刘淑清
- 作品数：66 被引量：149H指数：7
- 供职机构：大连医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学哲学宗教更多>>
- 肺鳞癌发生及转移相关蛋白标记物的筛选
- ＜正＞本工作前期经严格的临床资料核实,获得了临床肺鳞癌原位癌及转移癌组织;随后经长达5年病人术后随访和再次采用HE染色法确认病理类型的肺鳞癌肿瘤组织。为进一步寻找肺鳞癌早期诊断及转移及复发预警的蛋白标记物,本研究应用荧光...
- 郝立宏刘淑清孙明忠杨晓寒关株株邓轶芳邵淑娟
- 文献传递
- 中波紫外线与化学致癌物诱导下HaCaT细胞的蛋白表达应答被引量：1
- 2009年
- 对角质形成细胞HaCaT分别进行中波紫外线(UVB)照射、2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激及UVB+DNBS(UD)共同刺激,利用二维荧光差异胶内凝胶电泳(2D DIGE)、DeCyder定量分析软件和HPLC-nESI-MS/MS分析技术,对HaCaT细胞产生的差异表达蛋白进行了鉴定.有65个蛋白质点发生了明显表达差异(P<0.05),与UVB或DNBS单独处理细胞相比,有41个蛋白点表现为UVB和DNBS的正协同效应,13个蛋白点表现为负协同效应,5个蛋白点与UVB单独处理相近,6个蛋白点与DNBS单独处理相近.HPLC-nESI-MS/MS从65个差异表达蛋白质点中共鉴定出60种单一(Unique)蛋白.采用生物信息学方法对这些鉴定蛋白所涉及的分子功能、参与的生物学过程及信号通路进行了系统分析.实验得到了与紫外辐射和化学诱导损伤的直接相关蛋白,有助于研究不同环境条件下皮肤癌的形成及皮肤疾病的有效防护与治疗.
- 孙明忠刘淑清吕晓郭一萌郭春梅辛毅唐建武
- 关键词：中波紫外线
- 采用定量蛋白质组学技术筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关蛋白被引量：27
- 2007年
- 淋巴道转移是上皮来源恶性肿瘤转移的早期阶段,其发生机制不清,一直是肿瘤学研究面临的难题,为寻找淋巴道转移相关蛋白,以一对来源于同一亲本细胞,且淋巴道转移潜能显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株为研究对象,其中Hca-F为高淋巴道转移力细胞株,Hca-P为低淋巴道转移力细胞株,采用定量蛋白质组学技术——荧光差异双向凝胶电泳,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞荧光差异蛋白表达图谱,高通量筛选与肿瘤淋巴道转移相关的蛋白质.经DeCyde软件分析,共得到163个有统计学差异的蛋白质点,选择2倍以上的差异性蛋白质点23个,经质谱鉴定得到17个蛋白质,在Hca-F中高表达的蛋白质有7个:转羟乙醛酶、波形蛋白、肌酸激酶(脑)、膜联蛋白7、膜联蛋白5、烯酰辅酶A水合酶1(过氧化物酶体)、核内异质核糖核蛋白A2/B1异构体1.而在Hca-F中低表达的蛋白质有10个:真核翻译延长因子2、Ero1样蛋白、乙醛脱氢酶2(线粒体)、苹果酸盐脱氢酶2(NAD)、β-内酰胺酶2、谷胱甘肽S转移酶"1、泛素C末端水解酶同工酶L3、内质网蛋白29(前体)、溶血磷脂酶1、微管不稳定蛋白.这些差异性蛋白质的功能涉及到代谢、蛋白质分泌、蛋白质结合、核苷酸结合,钙离子结合、凋亡和调节生长等过程.对这些蛋白质功能的进一步验证,将有助于解析肿瘤淋巴道转移的分子机制.
