黄晶晶 作品数:10 被引量:13 H指数:2 供职机构: 汕头大学医学院 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
西罗莫司促进TGF-β分泌对小鼠调节性T细胞体外增殖的影响 被引量:1 2013年 目的通过观察西罗莫司或环孢霉素A与CD4+CD25+调节性T细胞((regulatory T cell,Treg)体外共培养对CD4+CD25+Treg增殖情况及对Foxp3和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达的影响,探讨西罗莫司促进TGF-β分泌诱导Treg体外分化和增殖的机制。方法无菌条件下取C57BL/6小鼠脾脏,分离单个核细胞,免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg,设空白对照组、西罗莫司组、环孢霉素A组,共培养96h。上流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg。反转录聚合酶链、酶联免疫吸附试验法检测西罗莫司或环孢霉素A处理后的CD4+CD25+Treg的FoxP3+、TGF-βmRNA表达水平和分泌情况;Western blot分析TGF-β信号通路重要的活化分子Smad蛋白的表达情况,观察其对CD4+CD25+FoxP3+Treg增殖的影响;使用TGF-β中和抗体进一步验证TGF-β在西罗莫司促进CD4+CD25+FoxP3+Treg分化增殖过程中的重要作用。结果与对照组相比,西罗莫司处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平增加近2.5倍,差异有统计学意义(P<0.01);而环孢霉素A处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平则有所下降,但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,环孢霉素A组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例明显降低,差异有统计学意义(41.25%vs.69.22%,P<0.01);西罗莫司组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞稍有下降,但差异无统计学意义(65.21%%vs.69.22%,P>0.05)。西罗莫司组FoxP3+T细胞的比例明显高于对照组,差异有统计学意义(53.7%vs.40.2%,P<0.05);而环孢霉素A组FoxP3+T细胞比例明显低于对照组,差异有统计学意义(23.6%vs.40.2%,P<0.01)。结论西罗莫司在体外培养促进CD4+CD25+Treg的增殖与生长,而环孢霉素A体外抑制CD4+CD25+Treg的增值与生长。西罗莫司通过诱导TGF-β表达分泌来促进CD4+CD25+FoxP3+Treg的增殖。 麦明杰 陈星权 叶秀娟 朱平 郑少忆 刘怀普 黄晶晶 肖泽周 王全兴 沈攸云 陈寄梅 庄建关键词:西罗莫司 环孢霉素A 调节性T细胞 FOXP3 小鼠 GFAP和MAP_2 mRNA在缺血预处理与单纯缺血大鼠脊髓中的表达差异 被引量:2 2013年 目的探讨GFAP、MAP2mRNA在缺血预处理与单纯缺血的大鼠脊髓中的表达差异。方法将54只200 g雌雄各半的SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血预处理组(IPC组)3组。采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型;Sham组6只,手术开始步骤同其他两组,但不做肾下腹主动脉阻断即缝合伤口;I/R组24只,直视下采用动脉夹夹闭腹主动脉段左肾动脉分支起始处下方5 mm处(即肾动脉下型),仅阻断腹主动脉60 min后开放灌注;而IPC组24只,先阻断腹主动脉5 min,开放5 min,随即阻断腹主动脉60 min后开放灌注。