任丽
- 作品数：9 被引量：27H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金World Health Organization艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同片段HIV-1膜蛋白三聚体的构建、表达及其免疫原性被引量：1
- 2014年
- 目的构建、表达不同片段1型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)的膜蛋白三聚体,并检测其免疫原性。方法以中国主要流行株HIV-1CRF_07 BC亚型基因为模板构建pFUSE-gp160重组质粒,以pFUSE-gp160为模板构建pFUSE-gp140FF、pFUSE-gp120FF、pFUSE-gp41FF、pFUSE-N55FF、pFUSE-N28FF重组质粒,将重组质粒分别转染293F细胞,转染120 h后,收获上清,经Ni-NTA superflow、nProtein A SepharoseTM4 Fast Flow及Superose 12 Prep Grade分子筛纯化后,分别进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。将各重组蛋白联合MF59佐剂经大腿肌肉注射免疫豚鼠,100μg/只,分别于第1、30及60天各免疫1次,初次免疫前7 d及末次免疫后第90天心脏采血,分离血清,ELISA法及假病毒系统分别检测血清特异性抗体效价及中和抗体滴度。结果质粒pFUSE-gp160、pFUSE-gp140FF、pFUSE-gp120FF、pFUSE-gp41FF、pFUSE-N55FF、pFUSE-N28FF经测序鉴定构建正确。各纯化蛋白的SDS-PAGE及Western blot鉴定均可见目的条带,gp120FF和gp140FF均可高通量表达,其表达量分别为6和2.5 mg/L,gp41FF、N55FF和N28FF蛋白的表达量均低于0.5 mg/L,纯化后的纯度均较高。gp140FF组和gp120FF组豚鼠血清抗体效价分别为3.2×105和5.33×105、中和抗体滴度分别为405和462,均显著高于其他组(P<0.05)。结论 gp140FF和gp120FF能诱导豚鼠产生较强的体液免疫反应和中和抗体,本实验为HIV-1疫苗的研发提供了参考。
- 李勋任丽康延申牛德云郝彦玲何彦平邵一鸣齐智
- 关键词：膜蛋白三聚体免疫原性
- 2013～2014年中国大陆四株不同基因型麻疹病毒分离株血凝素基因特征分析被引量：4
- 2016年
- 研究2013～2014年中国大陆分离到4株不同基因型麻疹野毒株血凝素蛋白（HA）编码基因的基因和氨基酸特征及变异程度。选取2013～2014年我国优势基因型H1a1株,输入基因型B3、D8和D9各1株作为代表株,核酸提取,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增H基因编码区全序列（1 854bp）并测序,使用sequencher5.0进行序列拼接,并与GenBank下载的H1基因型4株、B3基因型和D8基因型各8株、D9基因型2株及中国A基因型麻疹疫苗株沪191（S191）和长47（C47）H基因全序列进行比较分析,使用MEGA5.0比对并构建亲缘性关系树及分析其核苷酸和氨基酸差异。4株不同基因型野毒株与A基因型疫苗株H基因核苷酸和氨基酸同源性为94.2%～96.7%,95.4%～96.7%,氨基酸差异数为20～28,其中Beijing14-1（H1a）与A基因型疫苗株H基因同源性最低。H1a毒株与1993～1994年分离的毒株核苷酸同源性较高为97.7%～98.2%。Beijing14-1（H1a）和Shanghai14-1（B3）第240位点氨基酸位点由S→N,导致HA蛋白的1个N-糖基化位点丢失。4株野毒株与中国A基因型疫苗株H基因核苷酸和氨基酸同源性较高,且重要中和抗原位点未出现明显突变。从基因层面上分析A基因型疫苗株对我国流行的H1a亚型及B3、D8和D9输入性基因型野毒株感染仍具有较好的保护效果。
- 任丽王慧玲王常银房学强许文波王英张燕
- 关键词：血凝素蛋白麻疹病毒基因特征输入性
- HIV-1膜蛋白gp140三聚体疫苗的构建和免疫原性研究
- 2014年
