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董海涛

作品数：11 被引量：25H指数：3
供职机构：浙江医科大学更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生
  • 4篇生物学

主题

  • 8篇细胞
  • 8篇基因
  • 5篇细胞色素
  • 2篇原癌基因
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇细胞色素P4...
  • 2篇克隆
  • 2篇化学诱导
  • 2篇基因表达
  • 2篇寡核苷酸
  • 2篇核苷酸
  • 2篇反义
  • 2篇反义寡核苷酸
  • 2篇癌基因
  • 2篇CDNA
  • 2篇CHL细胞
  • 2篇RAS
  • 2篇MRNA
  • 1篇代谢

机构

  • 11篇浙江医科大学

作者

  • 11篇董海涛
  • 10篇余应年
  • 6篇吴健敏
  • 3篇朱丽君
  • 2篇钱瑛
  • 2篇陈星若
  • 1篇罗建红
  • 1篇曹江
  • 1篇杨骅
  • 1篇胡文蔚
  • 1篇蔡朱男
  • 1篇郑树
  • 1篇张小山
  • 1篇胡汛

传媒

  • 6篇癌变．畸变．...
  • 3篇中国药理学与...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇浙江医科大学...

年份

  • 1篇1998
  • 3篇1996
  • 7篇1995
共 11 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
CYP2B7cDNA的克隆,鉴定及真核细胞重组表达载体的构建被引量：2
1995年
应用ＲＴ—ＰＣＫ技术和ＤＮＡ重组技术从人肝组织中克隆细胞色素Ｐ４５０２Ｂ７（ＣＹＰ２Ｂ７）基因的ＣＤ－ＮＡ片段至ｐＧＥＭ—３Ｚ载体上，经限制性内切酶切图谱分析和ＤＮＡ序列分析确证克隆的片段为ＣＹＰ２Ｂ７的ｃＤＮＡ。然后将该片段亚克隆入一合适真核细胞表达载体的ＢａｍＨＩ位点处，获得４个克隆。其中１个含有正向插入片段，３个含有反向插入片段。为导入哺乳类细胞中，建立稳定表达ＣＹＰ２Ｂ７ｃＤＮＡ的细胞株打下基础。
吴健敏董海涛余应年朱丽君
关键词：细胞色素P450基因基因克隆CDNA基因表达
转染了细胞色素P450　1A1基因重组表达质粒的CHL细胞（CHL一1A1）可代谢活化多环芳烃类化合物被引量：2
1996年
本研究应用我室建立的稳定表达ＣｙｔＰ４５０１Ａ１的转基因细胞株ＣＨＬ－１Ａ１对一组前致突变物／前致癌物进行双核细胞微核试验,同时以母细胞系ＣＨＬ为对照,结果表明,在不加Ｓ９的情况下,五种前致突变物,苯并(α)芘、３－甲基胆蒽、苯并蒽、二甲基苯蒽和蒽均能诱导ＣＨＬ－１Ａ１细胞的微核率显著增高,并具有剂量反应关系,证明ＣＨＬ－１Ａ１细胞具备代谢活化多环芳烃类化合物的能力。因此,转基因细胞株ＣＨＬ－１Ａ１在化学致癌物的遗传毒理学研究方面具有重要的应用价值。
蔡朱男董海涛余应年
关键词：细胞色素P450微核试验
用逆转录多聚酶链反应法检测多药耐药基因（mdr1）的表达
1995年
以长春新碱诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＶＣＲ和阿霉素诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＤＯＸ及敏感细胞Ｋ５６２作为检测对象，采用逆转录多聚酶链反应法，并且以β２－微球蛋白（β２ｍ）基因作为内参照，检测和比较了上述细胞的多药耐药基因ｍｄｒ１表达。经过３０个循环扩增，耐药细胞检测出ｍｄｒ１和β２ｍ基因的扩增产物，而敏感细胞无ｍｄｒ１扩增产物。结果提示，本方法可用以区分耐药和敏感细胞，有希望成为临床个体化疗敏感性预测的重要指标之一。
杨骅曹江胡汛郑树董海涛
关键词：聚酶链反应抗药性基因长春新碱阿霉素
N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍引起vero细胞基因表达改变及有关cDNA片段的初步鉴定被引量：13
1998年
运用ｍＲＮＡ差异显示（ＤＤ－ＰＣＲ）技术，通过２６对锚定及任意引物组合显示基因的差异表达情况，分离了７个表达有差异的片段．其中３个片段的相关基因属于对Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）处理的初级反应基因，２个属于次级反应基因．另有２个片段的差异表达仅在蛋白合成抑制剂环己亚胺（ＣＨＭ）合并ＭＮＮＧ处理时才出现．反向缝隙印迹杂交分析印证了２个片段在ＤＤ－ＰＣＲ中发现的改变，同时分析的本实验室分离的２５个片段中，８个片段的变化被验证与ＤＤ－ＰＣＲ中的改变一致．序列分析结果显示这些片段与许多基因有高同源性，其中包括一些参与信息传导的基因．
