刘淼
- 作品数：62 被引量：176H指数：7
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 乳香树脂提取物对日本血吸虫感染小鼠肝脏肉芽肿和纤维化的抑制作用及其机制
- 血吸虫病依然是我国亟待解决的一个重要的公共卫生问题,该病主要死因是肝脏虫卵肉芽肿及其继发的肝纤维化,血吸虫肝肉芽肿和纤维化是血吸虫虫卵分泌SEA诱导免疫炎症反应的病理结果。化疗对已形成的虫卵或纤维化已无能为力。乳香树脂提...
- 刘淼
- 关键词：日本血吸虫肝脏肉芽肿
- 某医科大学生蠕形螨感染率及影响因素调查被引量：11
- 2014年
- 目的 为了解某医科大学生面部蠕形螨的感染状况,探讨蠕形螨感染的危险因素。方法 以某医科大学的641名在校大学生为调查对象,采用透明胶带法收集样本,并进行镜检。同时,采用自行设计的问卷调查,2检验等方法分析蠕形螨感染的相关因素。结果 受检学生641人,检出感染人体蠕形螨74人,感染率11.5%,其中男生感染率为9.7%（26/269）,女生感染率为12.9%（48/372）,差异无统计学意义（P=0.206）;2011级学生的检出率为14.8%（37/250）,2012级学生的检出率为9.5%（37/391）,差异有统计学意义（P=0.039）;油性或混合性肤质者感染率为13.1%比干性或中性皮肤者感染率（6.1%）高（P=0.026）;感染者的感染度以轻度（1~5条）为主,占95.9%（71/74）,1人最多检出14条蠕形螨。结论 该校的蠕形螨感染率偏低。随集体宿舍生活时间的增加,感染率上升;偏油性肤质者比偏干性肤质者更容易发生感染。
- 许精巧孙凤霞尹纯礼张海生刘淼任翠萍沈际佳
- 关键词：螨感染流行病学
- Tsunagi蛋白调节日本血吸虫成虫生殖器官及虫卵的发育
- 目的鉴定日本血吸虫Tsunagi蛋白在虫体生殖器官发育方面的功能。方法体外PCR法合成Tsunagi基因的双链RNA,将其电穿孔转染入日本血吸虫童虫体内。电转后部分童虫进行体外培养,于培养后第1、3、5天收集童虫,提取童...
- 任翠平张鹏张薇娜刘淼沈际佳
- 关键词：日本血吸虫生殖生物学蛋白质功能
- 文献传递
- 重组日本血吸虫26ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断被引量：15
- 2005年
- 目的将日本血吸虫(中国大陆株)26ku谷胱甘肽硫转移酶(26kuSjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26kurSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断。方法构建重组质粒pET28aSjGST,转化到E.coliBL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Westernblot分析。用His·BandPurificationKit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清。结果成功地构建了重组质粒pET28aSjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达。Westernblot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别。ELISA结果表明,rSjGST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%。结论rSjGST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础。
- 罗庆礼沈继龙汪学龙刘淼胡元生钟政荣王家传袁小松
- 关键词：谷胱甘肽转移酶
- 幽门螺杆菌细胞空泡毒素毒性片段基因的表达及其重组蛋白免疫学鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的采用基因工程技术获得具有良好免疫反应性的重组细胞空泡毒素的毒性亚单位蛋白。方法利用PCR技术从Hp基因组中扩增VacA基因毒性片段,插入原核表达载体pQE30上,测序后,转化表达宿主菌DH5α,SDSPAGE分析表达情况,Westernblot检测其免疫反应性。NiNTA2+树脂纯化后,用重组蛋白免疫兔,HelicoBlot试剂盒检测兔血清VacA抗体以鉴定其免疫原性。结果测序表明目的序列完整,与Genbank中的多株中国菌株相比有高度的同源性。SDSPAGE显示表达产物相对分子量为27000,表达量为30%以上。该蛋白可被Hp全菌抗血清所识别,纯化后可得到纯度为93%以上蛋白质,并证实有良好的免疫原性。结论HpVacA基因毒性片段表达成功,获得高纯度重组蛋白并具有良好的免疫反应性与免疫原性,为研制疫苗和制备诊断VacA(+)株感染试剂盒提供了可靠材料。
- 刘淼杨致邦沈际佳汪学龙江宝玲
- 关键词：基因空泡
