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李国才: 作品数：88 被引量：267H指数：7; 供职机构：扬州大学医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>

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利用CRISPR／Cas9系统抑制Kan耐药基因水平转移研究被引量：1: 2017年; 目的研究细菌耐药基因水平转移的控制技术。方法以卡那霉素耐药基因Kan为靶基因设计3组靶向sgRNA．分别退火后插入到pCas9质粒中，重组菌用氯化钙法制成感受态，将含有Kan耐药基因的质粒pET-30a向其转化，转化菌液分别涂布含氯霉素和含氯霉素／卡那霉素平板，比较各组转化效率。将携带Kan特异性sgRNA的重组质粒分别转化含pET-30a的大肠埃希菌，PCR检测Kan耐药基因的降解．并绘制转化子在氯霉素平板上的生长曲线以分析特异性sgRNA对受体菌生长的影响。结果所设计的3组sgRNA中有2组可以介导CRISPR／Cas9系统对Kan耐药基因水平转移的完全抑制．其余1组也可使转移效率降低88．08％。抑制机制为特异性CRISPR／Cas9系统降解了Kan耐药基因。未发现3组sgRNA对受体菌生长有明显影响。结论特异性CRISPR／Cas9系统可抑制细菌Kan耐药基因的水平转移。; 徐桐桐卞晓锐单彩龙赵丹焦红梅阴银燕李国才; 关键词：细菌耐药性水平基因转移

AdeB基因变异介导鲍曼不动杆菌多药耐药被引量：1: 2019年; 采用纸片扩散法(K-B法)测定鲍曼不动杆菌(AB)菌株对临床常用9大类22种抗生素的耐药性,应用PCR检测耐药基因,将耐药基因adeB转化至敏感菌株AB43中,荧光定量PCR检测AdeB mRNA的转录,药敏试验检测转化后菌株的耐药性变化。结果表明:收集的68株AB对亚胺培南和美罗培南耐药率分别高达51.47%和50.00%。耐药基因adeR、adeS、adeA、adeB、adeC、OXA-23、OXA-51、TEM-1、VIM-1在碳青霉烯类耐药、中介及敏感株中的分布差异不大;adeB基因在耐药株和敏感株中的序列存在较大差异,二者同源区也存在3个氨基酸残基的变异;耐药菌株来源的adeB基因在敏感菌株中表达后可导致AB的耐药性显著增强。这一研究提示AdeB基因变异可导致AB多药耐药性显著增加。; 李金月李梦影郑文浩焦红梅郭停停何新龙任禛誉张译尹董华兴李国才; 关键词：鲍曼不动杆菌耐药性基因变异

淋病奈瑟菌NspA原核表达及其抗原性研究: 2012年; 目的研究淋病奈瑟菌表面蛋白A（NspA）的抗原性及其在淋病快速诊断技术中的应用价值。方法用PCR技术克隆淋病奈瑟菌NspA基因，构建其原核表达载体，在大肠杆菌中表达重组NspA，表达产物复性后免疫小鼠，Western blot、ELISA分别检测免疫血清与淋病奈瑟菌细胞裂解液中NspA及与淋病奈瑟菌全细胞的结合能力。结果NspA基因可在大肠杆菌中表达，纯化并复性的重组NspA（rrNspA）可在小鼠体内刺激产生高效价特异性抗体，抗rrNspA抗体可与淋病奈瑟菌完整细胞及细胞裂解液中NspA特异性结合。结论获得的rrNspA及抗rrNspA抗体在建立淋病奈瑟菌抗体或抗原快速检测方法中具有潜在的应用价值。; 李国才解如山蒋桂花朱立天焦红梅潘兴元陈红菊严华季明春; 关键词：淋病奈瑟菌抗原性

淋病奈瑟菌NspA基因疫苗诱导小鼠特异性体液免疫应答被引量：2: 2007年; 1999年Martin等首先克隆了淋病奈瑟菌表面蛋白A（Neisseria surface protein A，NspA）基因，发现其在细胞表面持续表达，菌株之间NspA氨基酸序列的同源性高达98％，提示NspA可能是研制淋病疫苗的理想抗原。我室已成功构建NspA真核表达载体pcNspA，本文研究了pcNspA基因免疫在小鼠体内诱生特异性抗体的作用。; 蒋桂花李国才王劲松龚卫娟朱立天季明春; 关键词：淋病奈瑟菌特异性抗体体液免疫应答 A基因疫苗诱导小鼠

