应建跃
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:浙江大学校医院更多>>
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- SARS-CoV核衣壳蛋白重组表达及单克隆抗体特性鉴定
- 2004年
- 陈洪勋吴建祥龚辉周继勇申会刚严兴成应建跃
- 关键词:N蛋白单克隆抗体核衣壳蛋白MRNA水平糖基化氨基酸残基
- SARS-CoV核衣壳蛋白的体外表达及单克隆抗体功能鉴定被引量:1
- 2005年
- 为对SARSN蛋白的功能进行研究,并建立快速、方便的诊断方法,将已克隆、构建成功的重组质粒PGEX-4T/N转化至E.coliBL21中,IPTG诱导表达,表达产物与兔源GST多抗在66kD处有很强的反应性,融合蛋白GST-N分别通过GSTrapFF1mL纯化柱和割胶纯化两种方法获得了具有生物活性和变性的融合蛋白.其蛋白浓度分别为0.85mg/mL和0.433mg/mL.利用纯化的GST-N蛋白免疫SPFBALB/c小鼠,获得4株能稳定传代并分泌抗SARSN单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为3E5、6B9、4C2、4B7,经Westernblot分析表明,所获得的4株抗SARSN单克隆抗体与纯化的N蛋白均具有特异反应性,且不与禽冠状病毒的N蛋白发生反应.
- 陈洪勋严兴成应建跃吴建祥周继勇
- 关键词:冠状病毒N蛋白单克隆抗体