- 目的构建表达中国流行株HIV-1CRF_07B/C亚型(HIV-1CN54)膜蛋白gp140和gp140FdFc三聚体疫苗,比较其免疫原性。方法构建gp140和gp140FdFc重组质粒,将质粒分别瞬时转染293F细胞,120小时后收获上清液,经纯化、浓缩、PBS置换、BCA试剂盒检测蛋白质浓度后,利用SDS-PAGE电泳检测蛋白分子量大小及纯度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其与阳性病人血清的反应性。通过肌肉注射的方式分别免疫兔子,取兔子血清,ELISA检测血清抗体,并通过假病毒系统检测血清中和抗体滴度,比较gp140和gp140FdFc的免疫原性。结果成功获得基因重组gp140和gp140FdFc蛋白。免疫兔子后,gp140和gp140FdFc蛋白质均有很强的体液免疫应答,抗gp160抗体滴度分别为2.24×105和4.48×105,但gp140组未诱导出中和抗体,gp140FdFc组对4种假病毒具有一定的中和活性。结论 Gp140FdFc三聚体能诱导兔子产生较强的结合抗体和一定的中和抗体反应,可作为潜在的HIV-1免疫原进行疫苗研究。
- 李勋任丽陈仙子康延申牛德云邵一鸣齐智
- 关键词：疫苗中和抗体
- 中国2014年麻疹风疹实验室网络运转情况分析被引量：4
- 2016年
- 目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2014年麻疹风疹实验室网络(Measles and Rubella Laboratory Network,MRLN)的运转状况。方法分析2014年中国麻疹监测信息报告管理系统中的实验室数据和全国MRLN监测数据,评价中国MRLN运转的各项指标。结果在血清学检测方面,2014年全国共采集散发监测病例血标本103 983例,标本采集率96.11%;实验室确诊麻疹病例为48 344例,占监测病例的37.90%。共证实麻疹暴发276起、风疹暴发7起。在麻疹暴发中,256起(92.75%)经实验室确诊;213起(77.17%)采集了病原学标本。在病毒学监测方面,2014年30个省级麻疹风疹实验室(Measles and Rubella Laboratory,MRL)共送检麻疹病毒4 919株,其中4 872株为中国本土流行的H1a基因亚型,其余为10株B3、3株D8、9株D9、1株G3和24株A基因型(疫苗相关株);15个省级MRL共送检210株阳性风疹病毒,其中74株1E基因型,135株2B基因型和1株2A基因型。在质量控制方面,国家MRL作为世界卫生组织(WHO)西太平洋区麻疹风疹参比实验室,在2014年通过了WHO的职能考核和现场认证;同时陕西、山东、云南、贵州、山西、江西、辽宁和青海8个省级MRL通过了WHO专家组的现场认证;32个省级MRL全部通过了由WHO和国家MRL组织的职能考核。结论中国2014年MRLN运转良好,为监测病例的实验室诊断和鉴别诊断、麻疹和风疹病毒学的监测提供了良好的技术平台,证实本土麻疹基因型H1仍在持续循环流行,同时有4个基因型病毒多次从国外输入,提示加强监测阻断输入病毒传播势在必行。
- 王慧玲任丽王淑蕾宋金华毛乃颖朱贞许松涛许文波张燕
- 关键词：血清学检测病毒学监测
- 我国不同人群单纯疱疹病毒2型感染率及危险因素Meta分析被引量：5
- 2016年
- 目的 了解我国不同人群单纯疱疹病毒2型（HSV-2）感染率水平及其危险因素.方法 采用Statal2.0对我国不同人群HSV-2感染率及相关危险因素数据进行meta分析、应用SPSS22.0进行亚组间统计学检验.结果 普通人群HSV-2感染率为16.22％ （95％ CI：12.87％ ～ 19.91％）,女性高于男性,分别为16.89％（95％ CI：12.91％～21.32％）和11.69％ （95％ CI：9.07％ ～ 14.56％）.不同人群既往感染率各不相同,以女性性工作者（FSW） 44.77％ （95％ CI：38.47％ ～ 46.36％）较高.多数高危人群感染率高于普通人群.随着时间推移,普通人群既往和近期感染率呈下降趋势,高危人群既往HSV-2感染率先升后降.影响因素分析提示性别、梅毒感染、HIV阳性等是感染HSV-2的危险因素.结论 我国不同人群HSV-2感染率较高,以女性、高危人群和疑与HSV-2感染相关疾病患者更为突出.建议将HIV干预和包括HSV-2在内的性病相结合、加强HSV-2监测、加强育龄妇女及孕妇HSV-2检测控制HSV-2传播.
