王志文
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：河南大学淮河医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目蚌埠市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 粉防己碱通过cGAMP介导的cGAS-STING信号通路增强宿主的抗病毒反应
- 2024年
- 目的研究粉防己碱是否可以联合cGAMP作为cGAMP的激动剂增强cGAS-STING信号通路,从而探究粉防己碱的抗病毒功能。方法采用不同浓度的粉防己碱联合cGAMP分别处理THP1-Lucia-ISRE及RAW-Lucia-ISRE细胞,荧光素酶报告试验探究IRF3免疫应答水平;Western blot检测cGAS-STING信号通路激活情况;实时荧光定量PCR检测IFN-β、CXCL10及CCL5的mRNA表达水平;ELISA检测IFN-β表达情况。构建稳定表达STING-GFP基因的HeLa细胞(HeLa-STNG-GFP),粉防己碱联合cGAMP处理该细胞后,观察STING-GFP点聚集现象。Ⅰ型疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染THP1-Lucia-ISG细胞,粉防己碱联合cGAMP处理细胞,Western blot及荧光强度探究粉防己碱的抗病毒能力。结果粉防己碱能够增强cGAMP介导的IRF3免疫应答,与cGAMP联用可激活cGAS-STING信号通路。粉防己碱联合cGAMP处理HeLa-STNG-GFP细胞后,观察到明显的STING-GFP点聚集现象。对感染HSV-1的THP1-Lucia-ISG细胞进行粉防己碱联合cGAMP孵育,HSV-1病毒滴度、HSV-糖蛋白D/UL30的表达及HSV-GFP荧光强度均显著下降。结论粉防己碱联合cGAMP可激活cGAS-STING信号通路从而增强宿主的抗病毒反应。
- 王志文张亚明解智慧
- 关键词：粉防己碱
- ALT、AST、ALP、γ-GT组合实验室检验结果分析在各类肝胆疾病诊断中的临床价值被引量：2
- 2018年
- 目的 研究在各类肝胆疾病的诊断中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)与γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)组合实验室检验结果的应用价值。方法 选取2016年3月至2018年2月该院收治的肝胆疾病患者210例,以不同疾病类型分为A组(急性黄疸性肝炎)、B组(慢性活动性肝炎)、C组(肝硬化)、D组(重症肝炎)、E组(肝癌)、F组(慢性迁延性肝炎)、G组(急性胆道疾病),每组30例。另选取同期健康体检者30例作为对照组。对各组研究对象均进行ALT、AST、ALP与γ-GT组合实验室检验,综合分析各组研究对象检验结果,并对其进行比较。结果 A^G组患者ALT、γ-GT、AST、ALP水平均明显高于对照组,A、B、D组患者AST、ALT水平均明显高于对照组,C、E、G组患者γ-GT、ALP水平均明显高于对照组,F组患者ALP、ALP水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 通过检测ALT、AST、ALP与γ-GT能为各类肝胆疾病患者病情的诊断提供重要参考。
- 王志文
- 关键词：肝胆疾病
- 噬菌体抗体库构建和筛选技术及应用研究进展被引量：5
- 2015年
- 噬菌体抗体库技术是由噬菌体展示技术发展而来的一项新型抗体制备技术。通过噬菌体表面表达技术,将抗体分子Fab段基因或Fv基因通过与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或蛋白Ⅷ基因连接以融合蛋白的形式表达在噬菌体表面,从而形成噬菌体抗体。继1988年Parmley等首次阐明噬菌体表面表达技术以来,抗体分子是噬菌体表面表达的第一个具有天然蛋白质功能的蛋白质分子。
- 王志文陈昌杰
- 关键词：噬菌体噬菌体抗体库小分子抗体
- 人源性抗乳腺癌HER2噬菌体单链抗体库的构建与筛选被引量：1
- 2014年
- 目的：构建人源性抗乳腺癌噬菌体单链抗体（scFv）库，筛选和鉴定抗乳腺癌人类表皮生长因子受体2（HER2）特异性scFv，为HER2和CXC趋化因子受体4（CXCR4）双靶向融合蛋白的研制提供靶向HER2的高亲和力序列。方法：取已确诊的乳腺癌患者癌旁淋巴组织，提取总RNA；构建可变区基因的T载体库，将重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因与pCANTAB连接肽连接，获得pCANTAB-scFv，电转化感受态大肠杆菌TG1；以M13K07辅助噬菌体进行感染，获噬菌体抗体库；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测筛选后获得的噬菌体抗体活性，以免疫组织化学法检测抗体亲和力，并通过测序进一步鉴定。结果：成功构建大容量pCANTAB-scFv抗体库，获得的scFv长度为750bp，VH和VL长度分别为375和330kb；电转化大肠杆菌TG1后酶切验证插入片段大小正确，得到库容为2．48×10^8的大容量抗体库；通过噬菌体展示和淘洗筛选，富集针对乳腺癌细胞株SKBR-3表面抗原的抗体库；所得抗体对HER2有高度的亲和力和特异性，对乳腺癌组织HER2抗原也具有较高的亲和力；测序结果与人IgG抗体进行对比，所获得的scFv具有高度的人源性。结论：主要构建了大容量人源性抗乳腺癌细胞的噬菌体scFv库，并筛选获得可特异性识别人乳腺癌HER2的高亲和力scFv，为制备以HER2为靶点的抗肿瘤HER2和CXCR4双靶向融合蛋白提供了载体。
- 卢晓辉王志文蔡颖黄静朱丽华杨清玲陈昌杰
- 关键词：基因文库
