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纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响: 在冷冻稀释液基础上分别添加体积分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖溶液, 以添加6mg/L红景天多糖为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及...; 韩晓戴建军张树山张廷宇吴彩风张德福; 关键词：猪精液冷冻保存红景天多糖抗氧化作用; 文献传递

纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响: 在冷冻稀释液基础上分别添加体积分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖(Nonomaterials Rhodiola Sachalin ensis Polysaccaride,NRSP)溶液,以添加6m...; 韩晓张德福戴建军张树山张廷宇吴彩凤顾晓龙李翔徐利李芳芳

玻璃化快速冷冻仪在猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻中的应用被引量：3: 2014年; 为了提高猪成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果,应用玻璃化快速冷冻仪(Vit-Master)进行猪成熟卵母细胞的冷冻,以观察其冷冻效果。结果显示:浆状液氮降温速率[(21 345±l768)℃/min]远远高于普通液氮降温速率[(11 982±1 936)℃/min];各组冻后形态完整率无显著差异;冻后存活率为:使用玻璃化快速冷冻仪的不同浓度保护剂组[A':(57.87±10.66)%、B':(76.5±10.33%)、C':(79.07±14.90)%和D':(81.94±6.98%)]均分别高于对应的不使用玻璃化快速冷冻仪组[A:(49.73±2.91)%、B:(60.63±12.45)%、C:(71.33±14.38)%和D:(78.50±7.40)%],但均无显著差异,B'和C'组均高于C和D组,但差异不显著,A和A'组均显著低于B'、C'和D'组。因此,通过使用Vit-Master冷冻装置提高冷冻速率,可以降低冷冻保护剂使用浓度并提高冻后存活率。; 徐利戴建军张廷宇吴彩凤李维杰张树山顾晓龙李翔韩晓李芳芳; 关键词：卵母细胞玻璃化冷冻

红景天多糖对猪卵母细胞体外成熟及其发育潜力的影响被引量：3: 2013年; 旨在探讨红景天多糖(Rhodiola sachalinensis polysaccaride,RSP)对猪卵母细胞体外成熟及发育潜力的影响。在猪卵母细胞成熟液中添加不同浓度的RSP,以排出第一极体作为核成熟的标志,观察卵母细胞核成熟情况,统计孤雌激活(PA)及体外受精(IVF)后胚胎的卵裂率和囊胚率,并检测卵母细胞内谷胱甘肽(GSH)的浓度及活性氧(ROS)水平。结果表明:与对照组(83.50%±1.00%)相比,添加0.6、6.0和60.0mg.L-1的RSP均能提高其核成熟率,但差异不显著(P>0.05);6.0和60.0mg.L-1的RSP组能显著提高卵母细胞内GSH含量(P<0.05),随着RSP浓度的增加可以降低ROS水平,但是各组之间差异不显著(P>0.05);孤雌激活中,60.0mg.L-1 RSP组的卵裂率(88.44%±5.06%)和6.0 mg.L-1 RSP的囊胚率(40.94%±8.23%)最高,且显著高于对照组(72.16%±7.38%和24.06%±5.16%,P<0.05);与对照组(33.52%±4.05%)相比,0.6、6.0和60.0mg.L-1RSP组体外受精卵裂率均显著提高(P<0.05),60.0mg.L-1 RSP组的囊胚率达(19.20%±3.13%),显著高于对照组的(9.60%±0.65%,P<0.05)。由此可见,在猪卵母细胞成熟过程中添加适当浓度的RSP,能提高其核成熟率,促进胞质成熟,从而提高其孤雌激活和体外受精后的胚胎发育能力。; 徐利戴建军张廷宇吴彩凤张树山张德福顾晓龙李翔韩晓李芳芳; 关键词：红景天多糖卵母细胞孤雌激活体外受精

梅山猪耳成纤维细胞体外培养及其克隆被引量：11: 2014年; 为获得适合于克隆梅山猪的供体细胞,本试验对梅山猪耳皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化、生长特征和核型分析等进行了研究。通过组织块培养法获得梅山猪皮肤成纤维细胞,用胰酶轻度消化后传代3~4次可得到较纯的皮肤成纤维细胞,并以此作为供体细胞,获得1头健康梅山克隆猪。; 张德福吴彩凤戴建军张树山张廷宇王勃顾晓龙李翔徐利李芳芳韩晓; 关键词：梅山猪体外培养克隆

RG108降低猪胎儿成纤维细胞的甲基化水平: 本研究的目的是研究RG108对猪胎儿成纤维细胞抑制甲基化水平的作用，找出更加高效，低毒的DNMT抑制剂，以期提高克隆效率。; 顾晓龙戴建军张廷宇张树山吴彩凤徐利韩晓李翔张德福; 关键词：克隆技术体细胞核移植成纤维细胞 DNA甲基化