淋病奈瑟菌对hCD46基因转染COS-1细胞的黏附: 2008年; 为研究人CD46(hCD46)在菌毛介导的淋病奈瑟菌宿主特异性黏附过程中的作用。用连接PCR技术扩增出启动子与cDNA相连的hCD46小基因,并将其置换出pcDNA3.1载体中的CMV启动子,构建成重组真核表达载体pCD46。转染COS-1细胞后用间接免疫荧光法检测到hCD46cDNA在其自身启动子的指导下可在COS-1细胞膜表面有效表达,Western blotting检测表明表达产物的分子量正确,用流式细胞术分选表达hCD46的基因转染细胞COS-1-46。细菌黏附实验显示菌毛阳性淋病奈瑟菌临床分离株对COS-1-46细胞有较强的黏附性。提示hCD46是菌毛介导的淋病奈瑟菌特异性黏附于人黏膜细胞的一种重要受体,hCD46小基因可用于淋病奈瑟菌感染转基因小鼠模型的制备。; 李国才王劲松朱立天王晓红焦红梅潘兴元季明春; 关键词：淋病奈瑟菌

双组份系统在鲍曼不动杆菌毒力和耐药中的作用及机制被引量：1: 2021年; 鲍曼不动杆菌是不动杆菌属中较为多见的一种专性需氧的非发酵革兰阴性菌,也是导致医院内感染的常见病原菌之一。该菌在环境中广泛分布且存活时间较长,可引起呼吸道感染、败血症等。近年来,鲍曼不动杆菌感染持续增多且其耐药性逐渐增强,已成为危重症患者的一大威胁。作者就近年来有关双组份系统在鲍曼不动杆菌毒力及耐药中的作用及机制的研究进展进行综述。; 郭停停马文景陈国微孙晓利杨厉颖焦红梅孔桂美李国才; 关键词：鲍曼不动杆菌毒力多重耐药基因表达

淋病奈瑟菌黏附机制的研究进展: 2005年; 淋病导致的公共卫生问题在世界范围内广泛存在.淋病奈瑟菌的唯一宿主是人类,该菌侵袭泌尿生殖道引起淋病.其感染的关键是黏附因子对黏膜细胞的黏附.淋病奈瑟菌主要黏附因子与细胞受体间的作用机制已经在细胞水平上研究得比较清楚,表达淋病奈瑟菌黏附因子受体的转基因动物可望成为淋病研究的合适动物模型,为深入研究淋病奈瑟菌的致病机制、研制淋病疫苗及新型治疗药物提供有效工具.; 曹春育李国才季明春; 关键词：淋病奈瑟菌公共卫生问题细胞受体泌尿生殖道转基因动物细胞水平

转人溶菌酶基因小鼠乳腺生物反应器的建立被引量：9: 2005年; 目的研究人溶菌酶(humanlysozyme,hLYZ)动物乳腺生物反应器制备的可行性。方法将hLYZ基因与动物乳腺特异表达载体p205C3连接,所得重组载体p205C3-hLYZ用显微注射法建立转基因小鼠。结果共出生了136只F0代小鼠,PCR和Southern杂交检测基因整合阳性率分别为5·15%(2♀5♂)和2.94%(1♀3♂)。Western印迹检测结果表明,分泌在小鼠乳汁中的表达产物与正常hLYZ具有相同的分子量。目前转基因小鼠已经繁殖到F7代,每一代基因整合阳性母鼠的乳腺均表达hLYZ,乳汁中的表达量最高达750mg/L。斑点杂交试验证明,表达有较强的组织特异性,除在乳腺表达外,仅在脾脏和小肠有一定的异位表达。结论成功建立了hLYZ小鼠乳腺生物反应器。; 严华李国才孙怀昌; 关键词：小鼠乳腺生物反应器转基因技术基因表达

利用雌激素构建小鼠淋病奈瑟菌感染模型被引量：2: 2007年; 目的探讨用雌激素构建淋病奈瑟菌感染小鼠模型的方法。方法淋病奈瑟菌WHO-A接种经皮下注射苯甲酸雌二醇和真皮下埋植尼尔雌醇片(雌三醇)预处理的雌性ICR小鼠,小鼠阴道拭子接种T-M选择培养基培养分离淋病奈瑟菌,取小鼠阴道分泌物涂片染色观察淋病奈瑟菌感染情况,比较两种雌激素对小鼠淋病奈瑟菌感染的差异。结果与对照组相比,苯甲酸雌二醇小鼠体内淋病奈瑟菌有短时间的定植,而尼尔雌醇组与对照组无差异。结论雌激素(尤其是雌二醇)有利于淋病奈瑟菌在小鼠阴道内的定植。; 蒋桂花李国才夏怡吉陈荣季明春; 关键词：雌激素淋病奈瑟菌小鼠动物

新型抗生素在耐药鲍曼不动杆菌感染治疗中的研究进展被引量：5: 2020年; 近年来,鲍曼不动杆菌的耐药问题日趋显著。科学家通过改良现有抗生素结构或改变作用靶点的方法,针对耐药菌尝试设计新型抗生素。本文总结了新型抗生素氟环素类、铁载体头孢菌素、新型氨基糖苷类、二氮杂二环辛烷衍生物、多黏菌素B衍生物、基于联苯乙炔的LpxC抑制剂在耐药鲍曼不动杆菌感染治疗中的作用机制、抗菌活性以及安全性。; 陈佳浩李国才; 关键词：鲍曼不动杆菌抗菌药

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