- 邱琪任丽许文波王英
- 关键词：单纯疱疹病毒2型感染率META分析HERPESVIRUSTYPE
- 中国2015年麻疹风疹实验室网络运转与评价被引量：3
- 2017年
- 目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2015年麻疹风疹实验室网络(Measles/rubella laboratory network,MRLN)的运转状况。方法采用描述流行病学方法分析2015年中国麻疹监测信息报告管理系统中的实验室数据和全国MRLN监测数据,评价中国MRLN运转的各项指标。结果 2015年全国共报告监测病例104 948例,其中麻疹病例42 382例,40 717例(96.07%)为实验室确诊病例;风疹病例8 143例,6 324例(77.66%)为实验室确诊病例。共报告暴发疫情400起,其中麻疹暴发329起,风疹暴发31起。共采集散发监测病例血标本90 305例,标本采集率97.47%;麻疹、风疹IgM检测阳性率分别为38.75%、6.30%。共采集散发监测病例病原学标本45 032例,标本采集率48.60%;麻疹、风疹病毒核酸检测阳性率分别为35.74%、5.43%。29个省级麻疹风疹室验室(Measles/rubella laboratory,MRL)共送检麻疹病毒3 967株,其中D_9基因亚型1株、A基因型(疫苗相关株)16株、中国本土流行的H_(1a)基因亚型3 950株。16个省级MRL共送检风疹病毒316株,其中1E基因型4株、2B基因型312株。国家MRL和32个省级MRL全部通过2015年世界卫生组织的职能考核。结论中国2015年MRLN运转良好,证实本土麻疹基因型H1仍在持续循环流行,为中国消除麻疹奠定了良好的实验室网络技术支撑。
- 王慧玲毛乃颖任丽高凌玉朱贞许松涛崔爱利张燕许文波
- 关键词：血清学检测核酸检测病毒学监测
- 新疆部分地区麻疹野病毒分离与基因特征分析
- 2015年
- 目的探讨新疆目前流行的麻疹病毒的基因型别和特征。方法采用Vero/SLAM细胞分离培养麻疹病毒,通过反转录-聚合酶链反应方法扩增麻疹病毒N基因羧基末端456 bp片段,并对PCR产物进行序列测定和同源性分析。结果 2013 2014年新疆分离到7株麻疹病毒均为H1a基因亚型,与Shanghai-191同源性为89.5%~87.3%;与世界卫生组织推荐用于鉴定基因型别的6株H1基因型同源性为91.0%~99.3%,与目前3株流行H1a亚型同源性为97.3%~100.0%。结论 H1a基因亚型仍为新疆本土流行病毒株的优势亚型,近年来引起新疆麻疹流行的麻疹病毒基因序列存在着不同程度的差异,可能来自于不同的传播链,麻疹病毒株H1a亚型的持续传播与易感人群的累积和人口流动有密切关系。
- 关静任丽陈涛郭强王慧玲甫尔哈提关晓冬张燕
- 关键词：麻疹病毒基因型
- 2013～2014年我国输入性B3基因型麻疹病毒的基因特征分析被引量：6
- 2017年
