张金双
- 作品数：17 被引量：36H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- Apoptin对肝癌细胞的体内、外抑制效应
- 2009年
- 目的:探讨Apoptin对人肝癌细胞株HepG-2及C57BL/6小鼠H22移植瘤的抑制作用。方法:应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin转染HepG-2细胞,应用Western blotting检测Apoptin蛋白在转染后HepG-2细胞中的表达,应用MTT检测Apoptin对HepG-2细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色法检测pVAX1-Apoptin致肿瘤细胞凋亡作用。建立C57BL/6小鼠H22荷瘤模型,瘤内注射pVAX1-Apoptin,观察pVAX1-Apoptin对体内肿瘤的抑制作用。结果:Apoptin基因可在HepG-2细胞中有效表达,pVAX1-Apoptin能够诱导HepG-2细胞凋亡,并显著地抑制其生长,48h抑制率为69.28%。pVAX1-Apoptin瘤内注射能够有效抑制移植肿瘤的生长,抑制率为46.71%;治疗后39d小鼠生存率为40%,显著高于对照组(P<0.05)。结论:Apoptin转染可抑制HepG-2细胞的生长,重组质粒pVAX1-Apoptin瘤内注射对移植肿瘤有显著的抑制作用。
- 刘立明金宁一李霄田明尧杨恩成刘妍赵翠青张金双钱爱东
- 关键词：肝肿瘤APOPTINHEPG-2增殖凋亡
- 用于检测A型流感病毒的基因芯片、其制备方法及应用
- 本发明涉及一种A型流感病毒分型的基因芯片、其制备方法，检测方法和检测试剂盒，其中基因芯片包括固相载体和固定在该载体上的寡核苷酸探针，该寡核苷酸探针含有从一种或多种A型流感病毒的HA、NA和/或M基因选取的DNA片段。本发...
- 金宁一田明尧鲁会军李昌李霄金扩世南文龙谭磊张金双赵翠青孙珊珊颜雯
- 猪链球菌病研究进展
- 猪链球菌病属于国家规定的二类动物疫病,是一种人畜共患的传染病。是由C、D、E及L群链球菌引起猪的多种疾病的总称。链球菌分布广泛,常存在于健康的哺乳动物和人体内。在动物机体抵抗力降低和外部环境变化诱导下,会引起动物和人发病...
- 张金双金宁一南文龙田明尧赵翠青
- 关键词：猪链球菌病人畜共患致病机理临床症状病原学诊断
- 双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗的构建及其免疫原性检测被引量：1
- 2010年
- 目的:构建双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗,并检测其免疫原性。方法:构建共表达流感病毒H5亚型血凝素(HA)和H7亚型HA的DNA疫苗,采用间接免疫荧光法(IFA)检测目的蛋白在幼仓鼠肾细胞(BHKcell)中的表达。分为pVAX1-H5-H7、pVAX1-H5、pVAX1-H7和pVAX1空质粒对照组4组(每组15只)进行小鼠免疫实验,并应用ELISA法检测小鼠血清抗体,流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群数量。结果:所构建的双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗在BHK细胞中的表达产物可激发荧光抗体产生绿色免疫荧光,且对照pVAX1空载体转染BHK细胞无免疫荧光产生。使用双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗免疫小鼠后,小鼠产生了针对H5和H7抗原的血清特异性抗体,流式细胞术检测免疫组小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的数量显著高于对照组(P<0.05)。结论:成功构建的双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗可以诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答。
- 白靓金宁一成岩石毅鲁会军田明尧南文龙赵翠青张金双关铭
- 关键词：流感病毒A型体液免疫细胞免疫
- H3、H5、H7亚型流感病毒DNA疫苗构建与实验免疫研究
- 本研究根据当前流感的流行现状和多个亚型高致病性禽流感病毒跨种间传播的现状,应用了分子生物信息学理论,针对流感的物种和目的的不同,设计并成功的构建了三种主导型的多价核酸疫苗,针对流感病毒H5和H3亚型的pVAX1-H5-H...
