王吉静 作品数:10 被引量:13 H指数:3 供职机构: 北京市心肺血管疾病研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
iCys激光定量成像细胞仪对全心脏化学发光和荧光标记的定量分析 2014年 目的:利用iCys激光定量成像细胞仪(iCys research imaging cytometer,RIC)对小鼠全心脏切片中标记的化学发光或荧光信号进行大面积、高速度、高分辨率的扫描,根据所获得图像统计分析小鼠全心脏切片中荧光和化学发光的阳性细胞比例,并分群追踪分析对象的图像以排查假阳性。方法:利用血管紧张素II灌注小鼠,对心脏切片进行巨噬细胞特异性的mac-2抗体的免疫组化,通过光电二极管(photodiode,PD)检测器收集二氨基联苯胺法(DAB染色法)的化学发光信号获得全心脏相关影像,进而分析图片以统计全心脏中的巨噬细胞的阳性面积;利用小鼠心肌梗塞模型后心脏进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)标记,通过器光电倍增管(photo multiplier tube,PMT)检测器收集荧光信号获得全心脏相关影像,进而分析图片以统计全心脏中的细胞死亡率。结果:400倍放大时iCys激光定量成像细胞仪对小鼠全心脏切片的扫描花费大约20min,获得大约300张局部图片,软件自动拼合成全心脏切片图。通过对全心脏图片的统计分析显示:AngII灌注的全心脏中DAB染色法显示的mac-2抗体阳性巨噬细胞阳性面积为(2.36±0.7)%;全心脏的TUNEL标记后荧光阳性的死亡细胞比率为(32.3±4.1)%。结论:iCys激光定量成像细胞仪可以对病理切片样本中的化学发光以及荧光信号进行大面积、高速度、高清晰的扫描,分析软件可以进行后期的图像的定性定量分析,并且可以通过对分析对象的追踪图像显示以明确统计分析的正确性。 邱淑兰 王克芳 王吉静 朴春梅 杜杰关键词:巨噬细胞 用于预测儿童青春期持续肥胖的试剂盒及其应用 本发明公开了用于预测儿童青春期持续肥胖的试剂盒及其应用。本发明提供了检测待测儿童肠道菌群中目的菌丰度的物质在制备用于预测儿童单纯性肥胖的产品中的应用,所述目的菌为Firmicutes、Clostridia、Clostri... 杜杰 郑帅 王吉静 刘婷婷强化玉米饮食对小鼠肠道菌群结构和功能的影响 被引量:3 2019年 【目的】采用高通量测序方法研究强化玉米饮食对小鼠肠道菌群结构的影响以及可提高宿主糖代谢相关菌群功能基因的分析。【方法】分别给予两组小鼠(各10只)常规饮食和强化玉米饮食(1/4的玉米粉加3/4的常规饮食成分),喂养10周,之后采集小鼠粪便样本,提取DNA,使用高通量测序仪进行宏基因组测序分析,比较两组小鼠肠道菌群和功能基因的差异。【结果】两组小鼠的终末体重没有明显差异。各样本DNA的测序有效率足够,肠道菌群的多样性存在一定差异。属放线菌门(Actinobacteria)的双歧杆菌(Bifidobacteriales)-B.pseudolongum分支和Coriobacteriia-Collinsella/Enterorhabdus分支的丰度在强化玉米饮食组的小鼠中显著升高,相应的宏基因组中涉及糖酵解和胆汁酸合成的一些酶和功能单元的含量也在强化玉米饮食组显著升高。【结论】强化玉米饮食可以提高肠道菌群中双歧杆菌等益生菌的丰度,增加宏基因组糖脂代谢相关基因和通路的含量,从而可能促进宿主的糖代谢功能。 郑帅 朴春梅 朴春梅 刘婷婷 王吉静 王绿娅 刘婷婷关键词:药食同源 高通量测序技术 Affymetrix基因芯片研究高血压对小鼠血管基因表达的影响 被引量:3 2014年 目的:利用基因芯片技术研究高血压早期血管损伤中基因表达变化。