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丙烯酰胺和细胞松弛素D作用下大鼠肝细胞中黏弹性的研究: 2007年; 采用微管吮吸技术测定了大鼠肝细胞的黏弹性,进一步研究了丙烯酰胺(acrylamide)和细胞松弛素D(cytochalasin D,CD)以及两者混合作用后对于细胞黏弹性的影响。结果表明:在用CD、丙烯酰胺以及CD、丙烯酰胺混合处理细胞后发现细胞的黏弹性系数均明显下降。尤其是对K1的影响最大中间纤维对于黏弹性系数K1的影响要大于微丝对K1影响。而微丝于黏弹性系数K2的影响要大于中间纤维对K1的影响。另外在丙烯酰胺和细胞松弛素D两者混合作用后细胞的黏弹性系数均比两者单独使用时呈显著下降的趋势。提示中间纤维、微丝在维持细胞黏弹性这一生物力学特性方面均起着一定的作用。另外从以丙烯酰胺组和细胞松弛素D组为照组的数据中发现:丙烯酰胺和细胞松弛素D两者混合作用后细胞的黏弹性系数K1或K2也存在一定程度的降低。中间纤维和微丝可能对正常肝细胞黏弹性有一定之间的交互影响的作用。; 冯成利吴泽志王艳萍冯全义耿相昌刘彬蔡绍皙李校堃; 关键词：肝细胞黏弹性丙烯酰胺中间纤维微丝

几种组织工程支架材料生物力学性能的研究(英文)被引量：6: 2007年; 背景：采用工程学的方法来构建人体组织及器官的替代品以及介入治疗的器械是目前生物组织工程领域的研究热点,而材料的选择是其核心。所制备的移植物,至少要能够赖受住移植过程中的各种外力而不至于破碎。故对被作为原料应用于组织工程领域的常用物质的力学性质进行评价,可以为组织工程研究中的材料选择提供依据。目的：考察9种组织工程支架材料的力学性能,为组织工程支架的设计、制作的选材提供力学依据。设计：重复测量试验。单位：重庆大学生物工程学院。材料：以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）、胶原、海藻酸钠、脱细胞猪皮、脱细胞血管、脱细胞猪皮-PLGA的复合体、脱细胞血管-聚乳酸/聚羟乙酸共聚物的复合体以及经改性的壳聚糖和明胶作为考察材料。方法：实验于2006-04/2007-03在重庆大学生物工程学院生物流变学实验室完成。制备上述9种材料试件,同时对壳聚糖和明胶进行改性。然后用INSTRON 1011拉伸实验机对其进行拉伸试验。拉伸速度为10mm/min,在应变范围（0.005-0.02）内计算试件的杨氏模量,并获得最大应变和最大应力。主要观察指标：9种材料的最大应变、最大应力及杨氏模量结果：①最大应变：脆性依次增大的顺序是：脱细胞猪皮〉脱细胞猪皮-PLGA〉脱细胞血管〉海藻酸钠〉脱细胞血管-PLGA〉胶原〉明胶（P〈0.05）;壳聚糖和PLGA的断裂伸长率比其他7种材料高出很多,分别为133%和276%,差异有显著性意义（P〈0.05）。在与PLGA复合后,脱细胞血管和脱细胞猪皮的断裂伸长率均变小,即脆性增加。②最大应力：脱细胞猪皮以及与PLGA共混后的最大应力即断裂强度均明显高于其他材料,且与PLGA共混后的脱细胞猪皮的断裂强度也略高于脱细胞猪皮。明胶、壳聚糖和脱细胞血管的断裂强度大体相当,介于7.67-9.51MPa。胶原和海藻酸钠; 徐志强刘彬王艳萍徐世荣麻开旺戴小珍徐志玲付小兵李校堃蔡绍皙; 关键词：组织工程支架生物力学 PLGA 脱细胞猪皮

胶原的体外缓释性能研究: 2008年; 目的:探讨经聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)改性的水溶性胶原在体外对牛血清白蛋白(BSA)的缓释性能。方法:将PLGA、胶原和BSA制备成复合物,用ELISA法检测本复合物对BSA的缓释性质。结果:本复合物约以6.61ng/d的速率稳定地缓释BSA,在30天的考察期内,BSA累积释放率达到43%,本复合物形态保持完好。结论:本PLGA-胶原复合物有望发展成为一种体内植入型,具有对生物活性物质长效缓释性质的组织工程支架。; 冯成利刘彬蒲德永黄亚东林绍强王艳萍李校堃; 关键词：缓释胶原

