杨新彬
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 供职机构:汕头大学医学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 先天性性别异常临床研究方法
- 2011年
- 先天性性别异常(disorders of sex development,DSD)是一组病因复杂,临床表现多样的先天性疾病.大约有一半的病例分子生物学诊断不明确,需要以临床特征诊断.这类疾病活产儿发病率在1:4 500~1:5 000之间,某些亚类发病率约1:100 000甚至更低.
- 杨新彬蒋学武
- 关键词:先天性疾病分子生物学诊断发病率活产儿
- 胰岛素样因子3对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响被引量:1
- 2011年
- 目的探讨胰岛素样因子3(INSL3)对体外培养的小鼠睾丸引带细胞增殖和收缩活性的影响。方法手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织,进行原代细胞培养后传代。将传代细胞随机分为正常对照组和实验组,实验组加入INSL3,浓度分别为3.3×10-3μmol.L-1、3.3×10-4μmol.L-1、3.3×10-5μmol.L-1及3.3×10-6μmol.L-1,分别持续作用12 h、24 h、48 h,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其细胞增殖情况;细胞免疫荧光和流式细胞术检测其细胞纤维状肌动蛋白(F-actin)的结构变化及表达情况。结果不同浓度INSL3作用后的不同时间点,检测细胞增殖和收缩活性的相关指标,结果均存在时间-剂量效应,且差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组及各实验组细胞均呈持续性增殖,24 h后增殖更明显。与正常对照组比较,INSL3可刺激睾丸引带细胞骨架重塑,细胞周边肌动蛋白丝带增多,胞质中微丝F-actin明显粗大、变长,细胞中F-actin表达量增加。各实验组中以3.3×10-3μmol.L-1组变化尤其明显。结论 INSL3对睾丸引带细胞增殖和收缩活性有直接促进作用,可能参与睾丸引带发育甚或睾丸下降过程的调节。
- 李建宏祁艳卫蒋学武段守兴张镟杨新彬唐水平
- 关键词:胰岛素样因子3睾丸引带肌动蛋白小鼠
- 己烯雌酚对小鼠睾丸引带组织中胰岛素样因子3受体LGR8的影响
- 目的: 近年来许多研究表明环境雌激素(EEs)可以造成男性生殖系统分化和发育异常,且大多数与睾丸发育、下降不全相关,而睾丸引带与睾丸发育、下降关系密切。在胚胎发育过程中,睾丸由高位腹腔下降到阴囊分为两个阶段,经腹下降阶...
- 杨新彬
- 关键词:己烯雌酚胰岛素样因子3动物模型
- 己烯雌酚对小鼠睾丸引带中LGR8表达的影响被引量:3
- 2012年
- 目的:通过体内实验研究己烯雌酚(DES)对小鼠睾丸引带中胰岛素样因子3受体LGR8的影响,从而探讨外源性雌激素对小鼠睾丸下降的影响。方法:8~10周龄KM孕鼠随机分为正常组、空白对照组和实验组(0.1、1.0、10、100μg/kg DES 4个剂量组),共6组,每组20只。于孕9~17 d每天分别给予实验组妊娠小鼠不同剂量的DES(0.1、1、10、100μg/kg),空白对照组给予等体积DMSO+生理盐水,正常组不给药。应用免疫组化和RT-PCR分别检测胎鼠和幼鼠睾丸引带中LGR8蛋白和mRNA的表达。结果:HE染色可见胎鼠正常组、对照组睾丸引带发育良好,中间的间叶组织和外周的肌源细胞之间分界清楚;实验组可见睾丸引带发育不良,间叶组织和肌源细胞之间无明显分界,组织结构紊乱。幼鼠正常组和实验组睾丸引带发育未见明显不同。LGR8表达于睾丸引带肌源细胞和间叶组织细胞,以肌源细胞表达为主。实验组LGR8阳性表达较正常组弱,胎鼠各实验组和幼鼠DES 1、10、100μg组与同发育阶段的正常组相比均有统计学意义(P<0.05)。DES高剂量(10、100μg)组与同发育阶段的正常组相比LGR8 mRNA表达增加(P<0.05)。各实验组PCR产物测序均未见明显突变。结论:DES可影响小鼠睾丸引带LGR8 mRNA和蛋白的表达,DES可能通过影响INSL3-LGR8信号系统干扰睾丸引带的发育,进而影响睾丸正常下降。
- 杨新彬蒋学武段守兴祁艳卫张镟李建宏
- 关键词:己烯雌酚睾丸引带胰岛素样因子3
- 己烯雌酚和胰岛素样因子3对睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8 mRNA和蛋白表达水平的影响被引量:4
- 2011年
- 目的探讨不同水平的己烯雌酚(DES)和胰岛素样因子3(INSL3)对体外培养的睾丸引带细胞中富含亮氨酸的G蛋白耦联受体8(LGR8)mRNA和蛋白表达的影响。方法将3日龄的雄性昆明小鼠的睾丸引带组织解剖取出,并进行细胞培养。传代后,随机分为正常对照组及实验组(不同浓度DES组:A^E组,不同浓度INSL3组:Ⅰ~Ⅳ组)共11组。其中,实验组加入的DES浓度分别是3.7×10-2mmol.L-1、3.7×10-3mmol.L-1、3.7×10-4mmol.L-1、3.7×10-5mmol.L-1和二甲基亚砜溶剂对照组;INSL3的浓度分别为3.3×10-3μmol.L-1、3.3×10-4μmol.L-1、3.3×10-5μmol.L-1及3.3×10-6μmol.L-1。加药持续作用48 h后,应用反转录PCR和流式细胞术分析睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白的表达情况。结果 A组和Ⅳ组LGR8的mRNA及蛋白水平显著高于正常对照组(P<0.01);与正常对照组相比,B、C、D组LGR8 mRNA及其蛋白表达均显著下降(Pa<0.05),而E组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组LGR8 mRNA和其蛋白的表达差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论高剂量的DES和极低剂量的INSL3均能上调睾丸引带细胞中LGR8 mRNA及其蛋白表达水平,推测DES和INSL3可能通过LGR8作用途径来影响睾丸引带的发育。
- 李建宏段守兴祁艳卫杨新彬张镟唐水平蒋学武
- 关键词:己烯雌酚胰岛素样因子3睾丸引带反转录聚合酶链反应