胡文蔚余应年张小山董海涛
关键词：亚硝基胍CDNAMRNA片段
细胞色素P4501A1基因mRNA的化学诱导及在人肝中的基础表达被引量：3
1996年
利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究了几种传代培养细胞和成人肝组织及人胚胎肝组织细胞色素Ｐ４５０１Ａ１（１Ａ１）基础表达水平并观察了几种化学诱导剂对人羊膜细胞ＦＬ系和原代胚肝细胞该基因ｍＲＮＡ水平的诱导．结果显示：３－甲基胆蒽，苯巴比妥，β－萘黄酮在不同程度上能高诱导ＦＬ细胞１Ａ１ｍＲＮＡ表达．ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＣＨＬ细胞及Ｖ７９细胞存在基础表达，但Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果提示其表达量极低．成人肝脏中１Ａ１亦存在极低的表达水平，而人胚胎肝脏不能用高灵敏度的ＲＴ－ＰＣＲ检测到痕迹表达，提示胚胎发育时期１Ａ１基因处于完全关闭状态．
董海涛吴健敏余应年
关键词：细胞色素化学诱导肿瘤发生
c－k－ras反义寡核苷酸抑制HCe8693细胞生长及p21^（ras）表达的序列特异性被引量：2
1996年
本文采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），并结合ＰＣＲ产物直接测序法，证明人大肠癌细胞系ＨＲ８３４８和ＨＣｅ８６９３的ｋ－ｒａｓｃＤＮＡ片段（第３～８３密码子）中存在第１２密码子ＧＧＴ→ＧＡＴ突变，未发现其它突变或ＲＮＡ剪接异常．用分别与野生型和上述突变型ｋ－ｒａｓ第９～１５密码子互补的１８聚硫代磷酸型寡核苷酸（两者仅存在一个碱基差别）及随机设计的对照寡核苷酸（终浓度为６μｍｏｌ·Ｌ－１），发现与突变型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸能抑制ＨＣｅ８６９３细胞生长并有ｐ２１ｒａｓ蛋白表达量的抑制；而与野生型ｋ－ｒａｓ互补的寡核苷酸及随机合成的对照寡核苷酸对之无明显抑制作用，说明ｃ－ｋ－ｒａｓ反义寡核苷酸对ＨＣｅ８６９３细胞生长和ｐ２１ｒａｓ蛋白合成的抑制作用存在明显的核苷酸序列特异性．
钱瑛余应年董海涛陈星若罗建红
关键词：原癌基因反义寡核苷酸
c─k─ras反义寡核苷酸抑制Hce─8693细胞生长的序列特异性研究
1995年
ｃ─ｋ─ｒａｓ反义寡核苷酸抑制Ｈｃｅ─８６９３细胞生长的序列特异性研究钱瑛，董海涛，余应年，陈星若（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）原癌基因的突变激活和抑癌基因的失活是恶性肿瘤发生发展的分子生物学基础。选择性抑制突...
钱瑛董海涛余应年陈星若
关键词：原癌基因反义寡核苷酸
化学诱导剂对培养细胞CytP450IA1基因mRNA水平诱导及肝组织该
1995年
化学诱导剂对培养细胞ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１基因ｍＲＮＡ水平诱导及肝组织该基因基础表达水平的研究余应年，董海涛，吴健敏（浙江医科大学病理生理教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０ＩＡ１（ＣｙｔＰ４５０ＩＡ１）基因表达可被多环芳烃类...
余应年董海涛吴健敏
关键词：化学诱导剂MRNA化学诱导剂肝组织致癌物
携细胞色素P4501A1cDNA的高表达型重组载体构建及转基因细胞系的
1995年
携细胞色素Ｐ４５０１Ａ１ｃＤＮＡ的高表达型重组载体构建及转基因细胞系的建立董海涛，吴健敏，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）构建具高效、稳定、持续表达细胞色素Ｐ４５０基因产物的细胞系对建立更符合体内状...
董海涛吴健敏余应年朱丽君
关键词：基因重组遗传毒理学
CYP2B6cDNA导入V79、FL和CHL细胞中稳定表达及其初步鉴定
1995年
ＣＹＰ２Ｂ６ｃＤＮＡ导入Ｖ７９、ＦＬ和ＣＨＬ细胞中稳定表达及其初步鉴定吴健敏，董海涛，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０是代谢活化大多数前致突变物／致癌物的主要酶系，在建株细胞中这些基...
吴健敏董海涛余应年朱丽君
关键词：CYP2B6V79细胞FL细胞CHL细胞
全选 清除 导出
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