方法:30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,分为对照组和Ang II(血管紧张素II)组,采用置入式胶囊渗透压泵分别灌注0.9%氯化钠液和Ang II(1 500 ng·kg-1·min-1),于第3天,第7天取胸主动脉,提取核糖核酸(RNA),进行基因芯片分析;利用鼠尾套法检测Ang II灌泵3 d及7 d后小鼠尾动脉血压、苏木精伊红染色(HE)染色检测血管结构;实时定量聚合酶链式反应(PCR)验证Ang II灌泵7 d时部分芯片结果。结果:与对照组相比,Ang II组在灌泵7 d时血压升高[(104±4)vs.(146±6)mmHg(1mmHg=0.133kPa),P<0.001];基因芯片结果显示3d时有67个基因表达上调,27个基因表达下调,7d时有31个基因表达上调,没有检测下调基因;PCR验证磷酸分泌蛋白1(SPP1),金属蛋白酶组织抑制因子1(Timp1),4域跨膜超家族A,4C(MS4a4c),胰岛素样生长因子结合蛋白2(Igfbp2),重组激活基因1(Rag1)均表达升高。结论:Ang II导致高血压情况下,血管组织基因表达变化,可能参与高血压血管损伤的过程。 王吉静 李玉琳 王月丽 郑帅 王绿娅 李汇华 杜杰关键词:高血压 血管损伤 基因芯片 炎症反应 骨髓来源单核巨噬细胞对高血压小鼠心脏损伤和重构的影响 被引量:2 2013年 目的观察高血压介导骨髓来源单核巨噬细胞在心脏浸润的情况,探讨其对高血压心脏损伤和重构的影响。方法 20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和AngⅡ灌注组,每组10只,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和AngⅡ,采用鼠尾套法监测小鼠动脉血压。于灌注后7 d,采用免疫组织化学、Masson染色和流式细胞技术观察心脏纤维化和心脏中单核巨噬细胞的浸润;采用流式细胞技术和实时荧光定量PCR(rt-PCR)观察循环中单核细胞上CCR2受体表达和心脏中CCR2受体的配体MCP-1表达;16只雄性小鼠随机分为4组,每组4只,采用尾静脉注射脂质体包裹氯膦酸二钠方法清除小鼠体内巨噬细胞,以注射脂质体包裹生理盐水为对照组,分别灌注生理盐水和AngⅡ后观察心脏纤维化。结果与生理盐水灌注对照组相比,AngⅡ灌注后1 d收缩压开始升高,7 d血压显著升高[收缩压:(157.0±13.9)mm Hg比(93.0±11.1)mm Hg,P<0.01],心脏中胶原沉积增加(4.1%±0.7%比0.4%±0.1%,P<0.01),Ⅰ型胶原和肌成纤维细胞的标志物α-SMA的蛋白表达增加。流式检测示心脏中CD45+F4/80+细胞浸润增加;心肌组织半乳糖凝集素2(Mac-2,巨噬细胞标志)和CD68阳性巨噬细胞浸润增加;外周血CD45+CD11B+单核细胞表达CCR2,心脏中MCP-1的mRNA表达增加;小鼠去除巨噬细胞后,AngⅡ灌注7 d的心脏中巨噬细胞浸润减少,心脏纤维化程度减轻。结论高血压促进骨髓来源单核巨噬细胞在心脏的募集,巨噬细胞浸润与心脏纤维化发生相关,去敲除巨噬细胞能够抑制高血压心脏纤维化。 李玉琳 张聪聪 吴依娜 王春筱 阿希 王吉静 王月丽 王绿娅 杜杰关键词:心脏重构 巨噬细胞 趋化因子类 高血压对小鼠血管骨桥蛋白表达的影响 被引量:2 2014年 目的研究高血压早期血管损伤中基因表达变化。