吕振华
- 作品数：56 被引量：370H指数：9
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腰椎间盘内X型胶原基因表达的观察被引量：1
- 2004年
- 西永明胡有谷吕振华郑洪军陈岩齐宗华
- 关键词：腰椎间盘X型胶原基因表达
- ACTH受体在人淋巴组织中的表达被引量：5
- 2004年
- 目的 通过检测ACTH受体及其mRNA在人淋巴组织中的表达情况 ,寻求神经内分泌系统 免疫系统之间功能双向调节的形态学依据。方法 应用免疫组化SP法及核酸分子原位杂交法检测ACTH受体及其mRNA在人淋巴结、脾脏及肠道淋巴组织中的表达。结果 免疫组化显示ACTH受体在人各种淋巴组织中表达的阳性率为 82 .5 % ,与原位杂交阳性率 70 .0 %之间的差异无显著性。结论 人的免疫活性细胞不但可以表达ACTH受体蛋白 ,还可以合成其mRNA ,ACTH受体为神经内分泌系统 免疫系统网络共有的生物学语言媒介 。
- 孟云霄纪祥瑞李玉军孙显路吕振华
- 关键词：淋巴组织免疫组织化学原位杂交
- 腰椎间盘纤维性主胶原基因表达的观察被引量：24
- 1998年
- 目的探讨腰椎间盘组织主要胶原成分——Ⅰ型、Ⅱ型胶原在细胞中基因表达的规律，作为今后的基因调控工作的基础。方法利用核酸分子的原位杂交技术，分别以Ⅰ型、Ⅱ型胶原基因的ｃＤＮＡ探针对胎儿、成人和病理椎间盘组织切片中椎间盘细胞的胶原ｍＲＮＡ进行原位杂交，观察不同阶段胶原基因表达的水平。以胶原的特异性天狼星红染色进行不同阶段的胶原蛋白水平的观察。结果Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ的阳性杂交信号集中于纤维环的外层，Ⅱ型胶原基因在髓核中高表达。成人和病理椎间盘组织中未检出Ⅱ型胶原基因的杂交信号，Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ表达水平减弱，髓核中出现其阳性杂交信号。对胶原的天狼星红染色结果与之相符。结论随着年龄的增长，胶原基因表达的规律发生显著变化。成人和病理椎间盘呈现胶原基因的低表达，Ⅰ型、Ⅱ型胶原基因的表达出现异常现象；髓核内出现Ⅰ型胶原基因表达。
- 吕振华胡有谷冯传汉
- 关键词：椎间盘腰椎胶原原位杂交纤维性
- Epo及其受体在宫颈癌及癌前病变组织的表达被引量：1
- 2007年
- 目的了解促红细胞生成素(Epo)及其受体(EpoR)在宫颈癌及其癌前病变组织的表达及其意义。方法用半定量RT-PCR法,检测30例宫颈癌组织Epo、EpoR mRNA含量,用免疫组化PV-6000方法检测50例宫颈癌及其癌前病变组织Epo、EpoR蛋白表达,并与正常宫颈组织比较。结果Epo、EpoR mRNA在宫颈癌及正常宫颈组织中均有表达,在宫颈癌组织中的表达水平较高,各组间比较差异有显著性(F=11.83、173.73,q=4.83、10.86,P<0.05)。Epo、EpoR蛋白表达均为阳性,各组间表达率比较,差异有显著性(χ2=5.78、15.88,P<0.05),Epo、EpoR蛋白表达率随宫颈病变程度的加重明显增加;EpoR蛋白表达与Epo蛋白表达呈显著正相关(r=0.57,P<0.01)。结论Epo/EpoR的表达可能与宫颈癌发生发展有关。
- 王崇娟崔竹梅孙显路李玉军吕振华刘相萍
- 关键词：促红细胞生成素受体宫颈上皮内瘤样病变宫颈癌
- 人β-神经生长因子和神经生长因子基因重组真核表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 目的:入神经生长因子包括β-神经生长因子、神经生长因子这两种活性形式,拟分别构建这两种活性形式的基因重组真核表达载体,为进一步的转基因实验作好前期准备。方法:实验于2001～2004年在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。①对象:健康志愿者5人,均对本实验知情同意。流产胎儿由青岛大学医学院妇产科提供,产妇均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:根据人β-神经生长因子与神经生长因子的全长基因序列设计合成特异性引物。抽取正常人外周血1.5 mL,提取基因组DNA后克隆出人β-神经生长因子基因片段。取胎儿海马部位脑组织100 mg,采用RT-PCR技术从胎儿脑组织中克隆出人神经生长因子基因片段。分别将纯化的β-神经生长因子产物与神经生长因子产物连接于真核表达载体pcDNA_4上,构建重组真核表达载体。转入JM109大肠杆菌中,扩增后小剂量质粒提取,酶切鉴定及计算机自动测序。结果:β-神经生长因子和神经生长因子的PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示,在预期位置均有阳性条带。酶切鉴定结果及计算机自动测序均证实插入片段为目的基因片断。结论:实验分别从人外周血和胎脑海马组织中成功克隆获得β-神经生长因子与神经生长因子,并顺利构建这两种活性形式的重组真核表达载体pcDNA_4-β-NGF与pcDNA_4-NGF,为进一步将神经生长因子基因转入真核细胞并比较二者表达效率作好准备工作。
