阮周曦
- 作品数：110 被引量：361H指数：12
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目深圳出入境检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域：本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种驴或驴源性成分的检测方法；尤其涉及一种驴或驴源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别如阿...
- 曹琛福宗卉张彩虹陶虹花群义秦智锋吕建强杨俊兴阮周曦刘建利
- PCR-mtDNA检测鹌鹑源性成分的扩增引物及其检测试剂盒和使用方法
- 本发明主要涉及禽类源性成分的检测，尤其涉及鹌鹑源性成分的检测。一种用于检测鹌鹑源性成分的特异性PCR-mtDNA扩增引物，其主要特点是上下游长度均为18bp的核苷酸，序列为上游引物AF(18bp)：5′-TGAGCTCA...
- 宗卉张慧霞张利平阮周曦吴建平李丽娟陶虹
- 文献传递
- 4种动物虫媒病病毒多重RT-PCR检测方法的建立被引量：5
- 2010年
- 分别设计和合成4对特异性引物,通过对反应条件的优化,初步建立了鉴别蓝舌病病毒(BTV)、鹿流行性出血病病毒(EHDV)、水疱性口炎病毒(VSV)和赤羽病病毒(AKV)的多重RT-PCR检测方法,并对其特异性和敏感性进行了检测。结果表明,所设计的4对引物可对同一样品中的VSV、BTV、EHDV和AKV进行特异性扩增,所扩增的目的片段的长度分别为301、351、537、250bp。建立的四重RT-PCR检测方法能够检测出10-7稀释的细胞培养病毒液,4种病毒之间没有发生交叉反应,说明该检测方法特异性强,敏感性较高。所建立的多重RT-PCR方法可用于上述4种动物虫媒病病毒的快速鉴别诊断,在动物检疫、临床诊断和流行病学调查方面具有较好的应用前景。
- 阮周曦花群义杨俊兴曾少灵曹琛福秦智锋吕建强林庆燕周晓黎
- 关键词：蓝舌病病毒水疱性口炎病毒赤羽病病毒多重RT-PCR
- 多重实时荧光PCR检测牛、山羊和绵羊源性成分被引量：45
- 2009年
- 根据牛、山羊和绵羊线粒体细胞色素b基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同时鉴别牛、山羊和绵羊源性成分的多重实时荧光PCR方法。采用本文方法与国标GB/T20190-2006方法分别对17种不同源性动物DNA和200份不同来源样品DNA进行牛羊源性成分检测,数据显示两者检测结果符合率达100%,特异性相当。与国标方法相比,本试验方法不需电泳、酶切和测序,即可在一个PCR反应中同时鉴别检测牛、山羊和绵羊3种源性成分,检测效率提高近3倍;灵敏度更高,比国标方法灵敏10倍;适用性更广,除了饲料,还适用于肉品、奶品、生皮和动物油脂等动物产品的牛羊源性成分检测。
- 曾少灵秦智锋阮周曦花群义卢体康吕建强陈书琨曹琛福张彩虹孙洁陈兵吴绍精
- 关键词：细胞色素B基因
- 鹿流行性出血病病毒高通量液相芯片检测方法的建立被引量：2
- 2010年
- 为建立可检测鹿流行性出血病病毒(EHDV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中EHDV的VP7基因进行序列分析,设计EHDV特异性探针并用生物素标记,与荧光编码微球偶联后与病毒VP7基因的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Liquichip200)检测荧光信号建立了EHDV快速高通量液相芯片检测方法。检测结果显示,该法具有较好的特异性,不与其他虫媒病病毒反应;检测灵敏度为100个TCID50。建立了快速检测EHDV的液相芯片技术,为进一步搭建EHDV快速高通量检测平台奠定了基础。
- 詹爱军王新卫陈书琨孙洁陈兵阮周曦花群义
- 关键词：液相芯片
- 禽流感抗体胶体金半定量检测方法的建立被引量：1
- 2009年
