覃琦丽
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院动物繁殖研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广西大学博士科研启动基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 细胞松弛素B对水牛体细胞核移植效果的影响
- 2009年
- 以水牛耳皮成纤维细胞为供体细胞，采用电融合方法，探讨细胞松弛素B（CB）对水牛体细胞核移植效果的影响。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞去核后，将经0．1mg／L Aphidicolin（APD）＋0．5％FBS培养2～9d的水牛耳皮成纤维细胞注射到卵周隙中再经电融合（100V／mm，15μs，电脉冲3次）构建核移植重构胚。重构胚经化学激活后（5μmol／L）离子霉素5min，2mmol／L 6-DMAP3h）培养，7～9d评定其胚胎发育能力。结果显示，在含CB（3mg／L）的融合液中进行电融合后，核移植的融合率、重组胚的存活率、卵裂率和囊胚率与对照组（不合CB）相比均无显著差异（P〉0．05）；核移植重组胚激活前用含CB（6mg／L）的培养液培养1h，其激活后的存活率（97．52％）和体外囊胚发育率（22．09％）均显著地高于未经CB处理的重组胚的存活率（93．87％）和囊胚率（13．25％，P〈0．05）；重组胚经离子霉素激活5min后，在6-DMAP＋CB中培养3h的分裂率明显低于放在6-DMAP中培养3h的分裂率（65．37％vs78．92％，P〈0．05），但囊胚发育率无显著差异（11．19％vs10．96％，P〉0．05）。这表明水牛体细胞核移植电融合时，融合液中不添加CB，而核移植重组胚激活前经CB培养处理后，有利于胚胎的进一步发育，但激活后用CB培养处理会降低胚胎的发育率。
- 陆凤花覃琦丽黄华罗婵成俊萍石德顺韦英明
- 关键词：水牛体细胞核移植电融合细胞松弛素B
- 猪体细胞核移植电融合参数的研究被引量：5
- 2008年
- 本研究用体外成熟42-46h的猪卵母细胞为核移植受体，猪颗粒细胞为核移植供体，对猪体细胞核移植的电融合参数进行了探讨。结果发现，当脉冲时间为40μs时，0．77kV／cm组的融合率（59．3％）明显高于1．54kV／cm组（38．6％，P〈0．05），分裂率（77．8%）及桑椹胚／囊胚发育率（33．3％）显著高于2．31kV／cm组（52．2％，13．6％，P〈0．05）；当电场强度为0．77kV／cm时，20μs组的融合率（68．0％）明显高于30μs组和40μs组（42．7％和35．5％，P〈0．05），分裂率（89．3％）明显高于脉冲时间为40μs组（60．5％）；当电场强度为0．77kV／cm，脉冲时间为20μs时，电脉冲1次的融合率（72．8％）明显高于电脉冲2次（56．0％，P〈0．05），在直流电脉冲前是否施加交流电（1．0V）对融合率（70．0％vs76．0％）、分裂率（77．3％vs75．0％）以及胚胎发育率（17．3％vs18．4％）均无显著影响（P〉0.05）。以上结果表明，在本所实验室条件下，猪体细胞核移植中的适宜电融合参数为：0．77kV／cm，20μs，电脉冲1次，这将为随后的猪体细胞核移植奠定了基础。
- 李日聪王锦薛林涛覃琦丽陈自洪石德顺
- 关键词：猪体细胞核移植电融合电场强度交流电
- 小鼠颅骨成骨细胞的分离培养及生物学鉴定被引量：6
- 2008年
- 对小鼠成骨细胞的体外分离培养方法进行了摸索，并对其生物学特性进行了鉴定。手术法分离新生小鼠颅骨骨片，用0．25％胰蛋白酶＋0．02％乙二胺四乙酸（EDTA）预消化20～30min，而后用0．08％胶原酶＋0．05％胰蛋白酶＋0．004％EDTA的复合酶多次消化（每次10min）收集细胞，然后接种于细胞培养瓶中进行培养，并通过苏木精-伊红（HE）染色、BCIP／NBT Kit碱性磷酸酶（ALP）染色、Von Kossa法钙结节染色和四甲基偶氮唑盐（MTT）微量酶反应比色法对培养细胞进行生物学鉴定。结果发现，分离得到的细胞92％为存活细胞，差速贴壁培养后可筛选得到高纯度的成骨细胞，原代培养8d后可形成单层细胞，传代培养6～7d后可形成单层细胞。这些细胞有ALP活性，并具有体外钙化能力。结果表明，本研究建立的小鼠成骨细胞分离培养与鉴定方法是可行的。
- 王钦李辉张磊覃琦丽薛林涛滕维中石德顺
- 关键词：成骨细胞碱性磷酸酶小鼠
- 猪体细胞核移植电融合参数的研究
- [目的]优化猪体细胞核移植电融合参数，为建立猪体细胞核移植体系奠定基础。[方法]以猪颗粒细胞为核供体细胞，体外成熟46小时的猪卵母细胞为受体胞质进行核移植，对重构胚进行不同电场强度、融合时间、脉冲次数的电融合处理。[结果...
