陈蕴
- 作品数:63 被引量:420H指数:12
- 供职机构:江南大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种快速筛选产琥珀酸厌氧菌的方法被引量:4
- 2007年
- 为筛选得到高产琥珀酸的厌氧菌株,建立了一种快速半定量分析发酵液中琥珀酸的方法。首先通过高效液相色谱法(HPLC)分析出产琥珀酸厌氧菌发酵液中主要含有琥珀酸,乳酸和乙酸,然后将发酵液经过纸层析展开后,发现琥珀酸可以和副产物乳酸,乙酸完全分开,最后用半定量的方法求出琥珀酸的含量。结果表明纸层析法简单经济,可以作为产琥珀酸厌氧菌的初筛方法。
- 陈设詹晓北陈蕴郑志永张丽敏
- 关键词:琥珀酸厌氧微生物纸层析高效液相色谱
- 人血清白蛋白-血管钠肽融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量:1
- 2014年
- 人工合成VNP基因,通过酶连构建HSA和VNP基因的融合基因,插入表达载体pPIC9K,电转至毕赤酵母GS115,构建成工程茵,甲醇诱导表达。重组表达质粒经双酶切验证构建正确;表达产物经SDS-PAGE分析分子量为69 000 Da,与理论值相符;Western blot鉴定产物兼有HSA和VNP免疫原性,说明其为杂合分子;兔胸主动脉环离体灌流实验证明融合蛋白具有舒张血管活性。本研究说明毕赤酵母适于HSA-VNP融合蛋白的表达,为进一步开发稳定的VNP药物提供了生物制备方法。
- 崔燕生姜曰水高昊雷楗勇钱凯陈蕴段作营金坚
- 关键词:毕赤酵母
- 人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制被引量:6
- 2012年
- 筛选获得毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K/hsa-ifnα2b,胞外分泌表达rHSA-IFNα2b药物蛋白。经摇瓶及5 L发酵罐条件优化,确定最佳发酵条件。经50 L发酵罐工艺放大,发酵产量稳定,可达到350 mg/L。离心获得发酵上清液,超滤浓缩10倍,再依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析及Q Sepharose 6FF离子柱纯化。纯化产品进行SDS-PAGE纯度检测、SEC-HPLC检测、相对分子质量测定、N端测序、内毒素检测和生物活性检测。筛选获得一株高产菌,优化获得最佳的发酵条件。纯化产品检测(SEC-HPLC)纯度大于95%,相对分子质量为85 821,氨基酸的N端测序为DAHKSEVAHRFKDLG,与预期的相符。内毒素含量小于5EU/mg,符合国家药典的要求。体外生物细胞活性高达1.6×106IU/mg。具有良好的工业应用价值。
- 钱凯雷楗勇关波陈蕴饶志明金坚
- 关键词:毕赤酵母融合蛋白
- 固态酒精发酵与酒精产业化发展的可行性研究被引量:8
- 2002年
- 固态酒精发酵是以固态基质为底物而进行的边糖化边发酵模式之一。近年来 ,受世界能源危机的影响 ,世界上许多发达国家都在进行可再生能源———燃料酒精的研究 ,以期代替或部分代替汽油。而目前酒精的生产主要是液态深层发酵模式 ,排放的酒精糟液严重污染地表水系的生态环境 ,世界各国政府和研究机构正致力于酒精糟液处理和综合利用的研究。作者综述了固态发酵酒精生产的研究与进展 ,并提出了固态发酵酒精生产与饲料生产偶联的符合中国国情的酒精产业化发展的基本思路。
- 吴天祥丁重阳杨海龙陈蕴章克昌
- 关键词:可行性固态发酵酒精酒精糟液饲料
- 内部核糖体进入位点(IRES)调控细胞血清饥饿应激条件下PRDM13的翻译
- 2016年