- 研究2013~2014年中国大陆分离到的输入性B3基因型麻疹野毒株的N蛋白羧基端核苷酸和氨基酸特征。应用MEGA6.0软件对2013~2014年输入我国的B3基因型麻疹病毒、GenBank下载的WHO参考株、2013~2014年全球流行的B3基因型麻疹病毒代表株和中国疫苗株泸191(S191)构建基于N蛋白COOH端450个核苷酸片段序列的亲缘性关系树、分析其核苷酸和氨基酸差异。13株B3基因型中国分离株间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为99.7%~100%和100%;与B3基因型WHO参考株的核苷酸和氨基酸同源性分别为96.6%~96.8%和95.3%~97.3%;与2013~2014年流行的B3基因型的麻疹野病毒代表株的核苷酸和氨基酸同源性分别在90.0%~100%和87.9%~100%;与S191的核苷酸和氨基酸同源性分别为93.3%~93.5%和87.2%。本研究对积累我国麻疹病毒分子流行病学基线数据具有很重要的意义,随着我国进入麻疹消除加速阶段,将会监测到更多的非本土基因型的输入,需要进一步加强病毒学监测,防止输入性麻疹野病毒在我国扩散和传播。
- 王慧玲王淑蕾任丽毛乃颖张燕许文波
- 关键词：麻疹病毒病毒学监测亲缘性分析
- 中国大陆1993～2013年流行的麻疹病毒H1基因型血凝素基因变异特征被引量：6
- 2017年
- 为探讨2013年引起中国大陆麻疹复发的麻疹野病毒中和抗原血凝素(Hemagglutinin,HA)的变异动态,本研究对1993~2013年中国大陆流行的麻疹病毒H1基因型血凝素(HA)编码基因和氨基酸变异进行系统分析,为评价中国疫苗对2013年流行的麻疹野病毒的保护效果提供科学依据。选取2013年8株麻疹病毒代表株,扩增HA基因编码区序列(1 854bp)并进行序列测定和分析。从GenBank上下载45株1993~2012年中国流行株、中国疫苗株上海191(S-191)和长春47(C-47)和24株WHO参考株HA基因编码区序列,MEGA5.05构建亲缘关系树和进行氨基酸位点比对,分析重要中和抗原位点的变异。使用BioEdit进行同源性关系分析。根据HA基因序列的亲缘性关系分析,2013年麻疹病毒代表株均位于H1a亚型的第3分支,且2000年以后分离的H1a亚型的麻疹野毒株均属于该分支;8株2013年麻疹病毒代表株核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.6%~99.8%和97.8%~100.0%,与1993~2012年H1a基因亚型麻疹病毒的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.6%~99.6%和97.0%~99.6%,与中国疫苗株S-191和C-47的核苷酸和氨基酸同源性分别为94.3%~94.7%和94.6%~95.4%;与中国疫苗株S-191原型野病毒氨基酸序列比对,1993~2013年麻疹病毒代表株HA主要中和抗原位点未发生重大变异,但包括2013年代表株的近年流行的H1a麻疹毒株在氨基酸第240位由丝氨酸突变成了天冬酰胺(Ser240Asn),导致潜在的糖基化位点NLS238~240的缺失,但H1基因型麻疹病毒均保留有4个潜在的糖基化位点。中国大陆流行的麻疹病毒H1基因型在重要的中和抗原位点均保持稳定,中国使用的麻疹疫苗对中国现流行的麻疹病毒H1a亚型具有较好的保护效果。中国应继续加强流行麻疹病毒血凝素基因的动态监测,以评价我国疫苗对流行麻疹野病毒的保护效果,为我国消除麻疹提供疫苗使用的科学依据。
- 高凌玉张燕王慧玲任丽毛乃颖许松涛许文波
- 关键词：麻疹病毒血凝素基因特征
