程晓霞 作品数:263 被引量:654 H指数:17 供职机构: 福建省农业科学院 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 福建省属公益类科研院所基本科研专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
短嘴型小鹅瘟病毒传播途径研究 本研究以短嘴型小鹅瘟病毒(SB-GPV M15株)分别经消化道(口服)、直接接触(同居)和呼吸道(空气传播)等途径人工感染2日龄半番鸭,测定感染后不同时间的试验鸭体重、喙长宽值、血清LPAI抗体水平和发病死亡程度,探讨短... 程晓霞 肖世峰 陈仕龙 朱小丽 林锋强 王劭 俞博 王锦祥 吴南洋 黄梅清 郑敏 陈少莺 俞伏松关键词:半番鸭 文献传递 番鸭呼肠孤病毒M3基因克隆及序列分析 参考Genbank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)M3基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株M3基因进行RT-PCR扩增,克隆到pMD18-T载体中,并对克隆产物进行酶切... 林锋强 朱小丽 胡奇林 欧阳岁东 程晓霞 陈仕龙 王劭 陈少莺关键词:番鸭呼肠孤病毒 克隆 文献传递 感染新型鸭呼肠孤病毒的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳方法的建立 被引量:1 2013年 为建立感染新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳(2-DE)方法。本研究通过对人工感染NDRV的雏番鸭肝脏病变的观察,对肝脏蛋白质提取裂解液的配方、样品上样量、一向等电聚焦(IEF)参数等条件的对比和优化,建立了有效的番鸭肝脏2-DE方法。结果表明:采用攻毒后病变最典型的第5天的番鸭肝脏作为研究样品;采用研磨-超声-裂解液(7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、65 mmol/L DTT、40 mmol/L Tris-base、0.5%IPG buffer)法提取肝脏蛋白质,结合2D clean-up kit以及去拖尾DeStreak试剂纯化蛋白,按1100μg上样,设置IEF参数为:50 V 12 h、200 V 1.5 h、500 V 1 h、1000 V 1 h、8000 V 3 h、8000 V 60000 V h、500 V维持,采用胶体考马斯亮蓝染色,能获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱。应用建立的2-DE方法和PDQest 8.0分析软件,发现26个与正常番鸭肝脏蛋白表达水平超过3倍的差异蛋白点。该方法的建立为进一步寻找NDRV感染宿主组织相关蛋白以及水禽呼肠孤病毒差异蛋白质组学研究提供了技术支持。 黄梅清 朱果真 陈仕龙 郑敏 程晓霞 陈少莺关键词:番鸭 肝脏 蛋白质组 新型鸭呼肠孤病毒 猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立和应用 被引量:1 2007年 根据GenBank上发表的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)基因序列,针对TGEVN基因全序列设计合成了一对引物,以TGEV疫苗株为模板,建立了检测TGEV的RT-PCR方法。应用该方法对TGEV疫苗株RNA进行扩增,获得与预期大小相符,长度为1168bp的特异性目的片段;测序结果与已报道的TGEV不同毒株的序列同源性达到95%~97%;敏感性测定该RT-PCR可扩增到18pg的TGEV-N-cDNA;对猪传染性胃肠炎(TGE)的病料进行RT-PCR鉴定,可检测出TGEVN基因片段。结果表明建立的RT-PCR方法对TGEV的检测敏感性高、特异性强,可用于TGEV感染的诊断和流行病学调查。 王劭 陈少莺 林锋强 程晓霞 江斌 陈仕龙 林琳 朱小丽关键词:猪传染性胃肠炎病毒 RT-PCR 一种兔子饲养棚 本实用新型提供了一种兔子饲养棚,包括框体,所述框体下方四周均设置有站脚,所述框体的内部设有多个分隔块,所述分隔块的左右两侧面均开设有凹槽,所述框体两侧面内壁上均设置有条形凸块,所述分隔块通过条形凸块安装在框体内;所述框体... 