杜清友
- 作品数：24 被引量：179H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤相关基因表达检测寡核苷酸芯片的制备及其初步应用被引量：3
- 2003年
- 为研制肿瘤相关寡核苷酸芯片 ,并实现其在抗肿瘤反义核酸“癌泰得”作用机理研究方面的初步应用 ,制备了包含近 450种肿瘤相关基因特异寡核苷酸探针的寡核苷酸芯片 ,建立了相应的质控标准 .“癌泰得”用脂质体转染HepG2肿瘤细胞 ,提取细胞总RNA反转录并荧光标记cDNA ,用制备的寡核苷酸芯片检测肝癌细胞HepG2的肿瘤相关基因表达水平 ,用软件分析获得其差异基因表达谱 .0 4μmol/L的反义核酸“癌泰得”作用于HepG2细胞 15h后 ,MDNCF、DHS等基因mRNA表达下调 ,MUC2、MPP11、LAT、HRIF B、JNK3A1等mRNA基因表达上调 ,初步检测到了“癌泰得”的抗肿瘤作用可能的相关基因 ,为进一步的分子作用机理的探讨奠定基础 .结果表明 ,制备的肿瘤相关芯片敏感度高、特异性高、重复性均较好 ,可用于检测肿瘤相关基因的表达谱 。
- 黄坚杜清友丁雨王升启
- 关键词：肿瘤相关基因寡核苷酸芯片癌泰得表达谱
- 中国普通人群中HIV-1感染辅助受体和配体基因多态性的分析被引量：29
- 2001年
- 实验目的是分析中国人群中HIV-1感染相关的CCR5-D32, CCR5-m303, CCR2-64I和SDF1-3′A等位基因的突变频率和多态性特点. 研究的人群包括2318例中国普通人群(来自全国各地8个民族), 年龄范围在15~80岁之间, 他们中没有一例是HIV感染者. 从上述人群外周血的PBMC中抽提基因组DNA, 然后分别应用PCR和PCR/RFLP等方法做基因分型, 用直接DNA测序法进一步证实其准确性. 结果发现: (1) 我国汉族、维族和蒙古族人群中CCR5- D32基因突变频率分别为0.16%, 3.48%和1.12%, 但是在藏族、佤族、瑶族、普米族和彝族人群未检测到CCR5- D32突变基因型. 与白种人相比, 我国人群中CCR5- D32基因突变频率很低. 对具有D32突变家系的调查结果显示该突变可能以孟德尔规律遗传给下一代. (2) 在中国人群中, 未检测到存在CCR5-m303突变. (3) 我国人群的CCR2-64I和SDF1-3′A突变频率分别为19.15%~28.79%和19.10%~29.86%. 统计学分析表明中国汉族人群中上述等位基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡. 上述结果提示在中国人群中除了维族以外, 其他民族人群的CCR5-D32遗传突变频率很低, 可能不是抗HIV感染的主要因素. 此外中国人群却具有较高的CCR2-64I和SDF1-3′A等位基因突变频率, 它们可能与延缓艾滋病发病进程有关. 这一结论需要进一步证实.
- 王福生金磊刘明旭洪卫国施红雷周云Wang Jiming杜清友侯静张冰蒋建东汪悦李跃旗徐安龙徐东平刘发军
- 关键词：HIV-1趋化因子受体5多态性等位基因频率
- CIK细胞体内外抗肝癌细胞的实验研究
- 2001年
- 杜清友刘明旭王福生雷周云孙文兵陈菊梅吴祖泽
- 关键词：肝癌细胞肝癌患者细胞毒CIK体内外
- 胰岛素样生长因子结合蛋白研究进展被引量：22
- 1998年
- 胰岛素样生长因子结合蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）是一组能够和胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）以高亲和力结合的可溶性蛋白，它们不仅携带ＩＧＦ，延长ＩＧＦ的半衰期，而且还调控ＩＧＦ的生物活性，影响ＩＧＦ的分布．在不同的实验条件下，ＩＧＦＢＰｓ能够增强或抑制ＩＧＦ的活性．另外，又发现ＩＧＦＢＰｓ有独立于ＩＧＦ之外的内在的生物活性．简单介绍一下近年来ＩＧＦＢＰｓ在分子结构、基因表达、翻译后的修饰及生物功能等方面的研究．
- 杜清友王会信
- 关键词：胰岛素样结合蛋白分子结构基因表达
- IGF受体1分子上IGF-1结合位点的探讨被引量：2
- 2000年
- 为了探讨胰岛素样生长因子受体 1(IGF R1)分子上的胰岛素样生长因子 1(IGF 1)结合位点 ,建立了研究IGF 1与IGF R1相互作用的酵母双杂交模型 ;利用基因体外定点突变的方法 ,构建了 7种IGF R1突变体 ;然后通过报告基因活性的定量分析 ,在酵母双杂交模型中检测了IGF 1与各种IGF R1突变体之间相互作用的大小 ,初步确定了IGF R1分子中IGF 1的结合位点 ,并且IGF R1分子上N2 37、T2 38在与IGF 1结合中起着重要作用 .