再灌注后1、2、5、10 d时对其各个时间点进行后肢神经行为学评分,同时利用实时定量PCR技术检测预处理对大鼠缺血再灌注后脊髓GFAP、MAP2mRNA表达的影响,用2-△△Ct的方法计算各组脊髓中GFAP、MAP2mRNA的表达倍数。结果 54只大鼠术后全部存活。行为学评分发现与Sham术组比较,各实验组行为学评分均下降,随着再灌注观察时间的延长,各组分值均升高,第5天时评分与Sham组差异无统计学意义。实时定量PCR检测GFAP、MAP2mRNA的表达时发现,I/R组再灌注第2天时MAP2表达显著高于Sham组;IPC组在再灌注1、2 d时MAP2表达高于Sham组,且与同时间点I/R组比较差异有统计学意义;IPC组的MAP2mRNA表达峰值出现的时间较I/R组早,峰值较I/R组高。I/R组仅在再灌注第10天时GFAP mRNA表达高于Sham组,达到峰值;IPC组在再灌注2、5 d时GFAP表达高于Sham组,且第5天时达到峰值;I/R组和IPC组各自不同时间点出现的GFAP mRNA的峰值不存在明显差异。结论 GFAP、MAP2mRNA在不同处理大鼠脊髓中的差异表达,可能与急性缺血再灌注后神经组织可逆性的损伤修复的规律有关。 杨国柱 郭惠明 张晓慎 朱平 范瑞新 范小平 庄建 陈寄梅 刘怀普 黄晶晶关键词:缺血预处理 胶质纤维酸性蛋白 实时定量PCR 心脏瓣膜置换术后脑卒中的观察和护理 被引量:2 2014年 目的探讨心脏瓣膜置换术后脑卒中的观察和护理要点。方法回顾性分析50例心脏瓣膜置换术后住院期间发生脑卒中患者的资料,特别分析监护方法,即术后严密观察神经系统病变先兆病征、实施脑保护、维持血流动力学稳定、防治心律失常、正确呼吸系统与凝血系统监护、做好康复训练。结果全组死亡2例,痊愈39例,9例仅遗留卒中部位相应的神经系统症状。结论掌握术后观察重点,实施针对性的护理措施,对术后及时发现脑卒中的发生及预后有积极意义。 凌云 黄晶晶关键词:心脏瓣膜置换术 脑卒中 脑出血 脑梗死 护理 心脏保存技术的研究现状 被引量:1 2012年 在脏器移植术不断取得进展的今天,移植脏器供给的匮乏与患者日益增大的需求之间的矛盾,已经成为阻碍脏器移植术继续发展的瓶颈,矛盾产生的重要原因之一,是脏器无法长期保存。为解决这一问题,有关延长离体器官保存方法的研究已成为器官移植领域的研究热点。 黄晶晶 王巍 朱平关键词:心脏 器官移植 一氧化碳干燥保存法对小鼠心脏保存效果的实验研究 目的:作为心脏移植术的重要组成部分,心脏离体保存法已成为广大科研工作者的研究热点,本课题拟采用一氧化碳(Carbon monoxide,CO)保存法这一全新的心脏保存方法来保存小鼠离体心脏,并探讨这一方法对小鼠心脏体外保... 黄晶晶关键词:一氧化碳 文献传递 免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4^+CD25^+调节性T细胞的应用研究 被引量:1 2011年 目的研究免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(regu-latory T cells,Treg)的效果。方法将C57BL/6(H-2b)小鼠脾脏剪碎、过滤、去除红细胞后离心洗涤,获得小鼠脾细胞悬液。用Ficoll法分离获得单个核细胞后,通过免疫磁珠阴性加阳性选择两步法分离获得CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-Treg。用流式细胞仪检测所获得CD4+CD25+Treg的纯度,并比较纯化分离前后脾脏CD4+CD25+Treg的比例,用台盼蓝染色后计算CD4+CD25+Treg的细胞存活率,并对分离后的细胞表型进行鉴定。结果免疫磁珠阴性加阳性选择两步法纯化分离后CD4+CD25+Treg的纯度为(88.7±2.9)%,分离前CD4+CD25+Treg的平均比例为11.6%,纯化分离后CD4+CD25+Treg的平均比例为93.7%。细胞存活率为(93.7±4.1)%。与CD4+CD25-Treg相比,CD4+CD25+Treg的CD44表达略有增加(P>0.05),CD45RB的表达明显下降(P<0.05),CTLA-4和Foxp3的表达明显增加(均为P<0.05)。