杨飞华
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FAPα酶激活式靶向抗肿瘤前药:Z-GP-Dox对斑马鱼的毒性评价被引量：2
- 2012年
- 目的:考察新设计合成的一种FAPα酶激活式靶向抗肿瘤新药甘脯酰阿霉素(Z-GP-Dox)对斑马鱼的毒性作用。方法:以阿霉素作为对照,用不同浓度的Z-GP-Dox处理4月龄的成年斑马鱼及其受精后24h(24hpf)的胚胎,观测其死亡率,并通过显微镜观察Z-GP-Dox对斑马鱼胚胎发育的影响,从形态学和电生理学方面评价其对斑马鱼心脏的毒性作用。结果:Dox对照组的斑马鱼死亡率具有明显的浓度依赖性,而经酰化修饰的前药Z-GP-Dox处理组的斑马鱼死亡率相对较低。Dox可导致斑马鱼胚胎发育严重畸形,心脏功能受损;而相同浓度的前药Z-GP-Dox处理组的胚胎发育基本正常,幼鱼的心脏形态和心率与空白对照组差异不显著。然而,当Z-GP-Dox被FAPα酶解后,其毒性则明显增强,与Dox对照组的毒性相当。结论:与Dox相比,经结构改造的前药Z-GP-Dox对斑马鱼的毒性显著降低,且具有FAPα酶激活式靶向释放特性。
- 马伟峰杨飞华赵海山杜军蔡绍晖
- 关键词：阿霉素斑马鱼
- CXCR7特异性拮抗剂SDF-1/54R的可溶性表达及活性评价被引量：1
- 2014年
- 目的构建SDF-1/54R的原核可溶表达载体,并考查其对CXCR7的抑制作用。方法将PCR扩增的SDF-1/54r基因插入带有GST标签的可溶表达载体pET-41a+,并转化BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达的融合蛋白GST-SDF-1/54R通过SDS-PAGE和Western blotting进行检测,并利用GST亲和层析纯化。纯化产物经肠激酶酶切和纯化后得到目的蛋白SDF-1/54R。用SDF-1/54R处理CXCR7高表达的MCF-7细胞,利用MTT和趋化实验评价其对乳腺癌细胞增殖和转移的影响。结果利用新构建的可溶表达系统成功得到了目的蛋白SDF-1/54R,MTT和趋化实验证实SDF-1/54R对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移具有明显的抑制作用。结论重组载体表达的可溶蛋白SDF-1/54R是一种良好的CXCR7特异性拮抗剂,具有开发成抗肿瘤药物的潜在应用价值。
- 曹园芝杨飞华马伟峰
- 关键词：CXCR7拮抗剂SDF-1可溶性表达
- CXCR7拮抗剂的构建与表达
- 一、背景 乳腺癌是目前女性发病率和死亡率排名第一的常见恶性肿瘤。2011年美国Cancer Journal for Clinicians杂志公布的统计数据显示,美国2011年有230480例女性罹患乳腺癌,其中57650...
- 杨飞华
- 关键词：乳腺癌趋化因子CXCR7
- 文献传递
- CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54的构建及活性评价被引量：1
- 2012年
- 目的对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸(P)突变为甘氨酸(G),且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54。方法将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法得以复性。利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测SDF-1P2G54诱导MOLT4细胞钙内流及细胞表面CXCR4内在化的能力。结果 SDF-1P2G54完全丧失激活CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化。结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值。
- 杨飞华龙北国谭毅龚雅马伟峰
- 关键词：基质细胞衍生因子-1CXCR4
- 重组腺病毒Ad-P2G-DCN的构建及在HEK-293细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 目的制备表达基质细胞衍生因子(SDF-1)拮抗剂P2G与饰胶蛋白聚糖(decorin,DCN)嵌合基因的重组腺病毒,并检测其在HEK-293细胞中的表达情况。方法以前期构建的pET-30a+/P2G-DCN为模板,PCR扩增目的基因P2G-DCN,并克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV;然后将化学合成的SDF-1信号肽序列插入P2G-DCN的5'端,构建为重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/SP-P2G-DCN;经PmeⅠ酶切线性化,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,筛选重组腺病毒质粒pAd-SP-P2G-DCN。PacⅠ酶切线性化的pAd-SP-P2G-DCN通过脂质体介导转染人胚肾转化细胞系HEK-293,包装并扩增重组腺病毒Ad-P2G-DCN。荧光计数确定病毒感染滴度,并以Western blot法检测嵌合蛋白P2G-DCN在HEK-293细胞中的表达情况。结果构建了携带P2G-DCN基因的重组腺病毒,该重组腺病毒感染HEK-293细胞后可高效分泌表达重组嵌合蛋白P2G-DCN。结论成功构建了重组腺病毒Ad-P2G-DCN,为后续系统研究Ad-P2G-DCN在肿瘤基因治疗中的作用奠定了实验基础。
- 马伟峰胡厚稳杨飞华蔡绍晖
- 关键词：基质细胞衍生因子饰胶蛋白聚糖腺病毒载体
- CXCR7拮抗剂的构建及表达
- 一、背景
乳腺癌是目前女性发病率和死亡率排名第一的常见恶性肿瘤。2011年美国Cancer Journal for Clinicians杂志公布的统计数据显示，美国2011年有230480例女性罹患乳腺癌，其中57...
- 杨飞华
- 关键词：乳腺癌趋化因子新生血管
- CXCR7与肿瘤的生长和转移被引量：3
- 2014年
- CXCR7[chemokine(C-X-C motif)receptor 7]是一个近年来新发现的基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor1,SDF-1)的受体,由RDC1基因编码,通过与CXCL11及SDF-1结合发挥其生物学效应。CXCR7在多种肿瘤细胞表面高表达,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用,促进肿瘤细胞的存活和生长、黏附与侵袭、肿瘤血管新生及癌细胞转移。与其他趋化因子受体不同,CXCR7在与SDF-1结合后,并不引起钙离子内流和趋化反应,而是通过建立合适的趋化因子的梯度,与CXCR4[chemokine(C-X-C motif)receptor 4]相互协调发挥作用。以CXCR7为靶点的肿瘤分子治疗研究不断增加,有望为肿瘤治疗提供新的方法。
- 曹园芝杨飞华马伟峰
- 关键词：肿瘤CXCR7SDF-1