- 孙成荣唐建武孙明忠刘淑清张宏颖王波宋波张亚楠张竹清赵志英
- 关键词：肝癌淋巴道转移质谱
- HPV18 E7致癌蛋白的高效表达、纯化和鉴定
- 2008年
- 目的为进一步研究人乳头状瘤病毒18(Human papillomavirus 18,HPV18)E7蛋白的结构与功能。方法构建HPV18 E7的谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白质粒pGEX-6P-1-GST-HPV18E7,重组质粒转入大肠埃希菌BL21进行可溶性融合蛋白的高效表达。结果柱上切除法去除GST标签,表达产物经glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化,获得了SDS-PAGE和HPLC-ESI-MS纯度的HPV18 E7均质蛋白,非变性PAGE和凝胶过滤表明HPV18 E7以稳定的单体形式存在于水溶液中。高压液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)分析得到HPV18 E7精确分子量为12865.0 Da,与其理论值吻合。纯化蛋白经HPLC-ESI-MS/MS鉴定为目的产物,鉴定出的9个匹配肽段覆盖率为HPV18 E7整个氨基酸序列的96.5%。结论本文所建立的技术可以有效地大量制备HPV18 E7,为进一步研究其结构与功能和致癌机制奠定了重要的物质基础。
- 孙明忠刘淑清赵宝昌
- 淋巴道转移相关标志物与癌被引量：4
- 2012年
- 肿瘤早期的淋巴道转移是恶性肿瘤患者高死亡率的主要原因,其机制复杂,一直是肿瘤研究的难点.肿瘤淋巴道转移特异性蛋白标记物的发现有助于揭示恶性肿瘤早期发病机制、早期临床诊断和治疗.本文综述了近年来肝癌、胃癌、食管癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌、鼻咽癌和前列腺癌淋巴道转移研究所取得的蛋白质组学成果,并对发现的与以上几种肿瘤淋巴道转移相关的蛋白标记物及其在肿瘤的发生、浸润、转移及病人预后中作用及机制进行了探讨.
- 刘淑清宗军卫郭春梅孙明忠
- 关键词：淋巴道转移肿瘤蛋白质组学
- 耻垢分枝杆菌mc2155应答三种抗生素刺激共同蛋白标记物的筛选
- 随着环境污染和艾滋病的传播，结核病在全球范围“死灰复燃”， 而结核病的耐药性是其发病率愈来愈高的最主要的因素之一，耐药结核病的治疗已成为结核病控制工作中亟待解决的难题.本研究选用与结核分枝杆菌细胞壁结构相同、生长迅速但无...
- 刘淑清辛毅孙明忠
- 关键词：乙胺丁醇异烟肼利福平蛋白质组学生物标记物
- 凝溶胶蛋白表达稳定下调的小鼠肝癌高淋巴道转移力Hca-F细胞株的构建被引量：2
- 2009年
- 在前期蛋白质组学和基因组学研究发现凝溶胶蛋白(Gelsolin,GSN)是一个潜在促进小鼠肝癌淋巴道转移基因基础上,本次实验设计合成3条GSN的shRNA短发夹序列(shRNA1、2、3),并成功将它们构建入pSilencer3.1质粒,重组质粒转染鼠肝癌高淋巴道转移力Hca-F细胞,获得了稳定转染的pSilencer-GSN-Hca-F细胞株.结果表明:GSN空白对照组和无关序列对照组细胞中在mRNA及蛋白表达水平均相近;与空白对照组相比较,3个重组质粒在mRNA水平对GSN抑制率分别为46.8%、48.2%、20.2%,在蛋白水平对GSN的抑制率分别为73.9%、45.1%、31.2%;shRNA1重组质粒的抑制效果最明显,统计学意义显著(P<0.01).通过RNA干扰和基因转染技术成功建立了GSN表达稳定下调的鼠肝癌Hca-F细胞株,为进一步研究GSN在恶性肿瘤淋巴道转移中的作用奠定了基础.
