2025年1月30日
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冒艳丽
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
扬州大学医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
江苏省基础研究计划
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
焦红梅
扬州大学医学院
李国才
扬州大学医学院
刘双喜
扬州大学医学院
张莉君
扬州大学医学院
贺丽
扬州大学医学院
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作者
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刘双喜
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李国才
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冒艳丽
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焦红梅
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贺丽
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中华微生物学...
年份
1篇
2013
1篇
2012
共
2
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淋病奈瑟菌rmp基因缺失突变株的构建及其抗体杀菌作用研究
被引量:1
2013年
目的研究淋病奈瑟菌的外膜蛋白Rmp在免疫阻抑中的作用及其消除策略。方法PCR扩增淋病奈瑟菌rmp基因,将rmp中间200个核苷酸残基用卡那霉素抗性基因Kan取代,含rmp两侧侧翼区和Kan的DNA片段△rmp:Kan转化淋病奈瑟菌WHO—A菌株,PCR和Westernblot鉴定野生rmp被突变基因(△rmp::Kan)取代并不能表达Rmp的突变株。突变株免疫小鼠,并用抗体介导的补体杀菌作用研究免疫血清的抗菌活性。结果构建了珊p基因缺失的淋病奈瑟菌突变株,突变株诱生的抗体具有更强的杀伤淋病奈瑟菌活性。结论淋病奈瑟菌丌印基因缺失突变株可能消除了野生株中Rmp的免疫阻抑作用,在新型全细胞减毒活疫苗研制中具有潜在应用价值。
李国才
解如山
冒艳丽
刘双喜
焦红梅
陈红菊
严华
季明春
关键词:
淋病奈瑟菌
同源重组
减毒活疫苗
E.coli M15碱性磷酸酶的表达、纯化及活性分析
被引量:2
2012年
目的:克隆、表达并纯化大肠杆菌M15碱性磷酸酶(EAP)成熟肽(phoA),分析其活性。方法:采用PCR技术从M15基因组DNA中扩增出phoA编码基因;构建其原核表达载体pCold-TF-EAP;转入E.coli BL21(DE3)进行表达;IMAC Ni-NTA柱层析法纯化重组蛋白;重组蛋白与底物对硝基苯磷酸二钠显色反应分析其活性。结果:克隆得到了序列约1 400 bp phoA编码基因,原核表达了分子量约为100 kDa的融合重组EAP(rEAP),纯化获得的rEAP具有催化磷酸单酯的活性,有效反应温度范围大,在27℃~67℃都具有较高的催化活性,在pH 7.5~8.0间催化活性最高。结论:克隆了可正确表达EAP的phoA编码基因,为EAP的工业化生产及应用提供了生物材料。
杜庆辉
贺丽
刘双喜
张莉君
冒艳丽
朱小平
焦红梅
李国才
关键词:
碱性磷酸酶
活性鉴定
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