- 张金双
- 关键词：流感病毒核酸疫苗
- 文献传递
- 流感复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明涉及流感复合多表位基因及利用其构建的DNA疫苗。本发明采用生物信息学方法，结合网络服务器和相关软件，对流感主要保护性抗原相关的HA和NA功能表位进行了预测，共获得了来源于多种亚型的流感CTL表位17条，来源于多个亚...
- 金宁一鲁会军田明尧李昌李霄金扩世南文龙谭磊张金双赵翠青
- 文献传递
- 靶向细胞凋亡的肿瘤基因治疗研究进展
- 凋亡或称细胞程序性死亡是一种细胞控制其自身增殖和对DNA损伤产生应答的机制。恰当的应用细胞凋亡机制可以杀伤肿瘤细胞,也可以致敏肿瘤细胞使其对放化疗更为敏感,因此细胞凋亡机制在肿瘤基因治疗和研究中得到广泛关注.细胞凋亡诱导...
- 张金双李霄
- 关键词：肿瘤细胞基因治疗信号转导细胞凋亡
- 文献传递
- H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析被引量：7
- 2010年
- 目的:应用生物信息学方法预测H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性,为研制H1N1亚型流感病毒的表位疫苗奠定基础。方法:依据近年流感病毒流行趋势,从GenBank下载具有代表性的H1N1亚型流感病毒HA蛋白氨基酸序列。进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性。通过Balb/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清与表位肽的结合试验,初步鉴定候选表位抗原性。结果:综合多项预测及空间构像模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA73～87、HA125～139、HA188～205。候选表位处于H1N1亚型流感HA1蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H1N1亚型流感病毒HA相应区域具有较好的一致性。而不同候选表位在BALB/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能。结论:所筛选的表位具有成为H1N1亚型流感病毒HATh和B细胞相关抗原表位的可能。此研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H1N1亚型流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础。
- 王开艳李太元鲁会军谭磊南文龙田明尧张金双刘昊金宁一
- 关键词：流感血凝素H1N1
- 表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2基因的重组鸡痘病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2007年
- 分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2-16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-ORF2。将该重组质粒与鸡痘病毒282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞,进行同源重组。通过3次溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)加压筛选,经RT-PCR、IFA和Western blot鉴定,表明重组鸡痘病毒中的目的基因在鸡胚成纤维细胞中得到表达,获得一株携带有目的基因ORF2和ORF5的重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5。
- 沈国顺金宁一庄天中韩贞珍李阳张金双
- 关键词：PRRSVORF5PCV-2鸡痘病毒
- H7N7亚型禽流感病毒血凝素B细胞和Th细胞表位预测及初步鉴定被引量：5
- 2010年
- 预测H7N7亚型禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)B细胞和Th细胞(THelpCell,辅助T细胞,在免疫调节中起促进作用的T细胞亚群。)相关抗原表位,并对所获表位的抗原性进行初步鉴定。根据禽流感流行趋势,从GeneBank下载H7N7禽流感病毒HA氨基酸序列,使用生物信息学方法,对所下载序列进行预测与分析,获得H7N7亚型禽流感病毒血凝素B细胞和Th细胞相关抗原表位。通过H7亚型禽流感病毒阳性血清,初步验证所选表位抗原性。获得了5个H7N7亚型禽流感病毒候选B细胞和Th细胞表位,经过间接ELISA方法分析,其中HA165～178,HA180～193,HA241～255表序列相对保守,与流行的H7N7亚型禽流感病毒HA相应区域具有较好的一致性,同时具有与H7型禽流感病毒阳性血清抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能。所筛选的表位具有成为H7N7亚型禽流感病毒HAB细胞和Th细胞相关抗原表位的可能,为H7N7亚型禽流感表位疫苗的研究奠定基础。
- 白靓金宁一成岩石毅鲁会军南文龙田明尧赵翠青张金双关铭
- 关键词：禽流感病毒血凝素抗原表位
