韦启泽
- 作品数:5 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 红系增强子的不同片段对转移的β-珠蛋白基因在MEL细胞中表达的作用
- 1997年
- β-地贫是危害严重的遗传病,近年来寄希望于基因治疗,即利用反转录病毒载体将正常人β-珠蛋白基因导入患者骨髓干细胞中并使之在体内获得长期稳定适宜表达。在以前的工作中我们已证明,含NFE-2/AP-1蛋白结合位点的36bp的5′HS2核心序列使反转录病毒介导的β-珠蛋白基因在MEL细胞中的表达水平提高2倍,且不明显影响病毒滴度和前病毒整合稳定性,而较大片段的5′HS2(412 bp和732 bp)则使病毒滴度低且前病毒极不稳定。
- 韦启泽刘德培陶吉中刘庆辉贾佩臣雷学锋陈松森梁植权
- 关键词:Β-珠蛋白基因
- 小片段红系特异增强子对MEL细胞中外源β珠蛋白基因表达调控的作用
- 1996年
- 在以往研究基础上,本文进一步采用了100bp红系特异增强子,构建了反转录病毒重组体N_2A·β·E100和N_2A·β·E100,经Ψ-2和PA317两轮包装细胞系转染后,利用出芽的病毒粒子感染MEL细胞,检测外源基因的整合与表达。结果表明100bp和36bp之间的差异序列对病毒滴度和前病毒整合无明显影响,但能使外源β珠蛋白基因的表达水平提高约一倍。
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- 关键词:细胞
- 红系增强子对鼠红白血病细胞中β-珠蛋白基因表达的作用被引量:4
- 1995年
- 为寻找合适长度的红系增强子,在不影响病毒滴度和前病毒整合稳定性前提下,提高外源β-珠蛋白基因的表达水平,作者将完整β基因(β)或部分缺失IVSII(第二内含子)的β-基因(Δβ)和不同长度的红系增强子(36、292、与341bp)分别克隆于反转录病毒载体N2A上,重组体分别转染ψ-2单向性包装细胞系,由ψ-2出芽的病毒颗粒感染PA317双向性包装细胞系,筛选病毒滴度较高,前病毒整合完整的PA317细胞克隆的病毒上清感染鼠红白血病(MEL)细胞,用RNase保护实验检测β-珠蛋白基因的表达。结果表明,不仅获得了稳定的前病毒整合和较高的病毒滴度,而且含292bp和341bp红系增强子的β-基因表达水平接近或达到内源性α基因。
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- 关键词:红白血病地中海贫血珠蛋白类基因表达
- 地中海贫血的基因治疗
- 1995年
- 地贫的基因治疗,设想采用反转录病毒载体通过包装细胞系,转染MEL细胞和转染骨髓干细胞后植入患者体内,以获得珠蛋白基因细胞和整体水平的高表达。但目前主要问题是转移基因的表达水平低、病毒滴度低及前病毒的缺失与重排,其基因治疗仍处于载体构建阶段。
- 陶吉中韦启泽
- 关键词:地中海贫血基因治疗转移基因基因表达
- 带红系增强子的人βE-珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达被引量:1
- 1993年
- 本文以我国人中常见的异常血红蛋白E(HbE,β26Glu→Lys,G→A)的β珠蛋白基因为外源基因,用显微注射法制备了人βE-基因的转基因小鼠系。得到的一只整合有16拷贝5′HS2βE重组体的转基因小鼠具有典型的转基因小鼠特征。证实人βE-基因在转基因鼠中的高水平表达需有红系特异性增强子(5′HS2)的存在;说明5′HS2结构对异常珠蛋白基因(βE-)在转基因鼠中的表达也具有明显的增强作用。单一位点整合过多5′HS2βE拷贝平均表达水平(12.1%)明显低于较少拷贝整合的平均表达水平(79.7%),对其发生机制进行了讨论。βE-珠蛋白肽链在转基因鼠中可形成新的血红蛋白四聚体。
- 刘庆辉刘德培丁玉珍韦启泽贾佩臣陈松森梁植权
- 关键词:珠蛋白基因表达转基因小鼠