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杨书红: 作品数：32 被引量：87H指数：5; 供职机构：华中科技大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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微RNA-145抑制剂靶向CRKL调节促分裂原活化的蛋白激酶通路对卵巢颗粒细胞激素合成的影响被引量：1: 2020年; 目的:研究微RNA(microRNA,miRNA)-145在卵巢早衰中的作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法:采用miRNA芯片预测并筛选在不同日龄雌鼠中差异性表达的miRNA,采用TargetScan预测miRNA靶基因,通过DAVID数据库对靶基因进行信号通路及生物学功能的富集分析,筛选在不同时期卵巢颗粒细胞中发挥重要调控作用的miRNA;采用MTT法检测卵巢颗粒细胞中miRNA-145抑制后生存率;采用Q-PCR检测miRNA-145及CRKL mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附法检测CRKL、雌二醇、卵泡刺激素、黄体生成素、p-p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)及p-ERK1/2水平。结果:miRNA芯片预测差异性表达miRNA 23个,靶基因多与细胞增殖、分化有关,且多集中于MAPK通路;综合结合生物信息预测结果,筛选出与CRKL能够靶向结合的miRNA-145;miRNA-145与CRKL在颗粒细胞中变化水平呈正相关,miRNA-145在卵巢细胞中被抑制后,CRKL水平、颗粒细胞凋亡及MAPK通路的激活均受抑制,但激素分泌趋于正向调节。结论:miRNA-145抑制剂能够作用于MAPK通路抑制卵巢颗粒细胞的凋亡,调节激素的合成,其作用机制可能与miRNA-145靶向CRKL调节MAPK通路有关。; 张远远胡昌华杨书红王峥; 关键词：卵巢早衰卵巢颗粒细胞 MAPK通路

小鼠卵泡发育不同阶段Egr-1、Gadd45α蛋白表达及相互关系被引量：2: 2009年; 目的:探讨Egr-1、Gadd45α在小鼠卵泡发育不同阶段的表达及其相互关系。方法:选择不同发育阶段的昆明种小鼠卵巢,用免疫组化法检测不同发育阶段卵泡中Egr-1、Gadd45α蛋白的表达。结果:Egr-1、Gadd45α蛋白在卵泡不同发育阶段的卵母细胞及颗粒细胞中均有表达,而且随卵泡发育表达增强。卵泡不同发育阶段中卵母细胞及颗粒细胞中Egr-1、Gadd45α蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。闭锁卵泡Egr-1、Gadd45α蛋白表达强烈,其表达强度明显高于各级生长卵泡。黄体及间质中亦有Egr-1、Gadd45α表达。同时Egr-1、Gadd45α在各级卵母细胞的表达有较强的相关性(rs=0.993,P<0.05)。结论:卵泡发育不同阶段Egr-1、Gadd45α均有表达,在卵泡发育后期和闭锁卵泡中强表达。提示Egr-1、Gadd45α在卵泡生长发育及闭锁过程中可能起重要的调控作用。; 赖志文罗爱月杨书红丁婷卢运萍马丁王世宣; 关键词：早期生长反应基因卵泡发育免疫组织化学小鼠

小鼠Prx2正义和反义真核表达载体的构建与表达: 2011年; 目的:构建小鼠Prx2正义及反义真核表达载体pEGFP-Nl-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达。方法:应用RT-PCR技术,从小鼠卵巢颗粒细胞提取的总RNA中,获得Prx2基因编码序列的正义及反义片段,克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至体外培养的未成熟小鼠颗粒细胞,通过荧光显微镜观察和Westernblot检测其在颗粒细胞中的表达改变。结果:酶切和测序证明重组真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-Nl-aPrx2构建成功,荧光显微镜观察及Western blot确认目标蛋白在颗粒细胞中表达增强或减弱。结论:成功构建小鼠Prx2基因正义及反义真核表达载体pEGFP-N1-sPrx2、pEGFP-N1-aPrx2并在小鼠卵巢颗粒细胞中表达。; 杨书红吕兴罗爱月赖志文丁婷韩凌斐卢运萍王世宣; 关键词：真核表达载体颗粒细胞小鼠