RG108对猪胎儿成纤维细胞甲基化水平及克隆胚胎发育的影响被引量：2: 2014年; 本研究使用RG108处理猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblast,PFF),研究其对细胞甲基化水平和核移植效率的影响。使用0.05、0.5、5和50μmol·L-1RG108分别处理细胞24、48和72 h后,用高效液相色谱和亚硫酸氢盐测序(Bisulfite sequencing PCR,BSP)法分析细胞整体甲基化水平和印迹基因H19和IGF2R的DMR区甲基化率,并检测RG108处理对细胞生长、凋亡、染色体变化及随后的核移植效率的影响。整体甲基化水平结果通过两因素方差分析,发现RG108处理浓度与处理时间无交互作用,处理浓度间细胞甲基化水平差异不显著,但处理时间却能显著的影响甲基化水平,且50μmol·L-1RG108处理细胞72 h后整体甲基化水平显著低于对照组。BSP分析结果表明,5和50μmol·L-1处理PFF 72 h后H19的DMR区域甲基化率显著降低。RG108对细胞生长有一定的抑制作用,且0.5、5和50μmol·L-1组经处理72 h后凋亡比例显著提高,但对细胞的染色体数目没有显著影响。PFF经5和50μmol·L-1RG108处理72 h后能显著提高卵裂率和囊胚细胞数,且5μmol·L-1组囊胚率也显著提高。结果表明,RG108降低细胞整体甲基化水平呈时间依赖性,且同时降低H19的DMR区域甲基化率。PFF经5μmol·L-1浓度处理72 h组能显著提高核移植胚胎效率。; 顾晓龙张廷宇戴建军吴彩凤张树山徐利李翔韩晓李芳芳曾宪垠张德福; 关键词：克隆猪甲基化核移植

纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响被引量：8: 2013年; 在冷冻稀释液中分别添加分数为1%、5%、10%、15%、20%的纳米化红景天多糖(Nonomaterials rhodiola sachalin ensis polysaccaride,NRSP)溶液,以添加6mg/L红景天多糖(Rhodiola sachalin ensis polysaccaride,RSP)为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15%NRSP组的精子活力(0.69)、顶体完整率(51.42%)、质膜完整率(25.95%)均高于其他组,并显著高于空白组(P<0.05)。此外添加15%NRSP组的解冻后直线运动精子百分比(46.33%)要显著高于其他各组(P<0.05);添加6mg/L RSP组丙二醛(MDA)浓度最低(10.83±0.39)μmol/L,并且显著低于空白组(31.85±1.36)μmol/L,(P<0.05),但与15%的NRSP组(11.60±0.42)μmol/L无显著差异(P>0.05)。添加20%的RNSP组超氧化物歧化酶(SOD)活力最高(343.05±19.64)μ/mgprot,显著高于其他添加组(P<0.05)。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系(P<0.05),而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关(P<0.05),与SOD活力呈显著正相关(P<0.05),质膜完整率与两者含量相关性不显著(P>0.05)。; 韩晓戴建军张树山张廷宇吴彩凤顾晓龙李翔徐利李芳芳张德福; 关键词：红景天多糖纳米化猪精液冷冻保存

纳米化处理红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响: 本试验在以往研究的基础上,添加新型的冷冻保护剂—纳米化红景天多糖(Nonomaterials Rhodiola Sachanensis Polysaccharide,NRSP),探索其对猪精液冷冻保护的效果,以及添加的最...; 韩晓; 关键词：红景天多糖猪精液冷冻效果; 文献传递

SOX9和INSL3基因在克隆猪隐睾中的表达及甲基化模式被引量：1: 2013年; 为查明本课题组所获得的体细胞克隆猪隐睾发生的可能原因,本研究采用相对荧光定量PCR技术和亚硫酸氢盐测序法分析SOX9和INSL3基因在克隆猪隐睾中的表达量及其启动子区CpG位点甲基化状态。结果表明:除了SOX9基因在克隆猪C2中的表达量显著高于对照组N(1.82 vs 1,P<0.05)外,克隆猪SOX9和INSL3基因的表达量都显著低于对照组N(P<0.05);亚硫酸氢盐测序结果显示SOX9基因启动子区在克隆猪C1和C2中的甲基化程度没有显著变化,而INSL3基因启动子区在克隆猪C1和C2中的甲基化程度显著高于对照猪N(86.25%、78.75%vs 57.50%,P<0.05)。结果说明,INSL3基因在克隆猪隐睾中DNA甲基化重编程异常,而且这种异常影响其正常表达,由此推测这可能是导致克隆猪发生隐睾的重要因素之一。; 顾晓龙徐利韩晓李翔李芳芳戴建军曾宪垠张德福; 关键词：甲基化隐睾克隆猪

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韩晓

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