曾科 作品数:47 被引量:59 H指数:5 供职机构: 南京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
精浆外泌体及其在促进胚胎着床或制备用于促进胚胎着床的制剂中的应用 本发明提供了精浆外泌体及其在促进胚胎着床或制备用于促进胚胎着床的制剂中的应用。与现有技术相对比,本发明具有以下优点:本申请提供的精浆外泌体及其在促进胚胎着床或制备用于促进胚胎着床的制剂中的应用,精浆外泌体能够促进子宫中免... 曾科 孔艳 陈熹 胡欢欢 王延博一种牛初乳提取物及其提取方法和应用 本发明涉及一种牛初乳提取物及其提取方法和应用,该提取物含有序列为SEQ ID NO.1的Mir-30a-5p微囊泡,可通过如下方法获得:将牛初乳以5000×g离心30分钟后取中层液,再依次以12000×g、35000×g... 曾科 邹珍友 吴临平 张骑鹏 张辰宇文献传递 一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用 本发明涉及一种用于检测转移性结直肠癌化疗疗效和/或预后的生物标志物组合及其应用。所述miRNA组合包括:miR‑135b、miR‑208b。所述试剂盒包括上述miRNA的TaqMan探针组合。在本发明中,血清较易获得,无... 张辰宇 巴一 曾科 李佳璐 陈熹文献传递 循环microRNAs与局灶节段性肾小球硬化患者疾病活动的关系 被引量:4 2013年 目的:分析循环中与局灶节段性肾小球硬化(FSGS)患者疾病活动相关microRNAs(miRNAs),为后续探讨循环miRNAs在FSGS发病中的作用奠定基础。方法:选取年龄、性别匹配的活动性FSGS患者及正常对照各9例,提取FSGS患者及对照组血浆总RNA,采用TaqMan低密度芯片(TaqMan Low Density Array)进行miRNA表达谱分析,筛选出在活动性FSGS患者循环中表达上调的miRNAs分子;然后再选取32例活动性FSGS患者血浆,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法对筛选出的miRNAs分子进行验证,同时与非活动性FSGS患者进行比较。采用ROC曲线分析循环miRNA区分活动性FSGS、非活动性FSGS和正常对照的效能。结果:与正常对照相比,活动性FSGS患者循环miRNA-125b,miRNA-186和miRNA-193a-3p水平显著上调(P<0.05)。ROC曲线分析显示,循环miRNA-125b、miRNA-186和miRNA-193a-3p区分活动性FSGS与正常对照的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.882、0.789和0.910。与非活动性FSGS相比,活动性FSGS患者循环中miRNA-186水平也明显上调。结论:活动性FSGS患者循环miRNA-125b、miRNA-186及miRNA-193a-3p较正常对照显著升高,其中miRNA-186的升高与疾病的活动性关系更密切。 张昌明 张婉芬 刘春蓓 曾科 刘志红关键词:局灶节段性肾小球硬化 MICRORNA 疾病活动 尿液microRNAs作为局灶节段性肾小球硬化疾病活动生物标志物的研究 被引量:4 2013年 目的:观察局灶节段性肾小球硬化(FSGS)患者尿液中microRNAs(miRNAs)的表达变化,探讨miRNAs的变化与FSGS患者疾病活动性之间的关系。方法:检测尿液miRNAs的表达谱,及其在活动性FSGS患者、非活动性FSGS患者和正常对照者尿液中的水平,分析尿液中miRNAs的表达变化与尿蛋白、白蛋白等临床指标之间的关系。并与膜性肾病及糖尿病肾病患者尿液miRNAs水平进行比较,评判其特异性。结果:活动性FSGS组尿液miRNA-196a,miRNA-30a,miRNA-155和miRNA-490的表达水平不仅显著高于正常对照组且高于非活动性FSGS组(P<0.001)。尿液miRNA-196a,miRNA-155,miRNA-30a和miRNA-490的变化倍数与FSGS患者的尿蛋白、血清白蛋白、血清总胆固醇存在显著相关性(P<0.05)。在膜性肾病和糖尿病肾病患者尿液中未观察到上述变化。激素治疗有效的FSGS患者的尿液中miRNA-196a,miRNA-490,miRNA-30 a表达水平随着病情的缓解也明显下降(P<0.05)。激素治疗无效患者的尿液中,miRNAs表达水平治疗前后无显著差异。结论:尿液miRNA-196 a,miRNA-30 a和miRNA-490表达水平与FSGS患者疾病的活动性密切相关,提示尿液miRNA-196a,miRNA-30a和miRNA-490检测有可能作为判断FSGS疾病活动性和反应疗效的新的生物标志物。 张婉芬 张昌明 刘春蓓 秦卫松 郑春霞 曾科 刘志红关键词:局灶节段性肾小球硬化 生物标志物 血清中PS阳性外泌体作为乳腺癌化疗敏感性标志物的应用 本发明公开了血清中ps阳性外泌体作为乳腺癌化疗敏感性标志物的应用。利用磁珠吸附外泌体后构建了对外泌体进行表征分析的流式细胞术。