迟祥
- 作品数：5 被引量：33H指数：3
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- 重组戊型肝炎疫苗抗原P179表征分析被引量：2
- 2016年
- 目的对重组戊型肝炎疫苗（recombinant hepatitis E virus,rHEV）抗原P179表征进行分析。方法取3批HPLC及电泳纯度均为100%的rHEV抗原P179原液,采用SDS-PAGE法检测相对分子质量及二聚体含量;OPA-FMOC全自动柱前衍生-Amino Quant氨基酸分析法测定氨基酸组分;电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱（electrospray ionizationquadrupole time-of-flight-mass spectrometry,ESI-Q-TOF2-MS）法分析C-末端、Edman降解法测定N-末端氨基酸序列;HPLC法进行肽图分析;毛细管等电聚焦电泳法测定等电点;圆二色光谱仪分析其二级结构;透射电镜负染法观察蛋白颗粒状态;双抗体夹心ELISA法检测抗原活性。结果 3批rHEV抗原P179相对分子质量在17 500-21 300之间;二聚体占总蛋白的85%以上;氨基酸组分、C-末端氨基酸序列、N-末端氨基酸序列、肽图、等电点等均与预期相符;3批rHEV抗原P179二级结构中,α螺旋4.8%-5.6%,β折叠34.8%-36.4%,β转角20.8%-22.2%及无规卷曲37.7%-38.0%;透射电镜观察可见大小均一,粒径约20 nm的蛋白颗粒;抗原活性比值在5.0×10^5-2.0×10^6CCU/mg范围内。结论 3批r HEV抗原P179结构特征均一,与设计相符,为该疫苗的产业化奠定了基础。
- 迟祥李铮贾媛唐剑光宋昊陈子杨常东英迟春萍
- 关键词：戊型肝炎疫苗抗原
- 鸡冠花种子的化学成分研究被引量：22
- 2010年
- 采用溶剂法、硅胶柱层析、Sephadex-LH20凝胶柱层析及重结晶等方法对鸡冠花(Celosia cristata L.)种子进行成分分离及纯化,并利用IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱技术鉴定提取物的化学结构。结果表明:从鸡冠花种子乙醇提取物中共分得6种化合物,经鉴定分别为对羟基苯乙醇(4-hydroxyphenethyl alcohol,1)、山奈酚(kaempferol,2)、槲皮素(quercetin,3)、β-谷甾醇(β-sitosterol,4)、2-羟基十八烷酸(2-hydroxyoctadecanoic acid,5)、豆甾醇(stigmasterol,6)。化合物1,4～6均为首次从该植物中分离得到。
- 迟祥郭美丽宋慧陈亚丹
- 关键词：鸡冠花种子化学成分山奈酚槲皮素
- 重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体的稳定性分析被引量：1
- 2016年
- 目的分析重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体在不同条件下的稳定性,为该抗原的纯化工艺及原液储存条件提供参考。方法将重组戊型肝炎疫苗原液置不同温度、不同p H、高盐浓度、高盐低p H条件下及低温长期储存后,通过透射电镜观察P179抗原蛋白颗粒状态,SDS-PAGE分析二聚体含量。结果 HEV抗原在不同温度、不同p H、高盐浓度、高盐低p H条件下,及低温储存不同时间,P179抗原蛋白颗粒维持在20 nm左右,二聚体含量不低于80%;P179抗原低温储存24个月,其蛋白颗粒及二聚体含量均未发生明显改变。结论重组戊型肝炎疫苗P179抗原蛋白颗粒及二聚体稳定性较好。
- 李铮贾媛迟祥宋昊唐剑光徐军陈子杨张健锋孟多佳韩顺子于爱东迟春萍时成波刘照惠
- 关键词：重组戊型肝炎疫苗二聚体稳定性
- 重组汉坦病毒核蛋白的原核表达及纯化被引量：3
- 2016年
- 目的原核表达重组汉滩型病毒（Hantaanvirus，HTNV）核蛋白（recombinant HTNV nuclear protein，rHTNNP）和重组汉城型病毒（Seoulvirus，SEOV）核蛋白（recombinant SEOV nuclear protein，rSEONP），并进行纯化。方法从HTNVPS-6株和SEOVL-99株灭活病毒液中提取总RNA，依据病毒S片段多变区基因序列两端保守序列设计引物，用逆转录PCR法扩增此S基因片段，构建原核表达质粒pET-Trx-his—HTNNP和pET-Trx-his—SEONP，并在大肠埃希菌中诱导表达。表达产物经凝胶电泳初步鉴定和镍柱亲和层析纯化后，用双向免疫扩散试验检测其抗原特异性。结果重组表达质粒经菌落PCR分析和测序证明构建正确。表达的rHTNNP和rSEONP相对分子质量约为26000，表达量分别约占菌体总蛋白的30％和20％，主要以可溶性形式表达，且纯度可达约70％。双向免疫扩散试验证实，这2种重组蛋白具有较好的抗原性。结论成功构建了表达rHTNNP和rSEONP的原核表达质粒，并获得了较高纯度的rHTNNP和rSEONP，为汉坦病毒型别鉴定试剂盒的开发奠定了基础。
- 常东英张健锋吴菲王玉霞王振萍迟祥贾媛曹玉锋陈子杨刘国瑞唐剑光时成波
- 关键词：汉坦病毒属基因表达质粒纯化
- 2种方法制备硫酸化小刺猴头菌多糖被引量：6
- 2013年
- 采用氯磺酸—吡啶法和浓硫酸法制备硫酸化小刺猴头菌多糖,傅立叶变换红外光谱鉴定硫酸化多糖。结果表明:修饰后的多糖在1 259.17 cm-1和807.73 cm-1或1 226.44 cm-1处出现硫酸酯键吸收峰,表明硫酸基团已经与多糖结合成酯。采用氯化钡—明胶法测定硫酸根含量,制备取代度为0.94或0.82的硫酸化多糖。
- 王新宇迟祥石亮沈思捷王雪宋慧
- 关键词：多糖
