李玉林
- 作品数：14 被引量：25H指数：3
- 供职机构：郑州职业技术学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学经济管理更多>>
- 河南农村劳动力现状的分类调查和优化配置研究
- 王建庄周颖宋冬凌王公博鲁志刚巴玉强李玉林
- 到2006年，河南省总人口达到9820万人，其中农村人口为6631万人。农村人口占到全省总人口的67.5%。对该省农村劳动力现状进行调查并结合实际进行优化配置研究，有利于合理调配和充分利用这个实力雄厚的人力资源，加快该省...
- 关键词：
- 关键词：新农村建设人力资源规划
- 人类功能已知基因RNA干扰质粒文库的构建
- 王云龙李玉林孙新城王国强王继创程蕾董彩文李恒思范玉萍邓黎黎
- RNA干扰现象是生物普遍存在的一种进化保守机制。RNA干扰技术因其具有快速、简捷、稳定等优势，在病毒防御、基因调控、功能基因组研究、疾病基因治疗、新药开发等方面广泛应用。RNAi文库因其具有高效、规模大、通量大的特点，成...
- 关键词：
- 关键词：功能基因组学
- 致病性结核杆菌特异性IgG抗体ELISA检测方法的初步建立被引量：3
- 2012年
- 为建立鉴别致病性结核杆菌感染和卡介苗接种产生的IgG抗体,分别用结核杆菌的混合抗原TB1、TB2和PPD包被,以结核病患者血清为阳性对照,以PPD试验阴性健康人血清作为阴性对照,建立了TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA三种检测结核杆菌抗体的方法。20份阳性标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的阳性检出率分别为45%、50%、95%,100份健康人血清标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的符合率为93%、90%、68%。研究工作为研发致病性结核杆菌感染IgG抗体检测试剂奠定了一定基础。
- 王云龙周贺娟李玉林孙新城董彩文王国强刘旺根王继创李恒思程蕾白晓静
- 关键词：结核杆菌IGG抗体酶联免疫吸附试验
- N端前脑钠肽稳定保存体系的优化被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨血清中N端前脑钠肽(NT-proBNP)的最佳保存条件,为检测试剂盒提供性能稳定的检测参考品。方法:采用ELISA定量检测不同保存液中NT-proBNP含量的变化,单因素分析基础缓冲体系、防腐剂Proclin300及抗生素等成分对NT-proBNP保存的影响,再通过正交实验进行各因素的优化组合,确定最佳的NT-proBNP保存体系。结果:单因素确定NT-proBNP保存基础缓冲体系为0.02 mol/L pH7.2的PBS缓冲液;添加防腐剂Proclin300可使NT-proBNP在37℃中的保存时间延长1 d;选择联合添加青霉素、链霉素比各自单独添加延长NT-proBNP保存时间1 d。通过正交实验确定NT-proBNP保存液成分为0.02 mol/L pH7.2的PBS基础缓冲液配制的20%的小牛血清、1/1000的Proclin300、120 U/ml青霉素与80 U/ml链霉素,以此保存液保存NT-proBNP参考品7 d后标定的定值样本结果显示:37℃中与4℃中标定值相比仅降低了1.3%。结论:优化后的NT-proBNP血清保存液能在37℃条件下保存NT-proBNP参考品7 d。
- 王翠王云龙明亮郑配国谢南昌李玉林王继创
- 关键词：血清标本稳定性
- 猪瘟病毒E2蛋白A3BCD主要抗原结构域的原核表达被引量：3
- 2009年
- 目的:对猪瘟病毒E2蛋白A3BCD进行原核表达,以期获得具有抗原活性的表达产物。方法:利用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR)技术从河南省近期流行猪瘟病毒野毒株中扩增得到E2基因,并将其克隆至pUCm-T载体,构建克隆载体pUCm-TE2;利用PCR方法扩增E2基因的主要抗原域A3BCD,克隆至pET-32a(+)载体,构建表达载体pET-32aE2-2,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,用IPTG进行诱导表达,对诱导产物进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量约35000处出现预期条带,表达产物主要以包涵体形式存在;Western-blotting检测表明,表达产物能与猪瘟病毒阳性血清发生特异性反应,出现单一反应带;用8mol/L尿素(pH8.0)溶解包涵体,经Ni-NTA亲和层析法纯化,获得纯度较高的目的蛋白,ELISA检测表明能与猪瘟抗体阳性血清发生特异性反应。结论:重组质粒pET-32aE2-2转化大肠杆菌Rosetta(DE3),解除了由于稀有密码子造成的表达限制,表达量得到提高;表达产物为硫氧还蛋白和E2-2的融合蛋白,易于纯化,且具有活性,为研制猪瘟抗体ELISA检测试剂盒奠定了基础。
- 李春利王云龙李晨阳李玉林田璐王真吴阳
- 关键词：猪瘟病毒E2蛋白原核表达包涵体