- 针对目前禽流感抗体主要采用的HI检测方法操作步骤繁琐,耗时较长且必须在实验室内进行判定的缺陷,为了提高检测效率和通关速度,借助胶体金半定量检测技术,以禽流感HI抗体滴度24为临界值,研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡。首先复苏了含A/Chicken/Hongkong/SZ-HI/1997(H5N1)病毒株HA基因重组质粒pETHA的阳性菌,IPTG诱导表达4h后,SDS-PAGE电泳对HA重组蛋白进行了确证。以纯化的HA重组蛋白和灭活的禽流感病毒为主要材料,采用夹心法原理研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡,确定了检测卡的最佳组合反应模式、最佳上样量、最佳反应时间、最适的胶体金颗粒、最佳硝酸纤维素膜和吸水垫。所建立的禽流感抗体胶体金半定量检测卡特异性强,与其他家禽抗原阳性标准血清交叉反应小。检测卡的检测结果与HI检测结果基本一致,检测HI抗体滴度为24鸡血清时结果符合率达94%。
- 陶虹秦智锋卢体康储成群曾少灵林庆燕花群义吕建强詹爱军陈书琨孙洁曹琛福阮周曦陈兵毕英佐
- 关键词：禽流感抗体检测
- 非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立被引量：20
- 2009年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白基因vp73的序列,设计一对特异性检测引物,扩增片段251 bp,建立了检测ASFV的PCR方法。与OIE推荐使用的2组PCR引物进行比对试验,结果表明,3组引物的检测特异性相当,但本研究设计的引物灵敏度至少高出100倍。表明所建立的PCR方法能敏感、快速地检测非洲猪瘟病毒。
- 曾少灵花群义张彩虹曹琛福秦智锋阮周曦杨俊兴卢体康吕建强孙洁陈兵林庆燕杨云庆
- 关键词：非洲猪瘟病毒聚合酶链反应
- 一种水泡性口炎病毒重组N蛋白抗原及其制备方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体地涉及一种水泡性口炎病毒重组N蛋白抗原及其制备方法。一种水泡性口炎病毒重组N蛋白抗原，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示；编码该重组N蛋白抗原的基因，其核苷酸序列如SEQ ID No...
- 孙洁杨俊兴廖立珊刘建利花群义吕建强张彩虹曾少灵阮周曦陶虹
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒VP73蛋白在昆虫细胞中的表达与间接ELISA方法的建立被引量：16
- 2013年
- 为了建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)间接酶联免疫吸附试验(iELISA),利用杆状病毒表达载体pFastBac HTA在昆虫细胞Sf9中表达非洲猪瘟病毒的VP73蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测显示重组蛋白大小约65ku,能与ASFV标准阳性血清发生特异性结合。以此重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,初步建立了检测ASFV血清抗体的iELISA方法。表达的重组蛋白具有良好的特异性,为制备ASFV免疫血清学诊断检测试剂和疫苗提供了材料。
- 曾少灵廖立珊唐金明杨俊兴阮周曦张彩虹曹琛福吕建强秦智锋林庆燕孙洁叶弈优谢晓露花群义
- 关键词：非洲猪瘟病毒间接ELISA
- 鹿流行性出血病病毒VP7-ELISA抗体检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 以原核表达的鹿流行性出血病病毒(epizootic hemorrhagic disease virus of deer,EHDV)VP7蛋白为包被抗原,用HRP标记的兔抗羊IgG作为二抗,建立了检测EHDV群特异性抗体的间接ELISA方法(VP7-ELISA)。用VP7-ELISA方法检测EHDV阳性血清、其他病毒阳性血清及健康羊血清,结果表明,VP7-ELISA方法具有良好的特异性;用VP7-ELISA和琼脂扩散试验(AGID)检测EHDV阳性血清抗体效价,结果表明,VP7-ELISA的敏感性相当于AGID的8～16倍。用VP7-ELISA和AGID同时检测临床样品188份,VP7-ELISA的特异性和敏感性分别为95.9%和100%,两种方法的符合率为96.3%。表明VP7-ELISA可以代替AGID用于EHDV抗体检测。
- 花群义杨俊兴郭莹洁吕建强曾少灵秦智锋陈兵阮周曦董俊
- 关键词：酶联免疫吸附试验
