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郑敏: 作品数：57 被引量：140H指数：7; 供职机构：福建省农业科学院更多>>; 发文基金：福建省科技计划项目福建省农科院青年科技人才创新基金福建省属公益类科研院所基本科研专项更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程理学生物学更多>>

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感染新型鸭呼肠孤病毒的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳方法的建立被引量：1: 2013年; 为建立感染新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳(2-DE)方法。本研究通过对人工感染NDRV的雏番鸭肝脏病变的观察,对肝脏蛋白质提取裂解液的配方、样品上样量、一向等电聚焦(IEF)参数等条件的对比和优化,建立了有效的番鸭肝脏2-DE方法。结果表明:采用攻毒后病变最典型的第5天的番鸭肝脏作为研究样品;采用研磨-超声-裂解液(7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、65 mmol/L DTT、40 mmol/L Tris-base、0.5%IPG buffer)法提取肝脏蛋白质,结合2D clean-up kit以及去拖尾DeStreak试剂纯化蛋白,按1100μg上样,设置IEF参数为:50 V 12 h、200 V 1.5 h、500 V 1 h、1000 V 1 h、8000 V 3 h、8000 V 60000 V h、500 V维持,采用胶体考马斯亮蓝染色,能获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱。应用建立的2-DE方法和PDQest 8.0分析软件,发现26个与正常番鸭肝脏蛋白表达水平超过3倍的差异蛋白点。该方法的建立为进一步寻找NDRV感染宿主组织相关蛋白以及水禽呼肠孤病毒差异蛋白质组学研究提供了技术支持。; 黄梅清朱果真陈仕龙郑敏程晓霞陈少莺; 关键词：番鸭肝脏蛋白质组新型鸭呼肠孤病毒

免疫新城疫活疫苗对大肠杆菌感染鸡群血清生化指标变化的影响: 2022年; 为了研究鸡新城疫活疫苗紧急免疫控制鸡大肠杆菌病的效果,通过大肠杆菌人工感染30日龄蛋鸡,待出现病症后,紧急免疫新城疫Lasota弱毒活疫苗(Ⅳ系)4羽份,分别于免疫后第5 d、第10 d、第17 d,随机采集各组血样8份,分离血清,分别用比浊法、双缩脲法、溴甲酚绿法、黄嘌呤氧化酶法测定血清溶菌酶、总蛋白、白蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果显示:免疫10 d,试验组、对照组、空白组的溶菌酶值分别为121.81±21.76 U/mL、116.56±10.78 U/mL、112.27±12.02 U/mL,试验组与对照间差异显著;试验组、对照组的总蛋白和白蛋白都低于空白组,差异显著;此外,试验组总蛋白高于对照组,两者间差异显著;试验组与对照组的血清SOD值差异不显著。结果表明:新城疫活疫苗能有效提升血清的溶菌酶和蛋白质含量,提升机体非特异性免疫,对鸡大肠杆菌病有较好的防控和辅助治疗作用。; 蔡羲林琳林琳陈秀琴黄梅清江斌; 关键词：大肠杆菌新城疫活疫苗血清生化指标

福建省禽源大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：2: 2020年; 为研究福建省禽源大肠杆菌分离株的耐药情况,通过采集疑似大肠杆菌病患禽的肝、脾、肺,经麦康凯琼脂培养基分离、伊红美蓝培养基鉴定、生物化学试验,结合临床诊断,结果分离到15株禽源大肠杆菌(鸡源10株、鸽源5株)。药敏试验结果表明,大部分菌株对复方新诺明、头孢菌素、四环素、林可霉素、多西环素耐药;部分菌株对多黏菌素B和呋喃唑酮中度敏感;大部分菌株对丁胺卡那霉素高度敏感。该研究可为福建省禽大肠杆菌病的防控提供理论依据。; 陈秀琴张世忠江斌江斌郑敏林琳黄梅清; 关键词：大肠杆菌敏感性

鸭IFN-βmRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 2021年; 【目的】建立一种检测鸭IFN-βmRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法。【方法】根据GenBank中鸭IFN-β(KT428159)核苷酸序列设计并合成特异性引物,将鸭IFN-β基因克隆至pET-30a载体,以此构建的pET-30a-IFN-β阳性重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测,构建标准曲线,并进行引物特异性、灵敏度及重复性试验。【结果】该扩增特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线单峰(Tm=87.94±0.16℃);Ct值在8.9-34.0线性拟合程度高,相关系数R^(2)>99.5%;灵敏度高,最低检测限为2.84 copies·μL^(-1);重复性好,对来自临床的3种组织样品检测的组内变异系数小于0.13%,组间变异系数不超过1%。【结论】该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为鸭IFN-βmRNA表达水平的定量分析提供了技术手段。; 方铁辉董慧肖世峰王劭程晓霞程晓霞朱小丽林锋强郑敏朱小丽陈少莺; 关键词：IFN-Β 荧光定量RT-PCR MRNA

