申慧芳
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：遵义医学院珠海校区生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- TSHR小分子配体的研究进展被引量：1
- 2016年
- 促甲状腺激素受体(TSHR)是一种接受促甲状腺激素信号,刺激细胞生成甲状腺激素的跨膜受体,在调控Graves病和甲状腺癌等甲状腺疾病的发生和发展过程中扮演了重要的角色。目前用来治疗该类疾病的方法均有一定的毒副作用。最近的研究结果表明,基于作用于TSHR的小分子配体研究为甲状腺疾病新药研发提供了新的思路与方向。本文对TSHR的功能、结构以及近几年发现的TSHR小分子配体的化学结构、生物活性及应用研究进展进行了较为详细的综述,并对其发展趋势进行了展望。
- 任航申慧芳李官成王滔李铭源牛少娜刘爱武崔国祯
- 关键词：促甲状腺激素受体激动剂拮抗剂GRAVES病甲状腺癌
- NDV F48E9株HN基因的克隆、表达及其重组蛋白的抗原性研究被引量：1
- 2014年
- 从新城疫标准强毒株F48E9株克隆血凝素-神经氨酸酶(HN)基因,将HN基因转入昆虫杆状表达系统,转染昆虫细胞Sf9。经Western blot和间接免疫荧光鉴定,该系统成功表达了HN蛋白。重组HN蛋白单次免疫SPF鸡可诱导机体产生较高的抗体水平,为试验鸡提供较好的免疫保护。研究结果用于生产证明该重组HN蛋白可刺激机体产生较强的免疫反应,可用于生产有效的新城疫疫苗。
- 申慧芳申惠敏贾秀珍张青峰
- 关键词：HN蛋白杆状病毒表达系统
- 凤冈富锌硒茶对ERp57蛋白酶的抑制作用及其有效成分的虚拟筛选被引量：1
- 2018年
- 目的探讨凤冈富锌硒茶水提取物对抗血小板聚集的潜在药物靶点ERp57蛋白酶的抑制作用及其潜在的有效成分。方法利用超高效液相色谱分析凤冈富锌硒茶水提取物的主要成分,采用胰岛素浑浊度分析方法检测提取物对ERp57蛋白酶的抑制作用,采用体外血小板聚集率实验分析提取物对血小板聚集的干预作用。采用计算机虚拟筛选和实验验证相结合的方法,分析提取物中抑制ERp57蛋白酶的主要活性成分。结果凤冈富锌硒茶水提取物主要存在4种化合物,提取物对ERp57蛋白酶有显著的抑制作用,且表现出一定程度的抗血小板聚集作用,其中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对ERp57蛋白酶的抑制作用最强。结论长期饮用绿茶有益于降低心血管疾病死亡率,可能与绿茶抑制ERp57蛋白酶活性,从而抗血小板聚集有关,其中EGCG是其主要有效成分之一。
- 张莹李惠琼邹佳王滔李玲玲申慧芳岳续朋崔国祯
- 关键词：心血管疾病抗血小板聚集
- 几种肿瘤细胞中ezrin基因增强子区转录调控特性的研究被引量：3
- 2014年
- 该文采用Western blot技术检测人食管癌EC109细胞、鼻咽癌CNE2细胞和宫颈癌HeLa细胞中Ezrin蛋白的表达;采用DNA片段定向克隆技术构建一系列携带ezrin基因增强子区–1541/–706序列的报告基因表达载体,将载体瞬时转染EC109、CNE2和HeLa细胞,检测荧光素酶活性;研究肿瘤细胞中ezrin基因增强子区的转录调控特性。实验结果显示,在被检测的三种肿瘤细胞中,Ezrin蛋白的表达水平没有明显不同。EC109细胞中,当ezrin基因–1541/–706片段正向位于无启动子的报告基因上游时,表现出类似启动子的转录激活作用;当这一片段反向连接时转录激活作用几乎消失。当–1541/–706片段正向位于ezrin启动子或SV40启动子上游时,显著增强荧光素酶表达;然而,当这一片段反向位于启动子上游以及正向或反向位于启动子控制的报告基因下游时,转录增强作用消失。ezrin基因–1541/–706片段在CNE2和HeLa细胞中的转录调控作用,与其在EC109细胞中的转录调控作用部分相似,但不完全相同。结果表明,ezrin基因增强子区具有转录激活和转录增强双重作用,这种作用具有DNA序列位置和方向依赖性以及细胞特异性。
- 张青峰卫金岐张芳婷邵敏申慧芳高书颖
- 关键词：EZRIN基因增强子转录调控肿瘤细胞
- 基因工程药物PBL教学模式的探索与实践被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨改良的PBL（Problem-BasedLearning，简称PBL，也称作问题式学习）教学法在医学院校的基因工程药物课程教育的效果。方法：围绕基因工程药物相关话题，20位同学自由选题后并进行汇报，然后在小组内讨论。针对同学们想到的问题做深入的文献查阅和总结。结果：同学们积极为发言做准备，学习氛围活跃，调动了同学们学习的积极性和主动新，提升了学生的自学能力，也有利于按学生的兴趣进行个性化人才培养。结论：改良后PBL教学法的采用，大大提高了基因工程药物课程的教学效率和质量，值得兄弟院校的同行进一步的推广和探索。
- 崔国祯苏良辰申慧芳
- 关键词：基因工程药物PBL教学质量
- 蛋白质工程课程理论与实验教学改革的实践与启示被引量：3
- 2014年
- 蛋白质工程是一门新兴的技术领域,由于学科和方向的侧重点不同,我校学生的学习始终存在一定的困难。本文作者通过近两年在遵义医学院珠海校区开展的教学改革,进行了一些尝试,并取得了一定的成效,使该课程安排能更好地适应医学院校生物工程专业本科教学的需要。