- 猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达及其免疫原性检测被引量：1
- 2010年
- 以病猪脾脏组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到579 bp的猪圆环病毒2型(PCV-2)/ORF2片段,与原核表达载体pET32a重组,通过菌落PCR鉴定、双酶切鉴定及测序鉴定后,证实重组质粒pET32a/ORF2构建成功,将其转化入表达菌Balgold,通过IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的产物,Western blot验证其免疫原性,重组蛋白免疫Balb/c小鼠,检测小鼠体内中和抗体滴度。获得的重组蛋白包涵体的形式出现,表达量占菌体总蛋白的30%,变性纯化后纯度达90%以上,Western blot证实重组蛋白能与PCV-2阳性血清发生反应,免疫Balb/c小鼠45 d后中和抗体滴度达到1∶22。
- 梁晓艳李玉林李兆学王继美贾丽锋周贺娟王云龙
- 关键词：猪圆环病毒ORF2原核表达免疫原性
- RNAi技术干扰人喉癌Hep-2细胞PTTG1基因的初步研究
- 2011年
- 目的:探索对人PTTG1基因mRNA序列有较高干扰效率的位点,构建对PTTG1基因的表达有较高抑制效率的重组质粒。方法:筛选、合成1对互补DNA单链,退火为双链后与双酶切后的质粒载体连接,构建了表达短发夹RNA的1种重组质粒plk0.1-puro/PTTG1。重组质粒以不同浓度转染,并于转染后不同时间收集细胞,以β-actin为内参,采用RT-PCR和Western blot技术分别检测PTTG1基因的mRNA、蛋白质的相对表达水平。结果:与空白对照组相比,6孔板中每孔转染质粒plk0.1-puro/PTTG 11000ng以上、转染超过12d时,PTTG1基因mRNA、蛋白质的相对表达水平下降70%以上。结论:重组质粒plk0.1-puro/PTTG1,在6孔细胞培养板中以1000ng/孔转染12d以上时,有效抑制了人PTTG1基因的表达,在关于PTTG1基因的研究中具有较好的应用价值。
- 王云龙孙新城徐桂超昌静峰李玉林王国强刘旺根董彩文
- 关键词：RNAISHRNA
- 乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白C端片段的克隆及原核表达被引量：3
- 2008年
- [目的]为进一步研制检测乙脑抗体试剂盒奠定了基础。[方法]以本实验室已构建的重组质粒pET-E(E为乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白)为模板,利用PCR扩增乙型脑炎病毒E蛋白基因3′端部分片段,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析表达产物。[结果]所表达的融合蛋白分子量约为38KD,表达产物以水溶形式存在,37℃,诱导4 h的诱导培养条件最佳,表达量约占茵体总蛋白的20?。表达产物经Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。ELISA检测表明,表达的蛋白能与猪乙脑病毒抗体血清发生特异性反应,具有很好的抗原性。[结论]基因工程表达的JEV E蛋白有望成为重要的实验室诊断抗原。
- 李春利王云龙李晨阳李玉林田璐赵瑞红李玲玲
- 关键词：乙型脑炎病毒E蛋白克隆
- 国人成人改良髂骨钉钉道的CT测量
- 目的第一,基于国人成年人的骨盆CT资料,利用CT工作站对改良髂骨钉三个不同方向上的钉道解剖参数进行测量,分析比较出改良髂骨钉在CT影像学上的最佳进钉方向,为临床改良髂骨钉的徒手置入提供参考。第二,将最佳进钉方向上改良髂骨...
- 李玉林
- 关键词：CT三维重建CT测量
- 文献传递
- ER-α36过表达促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移能力被引量：10
- 2013年
- 目的探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α36为研究对象,分别用细胞黏附实验观测肿瘤细胞与细胞外基质的黏附能力、Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭转移能力,用Western blot法检测NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达。结果与MCF-7/W组细胞相比,MCF-7/ER-α36细胞的2 h细胞黏附率和24 h穿膜细胞数显著增加(P<0.05)。NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的相对表达量及MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1显著增高(P<0.05)。结论 ER-α36过表达能促进ER-α66阳性乳腺癌细胞的体外黏附能力和侵袭转移潜力,其机制可能与通过NF-κB途径提高MMP-2、MMP-9的表达水平及打破二者与TIMP-1之间的平衡有关。
- 刘旺根张钦宪王云龙孙新城王国强李恒思李玉林
- 关键词：乳腺癌核因子-ΚB
