鼠肝星状细胞基因差异表达被引量：1
- 2009年
- 目的从基因水平了解肝细胞癌（HCC）内的星状细胞（HSC）与正常肝HSC的异同。方法密度梯度离心分离HSC，用大鼠HCC细胞株C5F的条件培养基诱导HSC活化。cDNA微阵列比较静止、体外培养活化和诱导活化HSC之间22012个基因的表达，并通过实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）和Western blot检测进行验证。结果与静止HSC相比，体外培养HSC共有1672个基因差异表达，包括促炎症因子、细胞表面受体、黏附分子、信号转导分子、免疫因子等，其中1012个基因上调，660个基因下调。肿瘤诱导活化HSC有711个基因差异表达，其中420个基因上调，291个基因下调，有一部分基因表达与体外培养相同，部分基因如Raf1、Rac2、Adam17、Wnt6、MMP-9和TNF等，呈特异性表达。real-time RT-PCR和Western blot检测结果与cDNA微阵列检测结果相符。结论HCC细胞可特异性驱动HSC的活化，诱导活化的HSC在HCC细胞的浸润和转移中可能起重要作用。瘤内活化的HSC应作为研究HSC生物学功能的标准。
- 夏云红宋正己陈荣新叶胜龙孙瑞霞薛琼
- 关键词：星形细胞寡核苷酸序列分析
- 趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌表达及肺转移中作用的研究被引量：3
- 2008年
- 目的以人肝细胞癌高、低肺转移潜能细胞株MHCC97H、MHCC97-L为研究对象，研究趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌肺转移过程中的作用和意义。方法RT-PCR和Western blotting比较MHCC97H、MHCC97-L细胞株CXCR4 mRNA及蛋白质水平的表达。CXCR4配体SDF-1α及肺提取物趋化实验和抗体抑制实验观察SDF-1α和裸鼠肺组织匀浆液对MHCC97-H的趋化迁移作用。结果趋化因子受体CXCR4在MHCC97-H细胞株表达低于低肺转移潜能细胞株MHCC97-L，蛋白质水平与mRNA水平一致。SDF-1α对MHCC97-H趋化实验表明在1～100ng／ml浓度范围内均有趋化作用，在浓度为50ng／L时趋化作用最显著（P〈0．05）。肺提取物亦发现对MHCC97-H有趋化作用，作用强于MHCC97-L及DMEM组（P〈0．05）。但加入CXCR4抗体后其趋化作用并未明显下调。结论CXCR4在肝癌组织及细胞表达并可能参与肝癌肺转移，但并非肝癌细胞趋化转移的主要受体分子。
- 薛同春叶胜龙陈荣新韩丹孙瑞霞陈洁汤钊猷
- 关键词：肝细胞受体趋化因子CXCR4
- 维生素K_2干预肝癌的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究维生素K2对人肝癌细胞的凋亡诱导作用,并探讨其作用机制;研究维生素K2的干预对荷瘤裸鼠肝癌肺转移及生存期的影响。方法:用流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、bcl-2及bax的mRNA表达。建立人肝癌裸鼠原位移植模型,给予荷瘤裸鼠口服维生素K2(30mg·kg-1.d-1),另设对照组,观察两组裸鼠肝癌肺转移和生存期变化。结果:100μmol·L-1的维生素K2与细胞共育6h后细胞的凋亡率为(28.5±1.6)%,与对照组(2.8±4.8)%比较,有显著差异(P<0.05)。caspase-3 mRNA的表达随着维生素K2浓度及作用时间的增长而增强;当100μmol的维生素K2分别作用细胞24h和72h后,caspase-3 mRNA的表达分别为(0.495±0.250)和(0.603±0.098),与对照组比较(0.270±0.132)均有显著差异(P<0.05)。人肝癌细胞中未检测到bcl-2mRNA表达。bax mRNA的表达于用药前后无变化。维生素K2干预荷瘤裸鼠后,其生存期(83.6±5.18d)较对照组(58.2±9.47d)明显延长(P<0.05);其肺转移灶(4.6±1.95个)较对照组(12±6.6个)明显减少(P<0.05)。结论:维生素K2对人肝癌细胞有凋亡诱导作用,凋亡相关基因caspase-3参与了凋亡的调控;维生素K2能减少裸鼠肝癌肺转移率,能延长荷瘤裸鼠的生存期。
- 周小芸王艳红薛琼孙瑞霞陈洁陈军韩丹
- 关键词：肝癌维生素K2CASPASE-3凋亡
- ανβ3抗体对人肝癌细胞系MHCC97的黏附抑制作用被引量：10
- 2006年
- 整合素介导的黏附行为与肿瘤的发生、发展、浸润及转移等过程密不可分。研究结果表明，整合素是细胞表面受体家族。通过识别细胞外基质中的RGD序列（Arg-Cly-Asp，精氨酸、甘氨酸、天冬氨酸）介导细胞与细胞外基质之间的黏附。
- 王艳红李立新孙瑞霞陈洁刘银坤叶胜龙
- 关键词：人肝癌细胞系抗体介导细胞RGD序列受体家族