- 申慧芳苏良辰
- 关键词：蛋白质工程教学改革
- 从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂及其抗血小板聚集作用的评价被引量：4
- 2018年
- 目的建立从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂的模型,并验证候选化合物抗血小板聚集的药理活性。方法根据《中国药典》中的活血化瘀药种类,找出了32种具有抗血栓作用的中药,建立中药成分的虚拟化合物库,以P2Y12受体为靶标蛋白进行虚拟筛选,获得结合自由能最低的化合物,然后进行体外抗血小板凝集实验以验证其活性。结果通过虚拟筛选,得到了结合自由能最低的化合物紫丁香苷,计算其结合自由能力为-14.3 kcal/mol。进一步的实验验证结果表明,该化合物有显著的抗二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板凝集作用。结论从32种活血化瘀的中药中,基于P2Y12受体三维蛋白结构,利用虚拟筛选的方法,筛选出紫丁香苷对ADP诱导的血小板聚集有显著的抑制作用,该模型可用来后续的进一步虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂。
- 崔国祯李惠民李纳邹佳申慧芳刘银花刘振勇
- 关键词：抗血小板聚集紫丁香苷
- H5N1高致病性禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及免疫原性被引量：2
- 2014年
- 用昆虫杆状病毒表达系统表达了高致病性禽流感H5N1 HA蛋白,经SDS-PAGE和Western blot检测,HA蛋白表达分子量约为70 ku;将HA蛋白制成油乳液,免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫。试验结果表明:重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组免疫小鼠后,血清中和抗体效价及ELISA IgG效价均显著高于PBS组,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。ELISPOT试验数据显示,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组小鼠脾单个核细胞分泌IFN-γ和IL-4细胞数量显著高于PBS组,而重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。用昆虫杆状病毒表达系统表达H5N1 HA蛋白制成油乳液能诱导体液免疫和细胞免疫,能为预防高致病性禽流感H5N1候选疫苗的筛选提供依据。
- 申慧芳申惠敏贾秀珍张青峰
- 关键词：HA蛋白免疫反应
- 丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用及其作用靶点被引量：3
- 2015年
- 目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做正向分子对接对其反向对接的方法进行验证。结果 100μmol/L和300μmol/L丹酚酸B对阿霉素诱导的H9c2细胞毒性有显著的保护作用,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2可能是丹酚酸B心肌保护作用的靶标蛋白。结论丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性有一定的保护作用,其作用机制可能与调控丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2有关。
- 卓贤进申慧芳方志潮丁云岗王滔崔国祯
- 关键词：丹酚酸B心脏保护
- 携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达。方法采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/V5-DEST进行重组反应,构建重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT;将重组慢病毒载体与病毒包装质粒混合物pLP1、pLP2和pLP/VSVG共转染人胚肾293FT细胞,制备重组慢病毒颗粒;将重组慢病毒感染HeLa细胞,利用杀稻瘟菌素筛选阳性细胞克隆,PCR法检测外源hTERT基因在阳性细胞中的染色体整合状况,RT-PCR检测重组慢病毒感染对细胞hTERT基因mRNA表达的影响。结果经鉴定,重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT携带hTERT基因,hTERT基因包装至病毒颗粒。重组慢病毒感染HeLa细胞后,得到具有杀稻瘟菌素抗性的细胞克隆,其染色体DNA整合有外源hTERT基因,细胞内hTERT基因mRNA的表达水平高于未感染慢病毒的对照细胞。结论成功构建了携带hTERT基因的重组慢病毒载体,能够提高HeLa细胞hTERT基因mRNA的表达量。
- 张青峰张芳婷申慧芳高书颖
- 关键词：人端粒酶逆转录酶基因重组慢病毒共转染
