朱曙东
- 作品数:11 被引量:96H指数:3
- 供职机构:徐州医学院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 乙醇系统HPLC分析PTC-氨基酸的条件优化被引量:1
- 1994年
- 首次报道用乙醇系统分析PTC-氨基酸的新方法中各衍生物获得最佳分离的建立过程。PTC-氨基酸衍生后溶于A溶液,然后进样于4μmNovaPakC18柱(3.9mm×150mm)。系统的优化步序包括全面调控流动相的pH值与TEA浓度、乙醇梯度程序、柱温等诸多影响HPLC色谱行为的因素。最适条件为:A溶液含0.14MG酸钠、0.75ml/LTEA、PH6.35;B溶液为100%乙醇;柱温30℃。通过优化的乙醇梯度最终在约44min内将15种PTC-氨基酸很好地分离。此法可用于替代代表新科技水平的PTC-氨基酸乙腈分析系统。
- 朱曙东赵昇皓
- 关键词:氨基酸乙醇高效液相色谱
- 葡甲胺环腺苷酸快于cAMP跨膜进入细胞内被引量:3
- 1998年
- 建立分析细胞内葡甲胺环腺苷酸和cAMP浓度的HPLC方法,其灵敏度可达1pmole,并可同时检测AMP、ADP、ATP的浓度。建立分析条件为:LichrosorbRP18柱,梯度程序为0~3min,100%A;3~20min,0~100%B。其中,缓冲液A为1mmol/LPiCA,1.75%乙腈,32.5mmol/LKH2PO4,pH3.6;缓冲液B为1mmol/LPiCA,3.5%乙腈,65mmol/LKH2PO4,pH3.6。流速1.5ml/min。检测波长259nm。人红细胞与1mmol/L葡甲胺环腺苷酸或cAMP孵育后分析细胞内自由药物浓度。cAMP和葡甲胺环腺苷酸都可进入细胞内。葡甲胺环腺苷酸快于cAMP扩散通过细胞膜并使胞内药物浓度达到μmol/L级,可激活胞内各种应激反应。
- 赵琛朱曙东赵升皓
- 关键词:葡甲胺环腺苷酸CAMP细胞膜HPLC
- 柱前PITC衍生与反相高效液相色谱分析兔阑尾CaBP_(21)的氨基酸含量被引量:1
- 1993年
- 应用Super Pac C18柱(125mm×4.0mm,3μm),建立了PTG-氨基酸的HPLC分析方法。衍生步骤快速、灵敏、简便。能有效地分析蛋白水解物中的各种一级、二级氨基酸。色谱系统检测灵敏(灵敏度可达40pmole以下),分析快速(18min)。方法线性响应、重复性均佳。应用此法首次确定了新发现的钙结合蛋白兔阑尾GaBP_(21)的氨基酸组份,证明它是一种与CaM相比组成不同、特征相似的钙结合蛋白。
- 赵惠仁朱曙东张光毅赵昇皓
- 关键词:氨基酸钙结合蛋白高效液相色谱
- 乙醇洗脱:一种PTC-氨基酸HPLC分析的新方法
- 1992年
- 本文描述了用乙醇作梯度洗脱有机相分离PTC-氨基酸的新方法,同乙腈相比,乙醇毒害性小、价廉、易得。且乙醇洗脱分辨率、灵敏度、准确度均佳,可成为代替乙腈洗脱的一种极有前途的新方法。
- 朱曙东赵惠仁赵昇皓
- 关键词:乙醇氨基酸HPLC
- 氨基酸的高效液相色谱分析被引量:76
- 1994年
- 氨基酸的高效液相色谱分析朱曙东,赵皓(徐州医学院生物化学研究室徐州221002)1前言氨基酸分析是生命科学研究中最重要的技术之一。1958年,Spackman等 ̄[1,2]首先介绍了用离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质水解生成的氨基酸,...
- 朱曙东赵皓
- 关键词:氨基酸高效液相色谱
- PTC-氨基酸的HPLC分析被引量:1
- 1993年
- 本文综述了氨基酸分析方法的发展,比较了各种方法的优缺点,着重系统地阐述了迅速发展的PTC氨基酸反相HPLC分析新方法的优越性、分析条件和应用。
- 朱曙东赵昇皓
- 关键词:氨基酸高效液相色谱
- 反相高效液相色谱对CaBP_(21)的肽谱分析
- 1993年
- 对CaBP_(21),一种新发现的兔阑尾B淋巴细胞的钙结合蛋白,作手工Edman化学降解,结果表明其N末端封闭。取15nmole CaBP_(21)用溴化氰裂解,产物不经衍生,直接以RP-HPLC作肽谱分析。肽谱时间2h。得到两个BrCN肽解片段,其中C端片段可用作Edman顺序测定。同时证明了CaBP_(21)为相同亚基2聚体。
- 朱曙东赵惠仁张光毅赵昇皓
- 关键词:钙结合蛋白肽谱高效液相色谱
- 利用乙醇系统RP-HPLC分析PTC-氨基酸被引量:3
- 1994年
- 首次报道了用乙醇作梯度洗脱有机相分离PTC-氨基酸的新方法。同乙腈相比,乙醇毒害性小、价廉、易得。在优化的色谱条件下,乙醇洗脱分辨率、灵敏度、准确度均佳,可成为PTC-氨基酸分析的一种极有前途的新方法。
- 朱曙东赵惠仁赵皓
- 关键词:乙醇PTC氨基酸高效液相色谱
- 磷酸酪氨酸蛋白专一抗体的制备和纯化被引量:7
- 1997年
- 以偶联磷酸化酪氨酸的牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原免疫兔获得抗血清.自抗血清中分离获得抗体.自酪胺合成磷酸酪胺,并偶联到溴化氰活化的Sepharose4B上.抗体经磷酸酪胺-Sepharose4B亲和柱纯化,所得抗体专一性强,Dotblot显示:抗体仅对酪氨酸磷酸化的蛋白质包括酪氨酸磷酸化的血清白蛋白,溶菌酶,卵清蛋白起抗原抗体反应,而不识别非酪氨酸磷酸化的溶菌酶,卵清蛋白,也不识别作为免疫原的骨架成分BSA,也不识别丝氨酸磷酸化的卵清蛋白和苏氨酸磷酸化的卵清蛋白.
- 朱曙东赵文君张光毅
- 关键词:抗体提纯
- 反相高效液相色谱分析赤霉素GA_3含量被引量:1
- 1993年
- 以μBondapak C_(18)柱建立了赤霉素GA_3的HPLC分析方法。反相HPLC梯度条件可使GA_3与包括双键异构体GA_1在内的其它同系物通过离子配对机制获得分离。此法操作简便,不需衍生化;分析快速,色谱全程仅15 min;检测灵敏,0.5μg即可准确定量;线性(r=0.999,n=5)、重复性(RSD<2%,n=4)均佳;结果准确。优越性全面超出各传统分析方法,可望成为赤霉素质量分析的标准方法。
- 朱曙东赵琛赵文君赵升皓
- 关键词:高效液相色谱反相