呼吸道综合症病猪群病原检测与分析被引量：5: 2010年; 应用PCR技术和免疫荧光试验对福建省某猪场以呼吸道症状为主的发病猪群进行多重病原检测和人工感染病猪肺脏淋巴结等器官的病理组织学观察。结果显示:病猪肺脏和淋巴结等病料匀浆的RT-PCR检测为PRRSV变异株阳性,但PRV、CSFV、PCV2及SIV均为阴性;免疫荧光试验结果与RT-PCR一致;将阳性病料接种Marc-145分离到1株病毒,人工感染断奶仔猪能复制出与临床自然病猪相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒;病理组织学观察显示人工感染濒死猪肺脏呈间质性肺炎病变。综合分析上述结果初步表明该猪群暴发的呼吸道疾病主要是由高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异型引起。; 叶耀辉吴南洋黄梅清郑敏雷松波张世忠; 关键词：猪群病原检测变异型

新城疫活疫苗对控制鸡大肠杆菌病的效果观察: 2022年; 为了研究鸡新城疫活疫苗紧急免疫控制鸡大肠杆菌病的效果,通过大肠杆菌人工感染30日龄蛋鸡,待出现病症后,紧急免疫新城疫La-sota弱毒苗(Ⅳ系)4羽份。免疫后5~17 d,通过血凝抑制试验测定血清新城疫抗体水平,试验组新城疫抗体水平逐步提高,对照组抗体略有下降,免疫后17 d两组抗体水平差异显著(P<0.05);对照组鸡死亡率50%,试验组死亡率20%,说明随着新城疫抗体水平提高对大肠杆菌病抗病性增强,二者呈现一定程度正相关。通过流式细胞仪检测外周血液淋巴细胞数量,发现紧急免疫后5~17 d,T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞数量明显上升,试验组与对照组T淋巴细胞数量差异极显著(P<0.01),B淋巴细胞、NK细胞数量差异显著(P<0.05),结果显示紧急免疫后细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫增强。在临床上使用新城疫La-sota弱毒苗(Ⅳ系),对控制鸡的大肠杆菌病有一定指导意义。; 蔡羲林琳林琳陈秀琴黄梅清江斌; 关键词：新城疫活疫苗鸡大肠杆菌病 T淋巴细胞 B淋巴细胞 NK细胞

一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1u基因的双位点sgRNA及其CRISPR/Cas9系统与应用: 本发明涉及一种用于靶向敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1u基因的双位点sgRNA及其CRISPR/Cas9系统与应用，所述的双位点sgRNA，包括up3‑sgRNA和ud3‑sgRNA；up3‑sgRNA的核苷酸序列如SEQ...; 郑敏陈仕龙林昶王劭陈少莺

禽类弱毒疫苗外源因子污染检测方法的研究进展: 2021年; 近年来,我国已经发生数起禽类弱毒疫苗污染事件,给养禽业造成巨大的经济损失。应用合适的检测方法准确快速检测外源因子对确保疫苗产品安全至关重要。传统的检测法是公认的检测外源因子的标准方法,但存在一定的局限性,基于核酸的分子生物学方法逐渐成为更有优势的方法。文章就禽类弱毒疫苗污染外源因子的原因,外源因子传统检测技术、免疫学技术及分子生物学技术,检测外源因子不同方法的比较进行了综述,以期为预防和检测疫苗污染外源因子提供参考。; 陈秀琴郑敏黄梅清林甦郑良焰林锋强; 关键词：污染

黑龙江省扶余市麦穗鱼舌状绦虫裂头蚴的分子鉴定和系统发育分析: 2024年; 为鉴定从黑龙江省扶余市麦穗鱼腹腔内收集的绦虫裂头蚴的种类,本试验采用PCR方法分别对其核糖体内转录间隔区(ITS)和线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因进行扩增和序列测定。运用DNASTAR软件的MegAlign程序分析核苷酸同源性,采用邻接法构建基于ITS和COⅠ基因序列的系统进化树,以此分析分离虫株种内与种间的系统发育关系。结果显示,各分离虫株的ITS1和ITS2基因与舌状绦虫(AY121751)的核苷酸序列同源性最高,分别为98.8%~100%和99.6%~99.7%;各分离虫株的COⅠ基因与肠舌状绦虫(EU241273)的核苷酸序列同源性最高,为91.2%~94.7%。基于ITS序列构建的系统进化树显示,舌状绦虫和双线绦虫的ITS序列具有高度的保守性,ITS区域可能不适宜作为区分舌状绦虫属内部种类的可靠分子标记。基于COⅠ基因构建的系统进化树显示,分离虫株与土耳其、俄罗斯和欧洲的肠舌状绦虫分离株进化关系最近。根据序列同源性和COⅠ基因进化树结果,初步将本试验所分离虫株鉴定为肠舌状绦虫。结果表明,COⅠ基因更适合于舌状绦虫属种类的鉴别。本试验为舌状绦虫的分子流行病学调查提供了参考。; 陈秀琴邱阳元郑敏林甦江斌王劭黄梅清; 关键词：舌状绦虫分子鉴定系统发育分析

同时检测单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的荧光定量PCR检测引物组及试剂盒: 本发明涉及食品微生物检测领域，具体涉及一种同时检测单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7的TaqMan‑MGB荧光定量PCR检测引物组及试剂盒。所述引物组包括三对引物对和TaqMan探针，所述引物对和Taq...; 陈秀琴林甦张世忠黄梅清郑敏; 文献传递

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