唐咸来
- 作品数：35 被引量：100H指数：5
- 供职机构：广西壮族自治区科学技术厅更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程经济管理农业科学更多>>
- Sinorhizobium fredii WGF03胞外多糖分泌相关基因exoD功能初探被引量：3
- 2014年
- 从费氏中华根瘤菌WGF03的基因组中克隆出与胞外多糖分泌密切相关的基因exoD,研究该基因对胞外多糖合成、菌株共生结瘤能力和固氮效率的影响。利用自杀性质粒pK18mobsacB,通过同源双交换法构建exoD基因的缺失突变体ΔexoD。实验发现:与野生菌株相比,突变株在YMA培养基平板上胞外多糖产量明显减少、运动能力也有所减弱;在NaCl浓度小于350 mmol/L范围内,菌体均能维持稳定生长;接种于大豆幼苗后,产生的根瘤数量较多,但个体小、形状不一,且固氮酶活也显著下降。研究结果说明exoD基因参与S.fredii WGF03胞外多糖的合成并影响菌株共生结瘤能力和固氮效率。
- 马婷婷张健粟月萍宋张杨唐咸来申佩弘武波
- 关键词：胞外多糖突变
- 甲基营养菌Methylobacterium sp MB200中crtI基因的克隆及表达被引量：1
- 2012年
- 八氢番茄红素脱氢酶(CrtI)催化八氢番茄红素经过4次脱氢合成番茄红素,或者经过3次脱氢合成链孢红素,在类胡萝卜素的生物合成中发挥重要的作用。以甲基营养菌Methylobacterium sp MB200为原始菌株,首先采用转座子突变技术构建部分突变体库共11552株,筛选得到33株颜色发生变化的目的突变体,随后利用分子克隆技术从目的突变体中获得crtI基因的完整ORF,长为1539 bp,编码512个氨基酸。与来自M.populi BJ001、M.chloromethanicum CM4和M.extorquens AM1的crtI一致性均为93%。将crtI与载体pCM80连接得到重组质粒pCM80-crtI,导入原始菌株中得到重组菌MB200/pCM80-crtI。测定原始菌株与重组菌株的CrtI酶活,结果发现,重组菌株CrtI的酶活与原始菌株相比约提高了40%。实验结果为完善甲基营养菌中类胡萝卜素的生物合成代谢途径提供了理论参考。
- 林琼珊唐咸来李献蒋承建李俊芳申佩弘
- 关键词：甲基营养菌克隆
- 论大学科技园发展的集群效应被引量：11
- 2002年
- 通过对国内外大学科技园形成与发展过程的回顾与反思认为 ,大学科技园的发展必须重视和形成集群效应 ,并就当前我国大学科技园发展中难以形成集群效应的问题提出相应的对策。
- 曲用心唐咸来
- 关键词：大学科技园集群效应
- 沼气池宏基因组文库中未培养微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与鉴定被引量：5
- 2008年
- 以间接提取法提取了沼气池样品的微生物宏基因组DNA,用柯斯质粒载体pWEB:TNC构建了一个含三万个克隆的沼气池宏基因组文库,对文库中的克隆随机分析表明,该文库的外源片段平均长度为40 kb,文库的总容量为1 .2×106kb。对其中的一个在七叶苷平板上显色的阳性克隆pGXN100进行进一步亚克隆、测序和序列分析。结果表明,pGXN100上有一个全长为1 863bp的ORF,编码621个氨基酸组成的蛋白质。将该基因命名为Unglu100。与产气克雷伯菌属的一个β-葡萄糖苷酶基因AN292在核苷酸和氨基酸水平上分别有76%和85%的同源性,利用SMART软件进行预测表明,Unglu100可能是PTS中β-葡萄糖苷酶特异性的转运蛋白组件。
- 唐咸来车志群李双喜蒋建林罗奉奉武波
- 关键词：沼气池宏基因组文库Β-葡萄糖苷酶
- 微生物的氨氧化作用机理研究进展被引量：5
- 2008年
- 对氨氧化微生物的生化作用机理,以及相关的氨单加氧酶(AMO)和羟胺氧化还原酶(HAO)及其基因表达的分子生物学研究进展进行了概述,提出了氨氧化生物脱氮的主要发展方向。
- 唐咸来