- 覃琦丽李日聪覃兆鲜张宗利杨娟石德顺
- 关键词：胚胎发育卵母细胞体外发育细胞核移植
- 文献传递
- Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响被引量：6
- 2009年
- 本研究的目的是探讨Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响。体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精或离子霉素孤雌激活后,分别在含0,0.5,5,50和500μg/L Ghrelin的培养液中进行体外培养,观察各组胚胎的卵裂率和囊胚率。结果显示,在培养液中添加不同浓度的Ghrelin对体外受精和孤雌激活胚胎的卵裂率均无显著影响(P>0.05),但添加500μg/L的Ghrelin显著提高体外受精胚胎的囊胚发育率(33.5%vs 13.7%,P<0.05),50μg/L或500μg/L的Ghrelin均显著提高孤雌激活胚胎的囊胚发育率(32.4%和34.6%vs 14.5%,P<0.05)。结果表明,培养液中添加Ghrelin对胚胎的早期卵裂没有影响,但可促进水牛体外受精和孤雌激活胚胎囊胚的形成。
- 谢体三农微张新民覃琦丽黄雅琼石德顺
- 关键词：GHRELIN水牛体外受精孤雌激活胚胎培养
- 聚合嵌合法制作黄牛和水牛种间嵌合胚的初步研究
- 2007年
- 通过聚合嵌合法初步建立一套黄牛和水牛种间嵌合的程序与方法。聚合嵌合法采用链酶蛋白酶消化透明带或用机械剥离法去除透明带,然后在含有100μg/ml PHA的培养液中聚合形成嵌合胚。结果发现,8-细胞黄牛胚胎聚合水牛桑椹胚与黄牛囊胚聚合水牛桑椹胚相比,聚合胚存活率和囊胚发育率均无显著差异(P>0.05)。采用显微手术法分离黄牛和水牛8-细胞胚胎卵裂球进行聚合,聚合率为92.3%,囊胚发育率为58.3%,与用0.25%链酶蛋白酶分离胚胎卵裂球进行胚胎聚合的聚合率(86.7%)和囊胚发育率(46.2%)均无显著差异(P>0.05)。以上结果表明:①水牛和黄牛胚胎通过卵裂球聚合获得的种间嵌合胚胎能继续发育;②胚胎聚合前的发育阶段对其聚合成功率和随后的胚胎发育无明显影响。③胚胎卵裂球的分离方法(显微手术法和酶消化法)对其聚合率和囊胚发育率无明显影响。
- 卞桂华覃琦丽冯贵雪陆凤花石德顺
- 关键词：黄牛水牛嵌合体
- TSA处理供体细胞对水牛体细胞核移植胚胎体外发育能力的影响
- 在体细胞克隆技术中，基因的正常表达是胚胎发育的关键，克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因。而组蛋白乙酰化修饰又在不同层次上影响各种基因的表达。本研究主要探讨不同浓度的去乙酰化抑制剂曲古抑菌素A(Tri...
- 陆凤花罗婵覃琦丽张宗丽成俊萍蒋建荣潘红平石德顺
- 关键词：体细胞核移植体外发育克隆胚胎
- 文献传递
- 影响动物克隆电融合效果的几个关键因素
- 电融合技术是目前动物核移植的最佳融合方法.核移植的融合率直接影响着核移植的效率,是核移植技术的关键环节之一.进一步了解影响电融合效果的相关因素,将为提高动物克隆的效率提供有价值的参考.本文将对哺乳动物细胞核移植中影响电融...
- 陆凤花覃琦丽覃兆鲜黄华成俊萍韦精卫石德顺
- 关键词：动物克隆电融合卵母细胞电场强度
- 文献传递