发明人通过流式细胞术分析发现PS阳性的外泌体含量在化疗无效的乳腺癌患者血清中显著高于化疗有效的... 杨荣 李建峰 江欣丽 曾科 梁宏伟 渠爽文献传递 GST-UCP2-N和GST-UCP2-C原核表达载体的构建表达及多克隆抗体的制备 2010年 以pMD18-T-hucp2为模板,用设计的两对特异性的引物PCR得到hucp2cDNA N端和C端的两断基因片段,然后将其插入到pGEX-5X-1表达载体上,重组质粒在PCR、双酶切、测序鉴定后,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21表达大量融合蛋白GST-UCP2-N(C),经GST亲和层析纯化蛋白.以该蛋白为抗原免疫ucp2基因敲除小鼠,western blot鉴定血清中抗体的反应性.实验证明成功构建了构建pGEX-5X-1-UCP-N(C)重组质粒,表达出了融合蛋白.并获得了抗血清.为进一步获得灵敏性更高,特异性更强的UCP2的抗体打下了基础. 白蕊 郭亚楠 卞桢 刘丹青 曾科一种用于递送核酸药物的中性脂质体及其制备方法和应用 本发明公开了一种用于递送核酸药物的中性脂质体及其制备方法和应用。一种用于递送核酸药物的中性脂质体,所述的中性脂质体主要由卵磷脂、胆固醇、核酸药物以及阳离子肽组成;其中带负电的核酸药物与阳离子肽混合成电中性。本专利通过成分... 章文龙 石福杰 孙鑫磊 刘尚 曾科 李菁文献传递 非编码小RNA(sraB)调控肠炎型沙门菌的抗蛋清抑菌作用 被引量:7 2010年 【目的】肠炎型沙门菌是一种食源性人畜共患病病原菌,可在禽蛋中存活并传播。sRNA为新近发现的基因表达调控分子,本实验以sRNA(sraB)为对象,探索sRNA与肠炎型沙门菌在禽蛋中存活的相关性,及研究其在细菌抵抗蛋清抑菌作用中的调控功能。【方法】参考已报道的沙门菌全基因组及sraB序列,设计并扩增sraB突变用基因片段,运用Red重组系统(red recombination system)对肠炎沙门菌野生株(SE2472)sraB基因进行定点敲除,构建出sraB敲除株(SE2472ΔsraB)。分析比较sraB敲除对沙门菌在蛋清中存活的影响;另构建表达sraB的回复表达质粒pHDB3-sraB,将其转入sraB敲除株构建回复株SE2472ΔsraB-comp,以回复表达sraB,分析sraB表达对沙门菌敲除株的回复作用;并分别以野生株、敲除株及回复株研究sraB在抵抗蛋清中几种抑菌因子(如溶菌酶和卵转铁蛋白)作用中可能的调控作用。【结果】敲除株在蛋清中存活率为野生型的61%-70%,回复株相比野生型的存活率比敲除株提高10%-33%;在转铁蛋白抑菌实验中,孵育8h和24h,敲除株的存活率分别为野生型存活率的38%和23%,孵育8h回复株相比野生型的存活率比敲除株提高15%,但孵育24h回复株的存活率未见提高;在溶菌酶抑菌实验中,孵育8h和24h后,敲除株存活率分别为野生型的41%和27%,回复株相比野生型的存活率分别比敲除株提高35%和23%。【结论】通过比较sraB敲除与否,研究肠炎型沙门菌在禽蛋中的存活及对抑菌因子的抵抗作用,结果表明sraB在肠炎沙门菌抵抗蛋清抑菌作用中起着重要调控功能。 蒋惠源 曹鸣辉 曹学松 顾宏伟 曾科关键词:沙门菌 SRNA 基因调控 蛋清 食管鳞状细胞癌患者血清全基因组microRNA测序和分析 被引量:4 2012年 目的通过测序、分析食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清全基因组微小核糖核酸(miRNA)表达谱,筛选出表达上调的miRNA,探讨其作为ESCC分子标志物的可能性。方法收集未经治疗的199例ESCC患者血清,同时以107例年龄、性别匹配的健康人血清作对照。用Solexa测序技术对血清miRNA进行测序和表达量测定,用实时荧光定量PCR技术对表达上调的miR-223验证,并与血清CEA含量比较。结果 Solexa测序结果显示,ESCC患者和健康人混合血清小分子RNA中miRNA含量所占比例分别是75.46%和81.44%,22种miRNA在患者血清中表达量是健康人对照的2倍以上;PCR分析证实,miR-223在患者血清中的浓度[M(P25,P75)]显著高于健康人对照[893.8(684.8,1 200.7)fmol/L vs 445.6(347.7,664.0)fmol/L,t=10.03,P<0.01];用于ESCC诊断的miR-223 ROC曲线下面积(AUCROC)为0.84(95%CI,0.79~0.89),明显大于CEA的0.55(95%CI,0.48~0.62),P<0.01;当cut off值为710.2 fmol/L时,miR-223诊断ESCC的敏感性和特异性分别为70%、80%;ESCC患者年龄、性别、病理类型、TNM分期、吸烟史、饮酒史与血清miR-223水平无明显相关性(P>0.05)。结论 ESCC患者血清miRNA表达谱与健康人存在差异,miR-223在患者血清中浓度显著升高,是ESCC潜在的分子标志物。 张燕妮 李艳芳 王成 管晓翠 陈熹 曾科 张辰宇 张春妮关键词:食管鳞状细胞癌 实时荧光定量PCR