一种抗菌肽和aFGF融合蛋白的构建和表达被引量：6: 2006年; 利用PCR技术扩增出带有凝血酶Xa因子切割位点的天蚕素蜂毒素杂合肽和aFGF的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET-3c中,构建出表达质粒pET-aF-CM,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,氨苄青霉素抗性筛选重组转化子。IPTG诱导4h后,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的17%。将包涵体溶解后透析复性,并利用肝素亲和层析纯化,得到电泳纯的融合蛋白。Western blot分析表明,该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。MTT法检测显示,融合蛋白具有促3T3Bal/b细胞分裂活性,其比活为1.471×106IU/mg。利用凝血酶Xa因子裂解融合蛋白,可以获得抗菌肽和含凝血酶Xa因子裂解序列的aFGF蛋白。分子筛回收含杂合抗菌肽,抑菌活性检测表明其对大肠杆菌K12D31具有明显抑菌活性。微量稀释法检测结果表明,回收的抗菌肽对大肠杆菌DH5α、大肠杆菌K12D31、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和绿脓杆菌的MIC分别达6.25μg/ml、10μg/ml、2.5μg/ml、1.25μg/ml、0.625μg/ml和5μg/ml。; 丁长才苏志坚王艳萍周权男李校堃; 关键词：人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白

RAPD技术在东北地区玉米品种鉴别上的应用被引量：11: 2007年; 应用现代分子生物学RAPD技术,对吉林省主推6个玉米杂交种及其父母本的指纹图谱进行鉴别.在30个随机引物中选出扩增效果明显、特异性高的引物R1和R2并对18份材料进行基因图谱的分析,图谱差异显著、易于区分,说明RAPD技术可用于玉米品种鉴定和纯度鉴定.; 李尚禹陈阳王春艳于红王艳萍李校堃; 关键词：指纹图谱

一种玉米秸秆水解液生产燃料酒精的发酵工艺: 本发明涉及利用能够同化木糖和纤维素的酿酒酵母工程菌来发酵玉米秸秆水解液生产酒精。本发明可以利用溶氧值和pH值来控制流加工艺，本发酵也可以利用在不同时刻接入不同的酿酒酵母工程菌以及决定是否升温糖化来发酵生产酒精。本发明能提...; 李校堃袁辉王艳萍孟娟; 文献传递

SUMO蛋白酶活性片段的表达、纯化及活性测定被引量：12: 2007年; 利用PCR技术人工合成编码酿酒酵母泛素样特异性蛋白酶1(Ubiquitin-like specific protease 1,Ulp1)第403到621个氨基酸残基之间的DNA片段Ulp1p,并连接到大肠杆菌表达载体pET-3c中,构建出重组表达质粒pET-Ulp1p。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,氨苄青霉素抗性筛选转化子。经IPTG诱导4h后,SDS-PAGE结果显示,Ulp1p为可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的50.8%。通过Ni-NTA凝胶亲和层析和G-25凝胶层析联用可以获得纯度大于95%的Ulp1p。Western blotting分析表明,Ulp1p能与6xHis抗体产生免疫反应。以重组蛋白SUMO-hEGF(人表皮生长因子)和GST-SUMO-MT(金属硫蛋白)为底物进行酶切分析,结果显示,Ulp1p能特异性水解这两种SUMO融合蛋白,其比活为1.386×104U/mg。; 陈兴华李校堃苏志坚苏烨冯娅肖业臣孟绢王艳萍黄亚东; 关键词：纯化活性测定

一种玉米秸秆水解液生产燃料酒精的发酵工艺: 本发明涉及利用能够生产纤维素酶和木质素酶的大肠杆菌工程菌来发酵玉米秸秆(预)水解液生产酒精。本发明可以利用溶氧值、pH值和单糖浓度来控制流加工艺，本发酵也可以利用在不同时刻接入不同的酿酒酵母工程菌以及决定是否升温糖化来发...; 李校堃袁辉王艳萍孟娟; 文献传递

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王艳萍

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