方法 30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和Ang II 1500 ng/(kg·min),于第7天取主动脉,提取RNA后进行基因芯片分析;采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;实时定量PCR(Real-time PCR)检测骨桥蛋白(OPN)的表达;取其胸主动脉进行组织切片,免疫组织化学染色观察骨桥蛋白的表达。结果与对照组相比,Ang II组在灌泵7天时血压升高[(105±7)vs.(148±14)mmHg,1mm Hg=0.133 kPa,P<0.001];基因芯片结果显示骨桥蛋白基因表达明显升高(>50倍);real-time PCR验证骨桥蛋白表达升高3.9±0.9倍,P<0.05;免疫组化显示主动脉OPN表达增加。结论 Ang II导致高血压情况下,血管组织OPN表达增高,可能参与高血压血管损伤的过程。 王吉静 李玉琳 王月丽 郑帅 贾立昕 王绿娅 杜杰关键词:高血压 血管损伤 炎症反应 骨桥蛋白 血管紧张素II 落实科学在护理中应用的研究 2014年 落实科学作为一个新兴的预防及医学领域,旨在解决基于循证的有效干预措施及科研成果难以实施到预防及诊疗领域的问题,促进循证干预措施的有效实施。本文阐述了落实科学的必要性、概念和过程,探讨了护理领域如何将科研成果落实到临床实践中的解决办法。 宋玲 王吉静 杜杰关键词:护理 用于预测儿童青春期持续肥胖的试剂盒及其应用 本发明公开了用于预测儿童青春期持续肥胖的试剂盒及其应用。本发明提供了检测待测儿童肠道菌群中目的菌丰度的物质在制备用于预测儿童单纯性肥胖的产品中的应用,所述目的菌为Firmicutes、Clostridia、Clostri... 杜杰 郑帅 王吉静 刘婷婷文献传递 细胞组学技术在心肌细胞凋亡研究中的应用 被引量:4 2013年 目的:利用高内涵筛选(high-content screening,HCS)、流式细胞术(flow cytometry,FCM)、激光扫描细胞分析术(laser scanning cytometry,LSC)等细胞组学技术对心肌细胞凋亡特征进行研究。方法:缺氧缓冲液处理H9C2心肌细胞,建立体外心肌细胞凋亡模型,以常规DMEM培养为对照组,处理6h后收取细胞行Annexin V-FITC、PI染色,分别利用HCS和FCM检测,分析心肌细胞早、晚期凋亡以及坏死的比例。利用小鼠心脏左前降支结扎,建立心肌梗死在体模型,术后28d收取心脏,进行TUNEL染色,利用HCS和LSC分析心脏组织健存区、交界区和梗死区心肌细胞的凋亡。结果:缺氧缓冲液处理H9C2心肌细胞6h后,HCS和FCM方法均显示早期凋亡细胞缺氧组与DMEM组,差异有统计学意义,分别为[(17.69±2.85)vs.(5.31±0.86)%,P<0.01]和[(12.18±0.61)vs.(3.08±0.15)%,P<0.01],晚期凋亡与坏死细胞比例变化不明显,表明缺氧缓冲液处理6h主要诱导心肌细胞早期凋亡。小鼠心肌梗死28d后,HCS和LSC方法均显示心脏梗死区和交界区有凋亡细胞,梗死区更明显,整体凋亡率分别为6.08%和4.35%,健存区无细胞凋亡。结论:HCS和FCM方法能够可靠、稳定和量化评价心肌细胞凋亡,准确区分细胞早、晚期凋亡和坏死,两种方法结果一致;HCS和LSC方法还可分析组织水平的细胞凋亡;而LSC优势在于可明确凋亡细胞的组织定位。 崔巍 李玉琳 王吉静 张聪聪 吴依娜关键词:流式细胞术 糖皮质激素受体对小鼠心梗后心功能和心脏重塑的保护作用 目的:利用肌酸激酶Cre重组酶(MCK-Cre)小鼠和糖皮质激素受体位点(GR loxP-floxed)小鼠杂交产生肌肉特异敲除GR的小鼠(MGRKO),观察MGRKO小鼠心脏GR表达情况,证明MGRKO小鼠可以用于研究... 王吉静关键词:心肌梗死 糖皮质激素受体 心脏重塑 心功能 疗效评价 文献传递