- 李东侃宋跃王传富张悦吕振华
- 关键词：神经生长因子
- PAX-2基因的克隆化和在原核细胞中的表达
- 2004年
- ①目的 以RT PCR技术克隆PAX 2全长开放读框 ,构建重组原核表达载体 ,制备重组人PAX 2蛋白 ,为肾肿瘤免疫治疗打下基础。②方法 从肾癌手术标本中分离mRNA ,RT PCR扩增筛选PAX 2全长开放读框 ,扩增产物经过限制性酶切分析及DNA测序后 ,克隆入高效原核表达质粒 pTrcHis,构建重组载体 ,转化工程菌株JM10 9,经IPTG诱导表达及 6×His配体亲和层析制备原核表达重组人PAX 2蛋白。③结果 RT PCR扩增获得约 1.2kb大小的产物 ,经限制性酶切分析和DNA测序 ,证实为人PAX 2基因的完整开放读框。④结论 肿瘤组织总RNA经RT PCR一步法能够对PAX 2基因的开放读框进行完整有效的筛选。经重组技术及高效原核系统制备重组人PAX 2蛋白的效率和纯度满意。体外制备的重组人PAX 2蛋白对肾肿瘤特异性抗原的瘤苗制备和免疫治疗具有重要价值。
- 隋爱华刘相萍杨堃李延江吕振华
- 关键词：原核表达聚合酶链反应
- 重症肌无力患者维生素D受体多态性的初步研究被引量：1
- 2003年
- 目的 初步观察重症肌无力(MG)患者的维生素D受体(VDR)基因多态性与MG临床特点之间的关系。方法 采用PCR-RFLP方法检测29例散发性MG和9例家族性MG患者的VDR型基因的多态性,观察其与MG临床特点的关系。结果 未发现VDR基因多态性与散发性MG患者的性别、发病年龄、Osserman分型以及并发症有关。家族性MG患者无aa基因型,且其a等位基因频率低于散发性MG患者和健康对照组。差异均有显著性。结论 尚未发现散发性MG患者的VDR基因多态性与临床特点有关。家族性MG患者的VDR基因多态性与散发性MG患者不同。MG患者的VDR基因多态性仍需进一步研究。
- 李海峰王淑辉谢琰臣丛志强孙兆林吕振华隋爱华
- 关键词：重症肌无力维生素D受体免疫反应
- 非小细胞肺癌及癌旁组织中血管内皮生长因子C及其受体mRNA的表达与临床意义被引量：1
- 2005年
- 王勇杰沈毅吕振华杨堃隋爱华刘相萍林乐胜王善政
- 关键词：血管内皮生长因子C受体MRNA癌旁组织淋巴道转移淋巴管内皮
- 海藻糖对液氮保存同种瓣的保护作用被引量：1
- 2005年
- 目的探索将海藻糖作为保护剂用于液氮冻存同种瓣。方法10%二甲亚砜+0.1mol.L-1海藻糖(实验组)和单独使用10%二甲亚砜(对照组)作为冷冻保护剂,经程控梯度降温,液氮冻存大鼠的同种瓣6个月后复温,通过电镜、光镜观察和内皮细胞活力测定,对两种保存方法的优劣进行比较。结果实验组的内皮细胞活力明显高于对照组,并且其结构的破坏也较对照组轻。结论10%二甲亚砜+0.1mol.L-1海藻糖作为同种瓣的冷冻保护剂,其保护效果明显好于单独使用10%二甲亚砜。
- 常青李守先从林谭金山吕振华刘相萍
- 关键词：同种瓣二甲亚砜海藻糖电镜
- 血管内皮生长因子-C及其受体3mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达与临床意义被引量：9
- 2004年
- 目的 研究肺癌组织 (T)及癌旁组织 (PT )中血管内皮生长因子 C(VEGF C)及其受体 3 (flt 4)mRNA的表达情况 ,分析其在淋巴转移中的作用。方法 采用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)方法分析 3 6例新鲜肺癌组织及癌旁组织标本中VEGF C/flt 4mRNA的表达情况 ,并统计分析其与各临床病理特点之间的关系。结果 癌旁组织中VEGF CmRNA表达与flt 4mRNA的表达呈显著正相关 (P <0 .0 1)。肺癌组织中VEGF C (+ )而在肿瘤或 /和癌旁组织中出现flt 4(COMVEGF C) (+ )与淋巴结转移 (P <0 .0 1)及临床病理分期 (P <0 .0 1)呈明显正相关。结论 COMVEGF C在肿瘤淋巴转移中起重要作用 ,是一个反映患者淋巴转移的良好指标。
- 王勇杰刘相萍沈毅吕振华隋爱华杨堃王善政
- 关键词：癌旁组织FLT-4VEGF-C血管内皮生长因子-C肺癌组织