磷酸化p38 MAPK在小鼠卵泡发育中的表达被引量：1: 2014年; 目的:通过检测磷酸化p38 MAPK(p-p38MAPK)在小鼠卵泡发育过程中的表达,为研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在卵泡生长、发育及成熟过程中的作用提供理论基础。方法:随机选取健康成年小鼠60只,按雌雄2∶1的比例合笼繁殖新生小鼠。取3、5、7、11及21天雌性健康小鼠(各30只)的卵巢组织,采用免疫组化SP法检测不同年龄段小鼠卵巢组织中p-p38MAPK蛋白的表达水平。结果:p-p38MAPK蛋白在各年龄段小鼠不同级别卵泡的卵母细胞胞浆中均有表达,在始基卵泡中表达最强,与各级卵泡相比,差异均有统计学意义(P<0.05);初级卵泡与次级卵泡比较,差异无统计学意义(P>0.05);初级卵泡、次级卵泡与窦状卵泡相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。该蛋白在各级卵泡颗粒细胞中也均表达,始基卵泡与各级卵泡相比,差异均有统计学意义(P<0.05);初级卵泡与次级卵泡相比差异有统计学意义(P<0.05),而与窦状卵泡相比差异无统计学意义(P>0.05);在次级卵泡中表达最强,与各级卵泡相比差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄段小鼠卵巢中,21天小鼠卵母细胞p-p38MAPK蛋白表达强度分别与3天和7天小鼠进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3、5、7及11天各组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。各年龄组颗粒细胞p-p38MAPK蛋白表达强度相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:p-p38MAPK蛋白在小鼠卵泡发育过程中具有时空特异性,p-p38MAPK通路可能在卵泡发育过程中起重要的调控作用。; 马兰芳杨书红罗爱月熊家强王世宣; 关键词：MAPK 卵泡发育小鼠

Peroxiredoxin Ⅵ mRNA在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达被引量：1: 2013年; 目的探讨Peroxiredoxin(PRDX)Ⅵ mRNA在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达。方法分别选用C57BL/6j小鼠不同周龄、不同动情周期以及促性腺激素预处理卵巢,通过实时定量聚合酶链反应检测PRDXⅥmRNA表达。结果 PRDX Ⅵ mRNA在新生(3D)小鼠卵巢中表达为3周龄组的1.47倍、为6周龄组的3.89倍、为8月龄组的4.28倍(P<0.05);在小鼠动情前期卵巢中表达高于动情后期和动情间期(P<0.05);在促性腺激素预处理试验中,在孕马血清注射48 h后卵巢中表达是对照组的1.7倍,而人绒毛膜促性腺激素注射8、10及12 h后分别为对照组的0.44、0.41、0.54倍,而48 h后则为对照组的2.32倍(P<0.05)。结论 PRDX Ⅵ可能通过调节卵巢氧化应激压力而在卵泡发育和卵巢衰老中发挥重要调控作用。; 沈薇罗爱月程静潘光鑫杨书红丁婷王世宣; 关键词：PEROXIREDOXIN 活性氧族卵巢衰老卵泡发育

新型肿瘤导向肽融合抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤效应及机制被引量：1: 2013年; 目的将新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽相融合,以增强对肿瘤细胞的杀伤效应.方法验证新型多肽对肿瘤细胞的亲和能力,经融合多肽作用后,噻唑蓝（MTT）、流式细胞仪实验检测细胞的增殖与凋亡,Boyden小室分析对细胞侵袭转移能力的影响,Western blot检测细胞中活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、-8、-9的表达水平.结果薪型融合多肽具有对肿瘤细胞的亲和能力,20 μmol/L的融合多肽引起近100％ PE-3M-1 E8和95％ MKN-45细胞死亡,10 μmol/L的融合多肽诱导（82.15±1.20）％ PC-3M-1E8细胞及（84.27 ±3.20）％的MKN-45细胞发生凋亡,而其侵袭转移能力下降为（52.38±3.30）％、（46.16±2.70）％,其机制和细胞中的Caspase-3、-8、-9活化有关.结论新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后显示强烈的肿瘤细胞杀伤效应.; 马湘一杨书红刘荣华罗丹枫马丁奚玲; 关键词：肿瘤靶向治疗抗菌肽