- 王绍清唐建武孙明忠刘淑清王波
- 关键词：凝溶胶蛋白淋巴道转移肝癌基因转染
- 马兜铃酸致癌作用的分子毒理学关键点被引量：5
- 2019年
- 马兜铃酸(AAs)几乎满足致癌物的所有标准与条件并导致人体癌症,被确定为一级致癌剂。本文将围绕着化学致癌物评价标准与致癌作用机制过程进行探讨与比较,以马兜铃酸为代表性典型范例,针对有关理念与概念综述现有的研究进展解读以下关键问题:①确定致癌物必须清晰其作用机理吗?致癌机理对致癌物评判的影响是什么?②马兜铃酸为何被判定为一级致癌物?③碱基对替换突变特征是什么?④AAs经口暴露却为何更易致泌尿系统癌症?⑤肾脏与肝脏间代谢与转运差异及其对AAs致毒的影响是什么?综上,作者认为,通过马兜铃酸现代毒理学评价的主要关键点进行解读,可深入理解并遵循国际研究规范,力抓中药及其成分的分子毒理学评价与分类,对于比较易受忽视的基因毒评价领域,需以科学严谨的方式系统收集、整理相关有效评价与证据,这将为我国在相关类似事件研究与评价中提供借鉴与规范。
- 马红黄超王方园王亦男刘淑清杨凌
- 关键词：马兜铃酸致癌性
- 高功能孤独症成人隐喻语义加工的弱中央统合特点被引量：2
- 2017年
- 目的:探究高功能孤独症(HFA)成人深层次的非字面语义加工中是否存在弱中央统合特点及其与隐喻熟悉性的关系。方法:从孤独症康复机构及普通学校选取HFA成人以及智商匹配的正常发育(TD)成人各20人参与行为实验。启动任务以传统隐喻句和新异隐喻句为启动句,以隐喻关系解释词,喻体关联词,无关词及假词为目标词,考察两组受试者对隐喻语义的加工情况。再认任务以启动任务的目标词为主要材料进一步考察两组受试者对启动句的加工深度情况。结果:HFA成人在新异隐喻和传统隐喻启动条件下对喻体关联词加工效率最高,反应时为(960.7±9.7)ms、(747.5±12.8)ms,正确率为94.8%、98.4%;TD成人在新异隐喻和传统隐喻启动条件下对隐喻关系解释词加工效率最高,反应时为(817.4±9.0)ms、(619.5±9.9)ms,正确率为93.3%、98.2%。再认任务中,HFA成人在新异隐喻和传统隐喻条件下对喻体关联词再认效率最高,反应时为(732.2±11.9)ms、(788.8±11.7)ms,正确率为78.9%、81.8%;TD成人在新异隐喻和传统隐喻条件下对隐喻关系解释词再认效率最高,反应时为(694.0±10.8)ms、(696.1±11.2)ms,正确率为76.7%、84.2%。结论:在隐喻等深层语义加工层面,高功能孤独症成人存在弱中央统合的认知加工特点,且在隐喻语义加工中,该特点随句子的熟悉度降低而更加明显。
- 李骋诗胡金生刘颖李松泽王琦刘淑清
- 关键词：高功能孤独症隐喻语义加工
- 中国蛇岛蝮蛇毒腺cDNA文库ESTs序列测定及生物信息学分析
- 2012年
- 前期我们构建了中国蛇岛蝮蛇(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)毒腺(GSSG)的cDNA(GSSG-cD-NA)文库。本文从构建的GSSG-cDNA文库阳性重组子中随机挑选了216个单克隆进行5'端表达序列标签(EST)单向测序,获得了211条高质量的ESTs。生物信息学序列比对分析结果表明84个克隆为已知功能基因,29个克隆为未知功能基因,98个克隆为新基因,分别占总ESTs的39.8%、13.7%和46.5%。成功获得了GSSG的部分ESTs序列,为GSS蛋白活性组分基因的克隆、表达和功能研究奠定了一定基础。
- 郭春梅孙明忠郑体花任一鑫刘淑清
- 关键词：CDNAESTS
