张世雄 作品数:13 被引量:16 H指数:3 供职机构: 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 农业科学 更多>>
一种改进的糖蛋白染色鉴别方法的建立 被引量:6 2012年 目的建立一种更加灵敏高效的糖蛋白染色鉴别方法。方法在高碘酸-Schiff法的基础上,通过对固定、还原、氧化等溶液配方及染色时间的改变,对电泳凝胶糖蛋白染色法进行改进,并与传统高碘酸-Schiff法进行比较。结果重组单抗样品经改进的糖蛋白染色法染色,仅重链显色,轻链不显色;再经考马斯亮蓝染液复染,轻、重链均显色;改进的染色方法的糖含量检测灵敏度为0.15μg糖,而传统高碘酸-Schiff法的糖含量检测灵敏度为3μg糖。结论已成功建立了一种新的特异性好、灵敏度高且用时短的糖蛋白染色鉴别方法。 张世雄 程立均一种鼠源单克隆抗体及其制备方法和用途 本发明提供了一种重组抗NC08单克隆抗体,轻链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,重链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明还公开了编码该抗体的DNA分子,表达该抗体的载体以及被该表达载体... 魏敬双 王辉 陈忱 张世雄 江一帆 吕若芸 张斌 曹佳彬 吴军营 赵宏远 王丽 高健 段宝玲重组单抗药物的非还原电泳纯度分析 被引量:4 2010年 目的对重组单抗药物的非还原电泳纯度进行分析,排除样品制备过程中形成的一些假象。方法结合重组单抗的分子结构特征,改变常规SDS-PAGE条件,将抗体样品在不同的缓冲液及电泳条件下进行比较。结果抗体在非还原SDS-PAGE纯度检测中出现的次带,可通过在供试品缓冲液中加入烷基化试剂封闭自由巯基而几乎全部消除;通过降低电泳过程的环境温度,可有效降低主带上方高相对分子质量带的出现。结论单抗药物中由于含有多对二硫键引起的一些因电泳样品制备而形成的假象带,可以通过试验方法的修正而去除。 程立均 魏敬双 张世雄 李耿 贾茜关键词:纯度 二硫键 不同pH诱导重组和血源人血白蛋白构象变化的光谱分析 2010年 目的分析不同pH诱导重组人血白蛋白(Recombinant human serum albumin,rHSA)和血源人血白蛋白(Plasma-derived human serum albumin,pHSA)的构象变化。方法在不同pH值条件下,分别经紫外和荧光光谱扫描分析rHSA与pHSA及3批rHSA的二阶导数谱及275nm和295nm激发波长下的荧光光谱。结果 rHSA与pHSA的最大吸收波长均为278nm,二阶导数谱和荧光光谱均随pH值发生变化,趋势基本一致;3批rHSA的紫外和荧光光谱间无显著差异。结论 rHSA在不同pH值条件下的构象变化与pHSA基本一致,3批rHSA的构象具有良好的批间一致性。 刘俊乐 魏敬双 程立均 杜威世 张世雄 王志明 贾茜关键词:白蛋白类 蛋白质构象 PH 光谱分析 利用牛血清生产超低Ig牛血清和IgG的方法 本发明提供一种利用牛血清生产超低Ig牛血清和IgG的方法,通过两次不同速率的亲和层析工艺,得到去除免疫球蛋白的牛血清。本发明通过对过滤亲和介质,柱高、流速等各项实验条件的优化,大大提高了牛血清中IgG、IgM、细菌、病毒... 张小雪 张世雄 魏世文 高磊哲 杨明明 翟丽丽 常亮 纪思佳 孔德清 夏红雪 赵伟 曹晨华 刘国芳 卢胜娟N-糖链切除对重组抗狂犬病毒单克隆抗体中和活性的影响 被引量:1 2016年 重组抗狂犬病毒单克隆抗体是一种全人源的抗病毒感染单抗,主要用于狂犬病毒暴露后预防。采用糖苷酶处理2种重组抗狂犬病毒单克隆抗体Mab1、Mab2水解切除N-糖链,通过糖染色和毛细管电泳检测确定N-糖链酶解程度,利用快速荧光灶抑制试验检测其中和活性,分析N-糖链切除对该单抗中和活性的影响。结果显示,N-糖链切除后抗体中和活性无明显变化。说明N-糖链对这两株抗狂犬病毒单抗的体外中和活性不是必须的结构成分。 吕若芸 王辉 陈忱 张世雄 张晓楠 曹晨华 魏敬双关键词:毛细管电泳 中和活性 一种鼠源单克隆抗体及其制备方法和用途 本发明提供了一种重组抗NC08单克隆抗体,轻链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,重链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明还公开了编码该抗体的DNA分子,表达该抗体的载体以及被该表达载体... 魏敬双 王辉 陈忱 张世雄 江一帆 吕若芸 张斌 曹佳彬 吴军营 赵宏远 王丽 高健 段宝玲文献传递 重组单抗药物亲和层析病毒去除工艺验证 被引量:3 2011年 目的对重组单抗药物亲和层析病毒去除工艺进行验证。方法以甲型流感病毒H1N1亚型、单纯疱疹病毒1型和腺病毒5型作为指示病毒,分别使用新、旧rProtein A Sepharose Fast Flow(rProtein A SFF)层析介质考察重组抗狂犬病病毒单抗亲和层析步骤对病毒的去除效果。结果经新、旧rProtein A SFF介质亲和层析后,3种指示病毒的滴度均下降4.0 log10以上。结论 rProtein A SFF亲和层析工艺能有效去除重组单抗药物的潜在病毒污染。 程立均 马翠卿 杨建岭 魏敬双 张世雄 刘俊乐 魏林 贾茜一种稳定的狂犬病毒人源抗体组合制剂 本发明公开了一种稳定的狂犬病毒人源抗体组合制剂。该抗体组合制剂由重组人源狂犬病毒抗体NC08及NM57、缓冲剂、表面活性剂、等渗调节剂和抗氧化剂组成,pH为5.5~6.5。本发明公开的制剂具有使两种抗体长时间保持稳定,溶... 魏敬双 王辉 孔令锋 程立均 陈忱 赵伟 吕若芸 刘祥义 张世雄 王茶 江一帆 曹佳彬 张斌 赵俊伟 高健 段宝玲文献传递 pH值对重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体稳定性的影响 2009年 目的研究pH值对重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体NM57稳定性的影响。方法将NM57原液的pH值分别调节为4.0、5.0、6.0、7.0和8.0,分别置于4和40℃保存,于0、2、4、6周取样,观察其外观的变化,并检测其SDS-PAGE及SEC-HPLC纯度。中试规模制备NM57制剂(200IU/ml,pH6.0),4℃放置3、6、9、12、18和24个月,取样观察其外观的变化,SEC-HPLC检测样品纯度,快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测样品中和活性。结果在观察期内,所有样品的外观均保持澄清透明。不同pH值的NM57原液4℃放置6周,纯度无明显变化;40℃放置的不同pH值的NM57原液样品纯度变化有明显差异,NM57(5.0)和NM57(6.0)样品相对稳定。中试规模制备的6批NM57制剂4℃放置24个月,其纯度及中和活性均保持稳定。结论NM57原液在甘氨酸-组氨酸缓冲系统中,pH6.0条件下比较稳定,NM57(pH6.0)制剂长期稳定性良好。 李耿 程立均 赵伟 刘进怀 张世雄 魏敬双关键词:狂犬病病毒 稳定性 中和活性