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体的研究进展被引量：2: 2014年; 细胞骨架在维持细胞形态、承受外力及保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用,同时参与许多重要的生命活动,其主要由微管、微丝及中间丝组成。微丝作为细胞骨架的主要成分之一,在细胞的多种功能中扮演着重要角色。肌动蛋白单体一个接一个连成一串肌动蛋白链,两串这样的肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝,微丝能被组装和去组装。微丝的组装先需要“核化”,即几个单体首先聚合,其他单体再与之结合成更大的多聚体。; 马兰芳杨书红王世宣; 关键词：微丝中间丝细胞分化微管组织中心肺鳞状细胞癌细胞骨架

小鼠腔前卵泡不同分离方法的比较被引量：4: 2010年; 目的探讨小鼠腔前卵泡的最佳分离方法。方法取性未成熟小鼠的卵巢,按照不同分离方法,单纯机械法与酶解法分离腔前卵泡,并用基础培养基进行培养,比较不同分离方法获得的卵泡数量、形态,及对其早期生长发育的影响。结果2mg/mL的胶原酶可获得大量基底膜完整的腔前卵泡及裸卵(P<0.01);体外培养2d后,酶解组卵泡生长直径大(P<0.05)、GVBD率、放出第一极体率和7d生存率无明显差异(P>0.05)。结论胶原酶酶解法较单纯机械法更易获得大量高质量腔前卵泡,且对其早期发育无明显影响。; 丁婷罗爱月杨书红赖志文卢运萍马丁王世宣; 关键词：小鼠腔前卵泡体外培养

氧化损伤产物8-OHdG、4-HNE、NTY在成年小鼠卵巢组织中的增龄变化被引量：8: 2012年; 目的:探讨DNA、脂质和蛋白质氧化损伤产物在成年小鼠卵巢组织中的增龄变化。方法:选用12、24、48、75周龄自然衰老C57BL/6小鼠为模型。采用免疫组织化学方法和蛋白印迹技术检测各年龄组小鼠卵巢中8羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)、4羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NTY)的表达变化情况。结果:8-OHdG、4-HNE、NTY在卵巢间质细胞随增龄表达增加(P<0.05)。12周龄组3种物质的表达均明显低于其他各组,差异有显著统计学意义(P<0.01);24周龄含量低于48、75周龄组,差异有显著统计学意义(P<0.05);48周龄组与75周龄组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。而各年龄组卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞中未见明显变化。结论:氧化损伤在卵巢间质细胞中随增龄表现明显,间质细胞氧化损伤可能是导致卵巢衰老的原因之一。; 田勇赖志文石良艳杨书红罗爱月刘丽江王世宣; 关键词：卵巢卵巢衰老

卵巢催乳素受体mRNA在小鼠卵泡发育及排卵过程中的表达被引量：1: 2010年; 目的探讨卵巢催乳素受体（Prolactin receptor,PRLR）mRNA在小鼠不同发育阶段及排卵过程中的表达情况。方法选择不同发育时期的昆明小鼠,以及性未成熟昆明小鼠予以PMSG-HCG（Pregnancy Mare Serum Gonadotro-phin-Humane chorionic gonadotrophin,孕马血清促性腺激素-人绒毛膜促性腺激素）序贯处理,采用实时定量聚合酶链反应（Real-Time Polymerase Chain Reaction,Real-Time PCR）检测小鼠卵巢中PRLR mRNA的表达。结果PRLR mR-NA的表达水平随小鼠的不断发育而显著性升高,PRLR在6周龄小鼠卵巢中的表达量是3周龄小鼠的3.86倍（P〈0.01）,11周龄与33周龄小鼠的表达水平分别是3周龄小鼠的19.67倍、19.81倍（P〈0.01）;PMSG处理后12h,PRLR表达水平是对照组的1.44倍（P〈0.05）,24h、48h后分别达到5.48倍和7.14倍（P〈0.01）,HCG处理后4h、8h、12h,PRLR表达水平有所下降,但仍高于对照组（P〈0.01）,24h、48h后其表达水平再次升高,分别是对照组的5.64倍和6.04倍。结果 PRLR对小鼠卵泡的生长、发育及其黄体形成与维持发挥重要作用。; 罗爱月杨书红沈薇丁婷赖志文王毅卢运萍王世宣; 关键词：催乳素受体卵泡发育排卵 REAL-TIME

杨书红

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