王劭 陈少莺 林甦 肖世峰 程晓霞 林锋强 陈仕龙 朱小丽文献传递 福建省番鸭细小病毒病流行病学及病原研究 被引量:5 2019年 从福建省番鸭主要饲养区共收集临床疑似番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)病病料65份,进行病原学检测、病原分离、动物回归试验、免疫攻毒试验、基因片段序列分析,旨在研究福建省番鸭细小病毒病流行情况及病毒遗传变异状况。结果显示:仅有10份为MDPV感染,占比为15.2%;其余均为其他病原或两种病原混合感染。MDPV一年四季均能发生,但主要以冬春季节多发(占80%)。从分离的10株MDPV来看,分离株均能致死番鸭胚,番鸭感染MDPV分离株后发病率为80%~100%,死亡率为40%~60%,与1985年分离的MDPV-P株特性相似。1日龄番鸭免疫番鸭细小病毒病活疫苗后,7日龄进行分离株的攻毒,未见发病和死亡现象。基因进化树显示10株分离株与MDPV-P株属于同一分支。基于2018年流行的MDPV毒株与1985年MDPV-P株致病性、抗原性和基因序列特性相似,无明显变化,可使用番鸭细小病毒病活疫苗进行免疫可有效防控该病。 林锋强 程晓霞 程晓霞 陈少莺 朱小丽关键词:番鸭细小病毒 流行病学 病原 鸭IFN-βmRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 2021年 【目的】建立一种检测鸭IFN-βmRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法。【方法】根据GenBank中鸭IFN-β(KT428159)核苷酸序列设计并合成特异性引物,将鸭IFN-β基因克隆至pET-30a载体,以此构建的pET-30a-IFN-β阳性重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测,构建标准曲线,并进行引物特异性、灵敏度及重复性试验。【结果】该扩增特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线单峰(Tm=87.94±0.16℃);Ct值在8.9-34.0线性拟合程度高,相关系数R^(2)>99.5%;灵敏度高,最低检测限为2.84 copies·μL^(-1);重复性好,对来自临床的3种组织样品检测的组内变异系数小于0.13%,组间变异系数不超过1%。【结论】该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为鸭IFN-βmRNA表达水平的定量分析提供了技术手段。 方铁辉 董慧 肖世峰 王劭 程晓霞 程晓霞 朱小丽 林锋强 郑敏 朱小丽 陈少莺关键词:IFN-Β 荧光定量RT-PCR MRNA 一种实验室鸭用孵化器 本发明提供了一种实验室鸭用孵化器,包括一中空的箱体,所述箱体上设置有一通风系统,所述通风系统的进风口和出风口延伸至所述箱体内,所述箱体内底面设置有一第一电机,所述第一电机包附有防水透气膜;所述箱体内顶面设置有一轴承,所述... 王劭 陈少莺 林甦 肖世峰 程晓霞 林锋强 陈仕龙 朱小丽文献传递 鉴别伪狂犬病病毒强、弱毒株单克隆抗体的制备 被引量:2 2005年 用纯化的猪伪狂犬病病毒闽A株(PRV-FA)免疫Balb/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得11株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中6株仅与强毒FA反应,而不与弱毒FB、Bartha及gE缺失疫苗株发生反应。特异性鉴定结果表明,各株单抗均不与猪瘟病毒、猪流感病毒、猪呼吸繁殖障碍综合症病毒、猪细小病毒等发生交叉反应。 程晓霞 陈少莺 胡奇林 俞伏松 朱小丽 陈仕龙 林锋强 欧阳岁东 车勇良 林天龙 程由铨关键词:伪狂犬病病毒 强弱毒株 单克隆抗体 鹦鹉副粘病毒的分离与鉴定 应用SPF鸡胚从疑似NDV感染的病死鹦鹉肝、脾和胰腺中分离到1株病毒,该病毒能凝集鸽红细胞,并能被新城疫阳性血清抑制,但不能被减蛋综合征(EDS)、禽流感H5、H7、H9血清抑制;电镜观察见到形态不规则、囊膜表面具有密集... 程晓霞 黄梅清 林锋强 郑敏 陈少莺 吴南洋关键词:家禽 菌株分离