- 人Rh（D）血型抗原模拟表位的筛选和鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的从噬菌体随机肽库中筛选人Rh（D）血型抗原模拟表位，并对其免疫学活性进行鉴定。方法以抗Rh（D）单克隆抗体作为固相筛选分子，对噬菌体随机十二肽库进行3轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程，随机挑选35个克隆，经噬菌体ELISA和交叉反应试验，确定阳性克隆，再对这些克隆进行DNA序列测定和抗体竞争抑制试验，以获取人Rh（D）血型抗原模拟表位。然后采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）对所获噬菌体进行鉴定和抗原性分析。结果经过3轮淘洗后，噬菌体得到富集，获得11个阳性克隆。DNA序列测定和竞争抑制实验结果表明，这11个克隆噬菌体所展示的外源多肽中有7个克隆氨基酸序列含有相同的色氨酸（W）、脯氨酸（P）和谷氨酰胺（Q）结构（-WP-Q-），且均具有40％以上的抑制率；其余4个克隆没有共性，抑制率较低，可能为非特异性结合。Western blot分析表明，被选定的噬菌体能被抗Rh（D）血清特异识别，具有类似于Rh（D）蛋白的抗原性。结论利用抗Rh（D）单克隆抗体筛选噬菌体随机肽库，成功获得含有（-WP-Q-）结构的Rh（D）抗原模拟表位，为进一步探讨Rh（D）新生儿溶血病的发病机制和疫苗的研究奠定基础。
- 卞茂红沈际佳刘淼许伟杨鹏刘淑均钟涛
- 关键词：RH-HR血型系统血型抗原表位肽库
- 日本血吸虫Nanos样蛋白基因的获得、表达及初步鉴定
- 2011年
- 目的获得日本血吸虫Nanos样蛋白基因的cDNA序列,克隆、表达和纯化原核蛋白并初步鉴定。方法应用PCR法扩增获得日本血吸虫Nanos样基因的完整开放阅读框(ORF),将该基因亚克隆到原核表达载体pET28a(+),诱导表达并纯化融合蛋白。用纯化后的蛋白免疫家兔,制备该蛋白的多克隆抗体,分别用ELISA和Western blot法对表达蛋白进行初步鉴定。结果该基因为日本血吸虫的一个新基因,其编码序列的ORF为672 bp,编码223个氨基酸,理论相对分子量为25 ku;半定量RT-PCR技术分析显示该基因在日本血吸虫的虫卵及各期虫体有不同的表达量;成功构建了该基因的重组表达质粒pET28a(+)-SjNanos,并在大肠埃希菌中获得表达,Western blot分析表明该重组蛋白具有较好的免疫原性。结论获得日本血吸虫Nanos蛋白编码基因的全长ORF,在大肠杆菌中克隆表达了日本血吸虫Nanos样基因,并制备了特异性多克隆抗体,为进一步研究其在日本血吸虫生殖生物学中的功能奠定了基础。
- 赵前峰陈红霞任翠平刘淼沈际佳
- 关键词：日本血吸虫原核表达
- 幽门螺杆菌细胞空泡毒素基因毒性片段的克隆与表达被引量：12
- 2003年
- 目的 :通过基因于程技术获得具有良好抗原性的重组细胞空泡毒素毒性亚单位蛋白。方法 :利用PCR从幽门螺杆菌 (Hp)空泡毒素基因中扩增毒性片段V ,克隆及序列分析后在大肠杆菌中高效表达 ,用免疫印迹法 (Westernblotting)检测其抗原性。结果 :序列分析所得片段完整 ,与标准株AF36 170 0比较有 1.5 %的bp及一个氨基酸发生变异。与文献报道的中国菌株相比有高度的同源性。SDS -PAGE显示表达产物相对分子量为 2 70 0 0 ,表达量为 30 %以上 ,Westernblotting显示该蛋白可被HP全菌抗血清所识别。结论 :基因重组Hp细胞空泡毒素毒性蛋白具有良好的抗原性 ,可用于制备Hp感染的诊断试剂与疫苗。
- 刘淼杨致邦林珊珊吴利先
- 关键词：幽门螺杆菌空泡毒素基因克隆
- 日本血吸虫29000膜外蛋白的表达和纯化及功能初步鉴定被引量：3
- 2008年
- 随着血吸虫病防治工作的不断深入及血防形势的改变，血吸虫病流行的特点对本病的诊断提出了更高的要求。因表膜蛋白更易接触机体的免疫系统，刺激机体产生相对应的抗体，大多研究都支持虫体的表膜蛋白较其他蛋白有较好的诊断价值。本课题组将日本血吸虫（Schistosoma japouicam，sj）中国大陆株29000表膜蛋白的膜外区基因体外重组并表达，纯化后初步鉴定其免疫原性和免疫反应性，
- 任翠平刘淼赵志荣雷黎朱绍春王晓楠沈际佳
- 关键词：日本血吸虫膜外区纯化血吸虫病中国大陆株
- 幽门螺杆菌vacA毒性片段与hpaA融合基因的原核表达被引量：1
- 2004年
- 目的:构建幽门螺杆菌vacA毒性片段(v)与hpaA融合基因的原核表达载体,并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的疫苗奠定基础. 方法:通过设计带有编码IL-3N端12个氨基酸引物,用PCR技术从pQE30-V质粒扩增出有接头的v基因,克隆至质粒pTrc99A-HpaA中与hpaA融合.将融合基因插入原核表达载体pQE30,再将pQE30-V-HpaA转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果, Western blotting鉴定其抗原性. 结果:融合蛋白的相对分子量约为65 000,能与幽门螺杆菌感染的人阳性血清发生抗原抗体反应. 结论:重组表达质粒pQE30-V-HpaA表达成功,为进一步研究其免疫学活性及制备疫苗提供了材料.
- 刘淼杨致邦林珊珊吴利先
- 关键词：幽门螺杆菌原核表达氨基酸