- 关键词：氨氧化
- 利用双标记mTn5构建甲基杆菌MB200突变体库的研究被引量：5
- 2008年
- Methylobacterium sp. MB200是一种粉红色的、兼性甲基营养菌,它能以单碳化合物作为唯一碳源和能源,因此,可以作为氨基酸、工业酶等的生产菌株。以M. sp. MB200一碳代谢途径作为主要研究对象,利用mTn5-gusA-pgfp21转座子构建了甲醇利用菌的突变体库,在含有丁二酸的培养基上共获得了约12000株突变体,其中,甲醇营养缺陷的突变体119株,表现GUS活性的突变体1542株。然后,根据转座子已知序列,运用TAIL-PCR的方法克隆到了突变基因的部分序列,为进一步研究一碳代谢基因以及氨基酸和工业酶等的生产打下了基础。
- 申佩弘晁红军宋修鹏武波唐咸来
- 关键词：转座子突变体TAIL-PCR
- 甲基营养菌Methylobacterium sp.MB200中部分一碳代谢相关基因的定位及mtdA和mtdB基因的克隆研究被引量：2
- 2011年
- 以甲基营养细菌Methylobacterium sp.MB200为出发菌株,首先利用质粒转座子(pTnMod-RKm’)构建了目的菌株MB200的部分突变体库,获得能够在双抗性MMII板上生长的突变体共11552株,然后在双抗性MMI板上复筛获得不能够利用甲醇的突变体333株(初步认为是一碳代谢途径被破坏的突变株),为一碳代谢相关基因的克隆研究奠定了基础。随后利用TAIL-PCR技术快速准确地从突变体库中定位了部分与一碳代谢相关的基因,并根据pTnMod-RKm’具有复制起始位点能够快速克隆插入位点侧翼序列的特性克隆到mtdA和mtdB基因的全序列并进行了初步分析。
- 宋修鹏武波申佩弘蒋承建田丹丹唐咸来
- 关键词：甲基营养菌突变体库
- 不能利用脯氨酸为惟一碳氮源生长的费氏中华根瘤菌突变株的筛选及鉴定被引量：2
- 2004年
- 费氏中华根瘤菌可以利用脯氨酸作为惟一碳、氮源生长.利用转座子Tn5gusA5随机插入诱变的方法得到6000多株突变子,并从中筛选到1株脯氨酸分解代谢缺陷的突变子GXHN100.通过插入位点的定位及序列分析,发现插入位点位于一个未确定功能的ORF内,将该ORF命名为pmrA(prolinemetabolicrelative).通过原位杂交,从构建的部分基因文库中获得1个阳性克隆pGXHN100(含有3.3kb外源片段),序列分析表明它包含了插入基因的完整序列.将3.3kb的pGXHN100外源片段连接到广宿主载体pLAFR3上获得重组质粒pGXHN200,通过三亲接合,将pGXHN200导入GXHN100获得互补菌株GXHN200.植株实验发现,突变体GXHN100结有效瘤,固氮酶活与出发菌株无显著差异,但结瘤时间延迟,结瘤效率及竞争结瘤能力下降,而互补菌株GXHN200与野生型HN01没有明显的差异.
- 黄胜柏学亮马庆生唐咸来武波
- 关键词：脯氨酸碳氮源机插HN
- 一种编码丝氨酸蛋白酶抑制剂的基因及其应用
- 一种编码丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的基因spilC，具有下列核苷酸序列之一：1)序列表No.1的DNA序列；2)与序列表No.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有丝氨酸蛋白酶抑制活性的蛋...
- 武波蒋承建郝振宇申佩弘唐咸来李双喜金科马格非
- 一株产絮凝剂的曲霉菌株的筛选被引量：19
- 2001年
- 从排污沟的废水污泥中筛选到 1株产絮凝剂的霉菌GXF9912。该菌株的最佳产絮凝剂时间为培养后72h ;培养基的初始 pH为 6 .0～ 6 .5时 ,产生的絮凝剂活性较高 ;Ca2 +对絮凝作用有促进作用。通过GXF9912菌株的 5 .8SrRNA基因两侧的内转录间隔区 (internaltranscribedspacers,ITS)进行序列分析表明该菌株为曲霉。
- 武波韦东唐咸来柏学亮马庆生唐记良
- 关键词：絮凝剂内转录间隔区曲霉