- PRDM13是锌指蛋白转录抑制因子(positive regulatory domain zinc finger protein,PRDM)家族中的一员,其在细胞分化、肿瘤的发生和恶性转化中起着重要的作用。而对于PRDM13基因侧翼序列是否含有内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)及其功能所知甚少。本研究对PRDM13 5'端的非翻译区(5'UTR)进行IRES结构与功能分析,探索其在细胞血清饥饿应激条件下对PRDM13翻译的影响。实验发现,在血清饥饿的条件下,肝癌细胞Bel7402/WT中PRDM13的蛋白质水平增加,但是其mRNA水平基本没有变化。将PRDM13 5'UTR的序列插入双顺反子的报告载体(pRL-FL)中,并且将构建的载体(pRL-PRDM13-FL)转染进细胞中,结果显示,PRDM13 5'UTR含有IRES,且发现PRDM13 5'UTR中的105 nt(53~157)对其IRES的功能至关重要。在帽依赖的翻译(cap-dependent translation)机制被抑制时,IRES这种机制可有效维持PRDM13蛋白合成。本研究提供了在细胞压力条件下调节PRDM13蛋白合成的一种新的解释。
- 马文囡丁鹏鹏陶义芬陈蕴朱瑞宇金坚
- 关键词:内部核糖体进入位点翻译
- 红曲色素的制备及HPLC和LC/MS检测方法被引量:17
- 2006年
- 利用薄层层析的方法从红曲色素中分离精制出了多种红曲素。重点对红斑红曲素的HPLC定性定量检测方法进行了研究,并评价了其HPLC的检测效果。用萃取及薄层层析法分离到一种新的黄色素,其最大吸收波长为447nm,用LC-MS方法对其进行了研究,得到其分子量为389D;并建立了该种黄色素的HPLC定性检测方法。
- 张慧娟陶冠军陈蕴许赣荣
- 关键词:HPLCLC-MS黄色素
- HPLC法测定红曲中酸型与内酯型Monacolin K被引量:43
- 2003年
- 功能性红曲产品中的MonacolinK包括酸型和内酯型两种成分.采用HPLC法,色谱柱为ZORBAXSBC 18,5μm,250mm×4.6mm,柱温28℃,V(乙腈)∶V(0.1g/dL磷酸水溶液)=65∶35为流动相,紫外检测器波长为238nm,可同时对酸型和内酯型的MonacolinK进行定量检测,线性关系和重复性均满足要求.固体红曲样品可以用甲醇直接萃取,液态的红曲样品在甲醇萃取之前需调整pH值6~7,测定结果能反映原样品中两种形态MonacolinK的含量.色素对MonacolinK检测存在一定影响,但对于多数功能性红曲色价低、MonacolinK高的特点,这一影响作用较轻,可以忽略.
- 朱华许赣荣陈蕴
- 关键词:HPLC法酸型红曲霉
- HPLC法测定红曲中酸型与内酯型两种形态Monacolin K含量
- 功能性红曲产品中的Monacolin K含量包括酸型和内酯型两种成份。采用HPLC法,色谱柱为ZORBAX SB C-18,5μm,250×4.6mm,柱温28℃,乙腈:0.1%磷酸水溶液=65:35(V:V)为流动相,...
- 朱华许赣荣陈蕴
- 关键词:红曲霉HPLC法测定
- 文献传递
- KTAexplorerl00测定蛋白质相对分子质量的实验分析
- 2004年
- 讨论用 KTAexplorerl00快速纯化工艺开拓系统进行凝胶层析测定蛋白质相对分子质量所涉及的限定条件问题。对该系统有关特性测试及应用表明,它具有加样量少、重复性好、定性和定量准确、快捷方便等优点。
- 华子安陈蕴周楠迪田亚平
- 关键词:凝胶层析蛋白质相对分子质量
- BNP在不同缓冲体系中的血管舒张功能评价被引量:1
- 2013年
- 为了明确能使人脑纳肽(Brain Natriuretic Peptide)保持活性的适用缓冲溶液条件,采用常规离体血管灌流实验,观察人脑纳肽的不同缓冲溶液对家兔离体兔胸主动脉血管片段舒张功能的影响.研究发现,在以柠檬酸/磷酸氢二钠为基质的缓冲液条件下,BNP在10-8~10-5 mol/L浓度区间对家兔血管舒张均呈良好的剂量依赖关系,而以醋酸/醋酸钠或磷酸氢二钾/磷酸二氢钾为基质的这两种缓冲液虽有一定的舒张效果,但没有剂量依赖关系.由此表明,在合适的pH条件下(4或5),柠檬酸/磷酸氢二钠缓冲液具有作为改进BNP注射剂处方的潜在价值.
- 高昊刘利平马鑫陈蕴金坚