卢体康
- 作品数:69 被引量:208H指数:8
- 供职机构:深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划深圳出入境检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学经济管理哲学宗教更多>>
- 蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量:6
- 2009年
- 用将纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了3株(1F5、4E5和6A1)可以稳定分泌抗BTV VP7特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗。选用抗VP7单抗(1F5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了BTV双抗体夹心ELISA检测方法。用该ELISA方法分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水疱性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品。结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性。用该ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%。该方法的建立为BTV的检测及蓝舌病的流行病学调查提供了有效工具。
- 杨俊兴花群义陈焕春卢体康吕建强秦智峰陶红林庆燕陈兵徐聪郭莹洁
- 关键词:蓝舌病病毒双抗体夹心ELISA单克隆抗体
- 一对鹅源性成分PCR检测用引物
- 本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域,具体涉及一种用于检测鹅源性成分的检测方法,尤其涉及一对用于检测鹅细胞线粒体核苷酸序列的引物。本发明旨在鉴定饲料、食品等产品中是否含有鹅源性成分。通过设计特异性扩增引物,利用P...
- 宗卉汪燕玲曹琛福陶虹刘建利吕建强花群义卢体康秦智锋
- 文献传递
- 多重实时荧光PCR检测牛、山羊和绵羊源性成分被引量:45
- 2009年
- 根据牛、山羊和绵羊线粒体细胞色素b基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同时鉴别牛、山羊和绵羊源性成分的多重实时荧光PCR方法。采用本文方法与国标GB/T20190-2006方法分别对17种不同源性动物DNA和200份不同来源样品DNA进行牛羊源性成分检测,数据显示两者检测结果符合率达100%,特异性相当。与国标方法相比,本试验方法不需电泳、酶切和测序,即可在一个PCR反应中同时鉴别检测牛、山羊和绵羊3种源性成分,检测效率提高近3倍;灵敏度更高,比国标方法灵敏10倍;适用性更广,除了饲料,还适用于肉品、奶品、生皮和动物油脂等动物产品的牛羊源性成分检测。
- 曾少灵秦智锋阮周曦花群义卢体康吕建强陈书琨曹琛福张彩虹孙洁陈兵吴绍精
- 关键词:细胞色素B基因
- 禽流感抗体胶体金半定量检测方法的建立被引量:1
- 2009年
- 针对目前禽流感抗体主要采用的HI检测方法操作步骤繁琐,耗时较长且必须在实验室内进行判定的缺陷,为了提高检测效率和通关速度,借助胶体金半定量检测技术,以禽流感HI抗体滴度24为临界值,研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡。首先复苏了含A/Chicken/Hongkong/SZ-HI/1997(H5N1)病毒株HA基因重组质粒pETHA的阳性菌,IPTG诱导表达4h后,SDS-PAGE电泳对HA重组蛋白进行了确证。以纯化的HA重组蛋白和灭活的禽流感病毒为主要材料,采用夹心法原理研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡,确定了检测卡的最佳组合反应模式、最佳上样量、最佳反应时间、最适的胶体金颗粒、最佳硝酸纤维素膜和吸水垫。所建立的禽流感抗体胶体金半定量检测卡特异性强,与其他家禽抗原阳性标准血清交叉反应小。检测卡的检测结果与HI检测结果基本一致,检测HI抗体滴度为24鸡血清时结果符合率达94%。
- 陶虹秦智锋卢体康储成群曾少灵林庆燕花群义吕建强詹爱军陈书琨孙洁曹琛福阮周曦陈兵毕英佐
- 关键词:禽流感抗体检测
- 非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立被引量:20
- 2009年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白基因vp73的序列,设计一对特异性检测引物,扩增片段251 bp,建立了检测ASFV的PCR方法。与OIE推荐使用的2组PCR引物进行比对试验,结果表明,3组引物的检测特异性相当,但本研究设计的引物灵敏度至少高出100倍。表明所建立的PCR方法能敏感、快速地检测非洲猪瘟病毒。
- 曾少灵花群义张彩虹曹琛福秦智锋阮周曦杨俊兴卢体康吕建强孙洁陈兵林庆燕杨云庆
- 关键词:非洲猪瘟病毒聚合酶链反应
- 鹿流行性出血病病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量:2
- 2009年
- 为了更好的研究鹿流行性出血病病毒(EHDV)的生物学特性和建立EHDV免疫学检测方法,本研究用纯化的EHDV免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法克隆,获得了2株(1A5和8H6)能够稳定分泌抗EHDV单抗的杂交瘤细胞株。其细胞培养上清效价分别为1∶256和1∶512,腹水效价分别为1∶1024000和1∶2048000;McAb 1 A5和8H6的相对亲和力分别为0.9mg/L和0.7mg/L。间接ELISA结果显示,2株单抗仅与EHDV反应,不与蓝舌病病毒、赤羽病病毒、水疱性口炎病毒、小反刍兽疫病毒和BHK细胞反应,表明2株单抗特异性良好。这2株单抗的获得为研究EHDV生物学特性和建立EHDV检测方法奠定了基础。
- 郭莹洁杨俊兴花群义徐聪林庆燕阮周曦陈兵卢体康詹爱军
- 关键词:单克隆抗体
- 禽流感H7亚型实时荧光RT-PCR检测方法的建立
- H7亚型禽流感致病性强、危害性大,是进出口家禽及禽类产品的主要检疫对象。为了加强对H7亚型禽流感进行检测,建立新的快速检测方法。方法:通过对genbank已报道的H7亚型禽流感病毒的HA基因进行序列分析比较,设计了两组分...
- 卢体康秦智锋阮周曦吕建强花群义孙洁曾少灵曹琛福张彩虹
- 文献传递
- 鹿流行性出血病病毒抗体快速检测试纸条及其制备方法
- 本发明公开了一种鹿流行性出血病病毒(EHDV)抗体快速检测试纸条及其制备方法。其主要应用截短的EHDV VP7表达抗原作为检测线试剂。利用抗原表位分析软件对EHDV VP7进行分析,选取含有主要抗原表位的片段,对其对应的...
- 杨俊兴孙洁连慧香陈兵花群义吕建强曹琛福张彩虹卢体康胡运发秦智锋刘建利
- 文献传递
- 基于McAb和IgG及安全抗原的猪水泡病新型试剂盒研发与应用
- 花群义曹琛福杨俊兴祝贺卢体康吕建强阮周曦艾军曾少灵秦智锋张彩虹孙洁刘建立陈兵
- 猪水泡病病毒VP1单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定:为了更好的研究猪水泡病毒(swine vesicular disease virus, SVDV)的生物学特性和建立SVDV免疫学检测方法,该研究用纯化的SVDV VP...
- 关键词:
- 关键词:试剂盒免疫学检测方法
- 基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制
- 曾少灵卢体康花群义杨俊兴吕建强秦智锋廖立珊阮周曦张彩虹曹琛福唐金明孙洁林庆燕刘建利陶虹陈泽华陈书琨宗卉
- VP73蛋白是非洲猪瘟病毒的主要抗原性结构蛋白,基因结构稳定保守,即使是不同毒株其DNA序列或氨基酸序列的相似性都很高,可超过96%以上.VP73蛋白在自然感染中可诱导产生抗体,也是最早产生的抗体种类之一,且抗原性稳定,...
- 关键词:
- 关键词:猪瘟病毒免疫学检测试剂盒