- 杜清友刘宝英薛沿宁王会信丁红梅
- 关键词：胰岛素样生长因子酵母双杂交系统
- 反义核酸协同化疗药物抑制肝癌细胞的增殖被引量：7
- 2003年
- 目的 研究以端粒酶催化亚基hTERT基因为靶的反义硫代寡核苷酸(ASODN)分别与三种常用化疗药物顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5—FU)、阿霉素(ADM)联合用药抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用。方法 以脂质体为载体,将ASODN转染至HepG2中,用四氮唑盐(MTT)法染色并计算联用ASODN及化疗药物对HepG2增殖的抑制率,用SAS统计软件及金正均Q值法进行数据分析。结果 单用DDP、5-FU、ADM时其IC_(50)分别为1.07、4.15和0.29μg/ml,加入0.1μmol/L的ASODN,IC_(50)下降为0.25、1.52和0.12μg/ml,与单用化疗药的抑制效果相比有明显增强(F分别为66.92、25.96和8.56,P<0.001);Q值分析表明ASODN分别与中低浓度的DDP(≤1μg/ml)、5—FU(≤10μg/ml)、ADM(≤0.1μg/ml)联用有较好的协同作用(Q≥1.15)。结论 ASODN分别与化疗药物DDP、5—FU、ADM联合用药,均可显著增强抑制HepG2增殖的效果。
- 杨英杜清友王升启
- 关键词：反义核酸化疗药物肝癌MTT法
- 重组人胰岛素样生长因子Ⅰ的纯化及鉴定被引量：2
- 2001年
- 目的 :纯化在大肠杆菌中表达的重组人胰岛素样生长因子Ⅰ (rhIGF Ⅰ ) ,并对其性质进行鉴定。方法 :发酵表达菌株 ,提取包涵体 ,采用离子交换和凝胶过滤两步纯化 ,从相对分子质量、免疫学性质、荧光光谱、N端 15个氨基酸的序列分析等方面进行鉴定。另外 ,对重组蛋白进行了复性和生物学功能的检测。结果与结论 :纯化后rhIGF Ⅰ纯度可达 99%以上 ,相对分子质量、免疫印迹、荧光光谱及N端 15个氨基酸的分析结果与预计的相同 ,rhIGF Ⅰ促细胞生长的ED50 为 3～ 10ng/ml。
- 聂尚海刘宝英王芳刘农乐杜清友丁红梅王会信
- 关键词：纯化复性氨基酸序列
- CIK细胞体内外抗肝癌细胞作用被引量：51
- 2001年
- 目的 :研究肝癌患者CIK(cytokine inducedkiller)细胞的体外杀伤自体肝癌原代细胞的细胞毒活性以及正常人CIK细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用。方法 :分别分离获得肝癌患者和正常人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,加入细胞因子 ,体外诱导成CIK细胞 ,用流式细胞仪对细胞作动态表型分析 ,并与正常人的CIK细胞作对比。用51Cr释放法 ,测定肝癌患者的CIK细胞体外杀伤自体肿瘤细胞的细胞毒活性。在Balb/c裸鼠皮下接种肝癌细胞BEL 740 2 ,观察CIK细胞对荷瘤鼠的抑瘤作用 ,并与LAK、PBMC细胞相对比。结果 :肝癌患者的CIK细胞体外增殖力强 ,至培养 2 8天时达到最大增殖倍数 30 0多 ,表型分析结果表明 ,CD3+ CD5 6 + 双阳性细胞得到了大量的扩增 ,其含量由原来的 0 2 3%上升到第 2 1天的 17 8%。体外实验表明 ,肝癌患者的CIK细胞杀伤自体原代肝癌细胞的细胞毒活性明显高于自体的PBMC细胞。裸鼠体内实验表明 ,CIK细胞能够显著抑制肿瘤的生长 ,其抑瘤率可达84 7% ,高于LAK细胞的 5 2 8%及PBMC的 37 1% (P <0 0 5和P <0 0 1)。结论 :CIK细胞具有较强的体内外抗肝癌细胞活性 ,有可能应用于临床上肝癌的过继性免疫治疗。
- 杜清友刘明旭王福生雷周云孙文兵陈菊梅吴祖泽
- 关键词：CIK细胞肝癌细胞免疫活性
- SARS冠状病毒磷酸化核蛋白（N蛋白）克隆表达及其用途
- 本发明涉及一种生物工程类产品及其用途。具体说是SARS冠状病毒N蛋白基因克隆和体外表达以及在诊断和药物疫苗等研究中的用途。根据已公开的SARS冠状病毒基因序列，设计针对N蛋白基因的特异引物，通过RT－PCR扩增并克隆SA...
- 王升启张士猛张敏丽陈苏红杜清友陈忠斌
- 文献传递
- IGF结合蛋白3和IGF受体1结构与功能的研究
- 该实验采用两种生物学技术,即噬体表面展昧技术和酵母双杂交技术,探讨IGFBP-3 和IGF-R1分子上可能的IGF-1结合中位点,并通过体外定点突变的方法分析各个氨基酸残基 的作用大小.利用噬菌体表面展示技术和酵母双杂交...
- 杜清友
- 关键词：噬菌体表面展示技术酵母双杂交技术