结论使用免疫磁珠两步法分离纯化,能避免激惹CD4分子,可获得高纯度且具有天然CD4+CD25+Treg表型的细胞。 黄克力 朱平 卢聪 朱小兰 麦明杰 沈二霞 吴若彬 刘怀普 黄晶晶 王巍 谢波关键词:CD4+CD25+调节性T细胞 流式细胞术 小鼠 外科治疗先天性冠状动脉瘘53例体会 被引量:5 2012年 目的:总结53例先天性冠状动脉瘘患者外科治疗的经验。方法:2006年1月至2011年4月共收治先天性冠状动脉瘘患者53例,其中男39例,女14例,年龄1d~65岁,右冠状动脉动脉瘘28例,左冠状动脉瘘25例,漏入右房、右室、肺动脉、左房、左室分别为16、13、16、1、7例。单纯性冠状动脉瘘26例,余27例合并有其他心脏外科疾病,手术均在体外循环下进行。结果:死亡2例,1例术后超声心动图检查发现少量残余漏,2例心电图检查仍存在ST-T改变,余48例痊愈。随访2个月~5年,仅1例患者有轻微劳累后气促症状。结论:外科治疗先天性冠状动脉瘘是相对安全和有效的,当合并有其他严重基础疾病和复杂心脏畸形时,手术适应证的选择需谨慎。 黄克力 朱平 吴若彬 郑少忆 肖学钧 卢聪 郭惠明 范瑞新 刘怀普 黄晶晶 王世强关键词:血管畸形 冠状动脉 外科治疗 先天性冠状动脉瘘 一氧化碳气体干燥保存法对小鼠心脏保存效果的实验研究 被引量:1 2014年 目的观察一氧化碳(carbon monoxide,CO)气体干燥保存法对同种小鼠心脏异位移植的影响。方法采用C57BL/6雄性小鼠,建立同系小鼠心脏腹部异位移植模型。4—6周龄小鼠60只,分为3组(n=20),即空白对照组,HTK供体心组及CO供体心组;8~10周龄小鼠40只,分为HTK受体组及CO受体组(n=20)。取HTK供体心组小鼠心脏浸泡于HTK液中;取CO组小鼠心脏悬挂并置于高压气体罐中(PO2:3.2×101.3kPa+PCO:0.8×101.3kPa=4×101.3kPa)。两组供体心均置于4℃冰箱中保存8h后,分别移植于两受体组小鼠腹部。空白对照组仅取供体心,不做移植术。移植完成后,比较HTK组及CO组复跳时间。移植2h后,对比观察两组移植心脏的颜色及复跳情况。取3组供体心心肌组织,分别采用苏木素伊红染色和TUNEL染色法对比供体心病理学改变及心肌细胞的凋亡情况。结果HTK供体心组6只复跳,CO供体心组13只复跳,复跳率差异有统计学意义[86.7%(13/20)vs.53.3%(7/20),P=0.027];与HTK供体心组相比,CO供体心组供体心复跳时间显著缩短,差异有统计学意义[(203.92±73.52)s vs.(352.67±61.19)s,P=0.001];病理方面,与空白对照组比较,CO供体心组供体心病理损伤明显,但与HTK组比较明显减轻;Tunel检测显示,CO组凋亡率较空白对照组升高,差异有统计学意义(P〈0.05);但比HTK组明显减少,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论CO气体保存法可以缩短供体小鼠心脏复跳时间及减少心肌细胞的凋亡,对离体心脏具有显著的保护作用。 黄晶晶 赵明一 郑少忆 庄建 陈寄梅 黄帅 富旗 朱小兰 朱平关键词:一氧化碳 人工瓣膜置换术后脑卒中50例临床分析 2014年 人工瓣膜置换是治疗心脏瓣膜疾病的有效手段。随着技术的改进,手术成功率在逐年提高,但术后脑部并发症仍时有发生。我们对在我院接受体外循环下行人工瓣膜置换术后发生脑卒中的50例患者临床资料进行分析总结,现报道如下。 黄晶晶 朱平 郑少忆 郭惠明 黄焕雷 吴若彬 肖学钧 陈寄梅 庄建 卢聪关键词:人工瓣膜置换术 后脑卒中 瓣膜置换术后 心脏瓣膜疾病 手术成功率 脑部并发症 预处理对缺血再灌注后微管相关蛋白-2基因mRNA表达的影响 2013年 短暂的缺血耐受训练可以使相应脏器对随后的缺血再灌注损伤产生耐受能力,被称为缺血预处理(IPC),其机制尚不清楚。脊髓亦存在IPC的延迟保护现象。 杨国柱 郭惠明 庄建 陈寄梅 张晓慎 范瑞新 范小平 刘怀普 黄晶晶 朱平关键词:缺血预处理 基因MRNA表达 微管相关蛋白-2 缺血耐受 IPC