王娉 作品数:81 被引量:248 H指数:9 供职机构: 中国检验检疫科学研究院 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 质检公益性行业科研专项项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 农业科学 理学 更多>>
检测克罗诺杆菌的引物对、探针和方法 本发明涉及用于快速检测克罗诺杆菌属细菌的寡核苷酸引物对及探针以及包含所述引物对和探针的试剂盒。本发明涉及利用所述引物对和探针或试剂盒快速检测克罗诺杆菌属细菌的实时荧光PCR方法。本发明还涉及所述引物对和探针或试剂盒在检测... 陈颖 王娉 胡玥 田雪 杨海荣 赵勇胜 赵贵明 刘洋文献传递 克罗诺杆菌种间鉴定recN基因方法建立 被引量:4 2015年 目的建立一种基于重组和修复蛋白基因(recN)的克罗诺杆菌种间鉴定方法,将不同来源的克罗诺杆菌分离株鉴定到种。方法扩增recN基因全长序列,选取不同长度的recN基因片段,用MEGA 4.0软件对克罗诺杆菌8个参考菌株进行聚类分析,确定克罗诺杆菌种间鉴定可信度高、序列较短的片段;设计并合成该片段的引物,以8株参考菌株作为参照,构建44株克罗诺杆菌实验菌株的聚类分析图,并用生化反应鉴定对聚类结果进行佐证。结果基于recN基因上一段640 bp的片段可对克罗诺杆菌不同种的菌株进行区分;以8株参考菌株在聚类图上的位置作为参考,根据遗传距离的远近,44株分离菌中有37株阪崎克罗诺杆菌,3株丙二酸盐阳性克罗诺杆菌,3株苏黎世克罗诺杆菌,1株尤尼沃斯克罗诺杆菌,与生化反应鉴定结果一致。结论该方法与生化鉴定和基于recN全基因方法相比简便快速,PCR扩增后,一次测序反应就可以将克罗诺杆菌鉴定到种。 田雪 王娉 赵勇胜 胡玥 丛苑 陈颖 葛毅强鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法 被引量:1 2011年 建立了一种快速鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。利用金黄色葡萄球菌的特异基因、耐甲氧西林基因和4种肠毒素基因nuc、mecA和sea、sec、sed、see建立6重PCR反应体系,并对PCR体系,引物浓度进行优化。6对PCR引物均能特异地扩出相应的目的基因。对47株金黄色葡萄球菌的检测结果与应用单重PCR鉴定结果完全一致。实验所建立的多重PCR方法能在一个反应体系中鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌,为食品中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了一种有效的检测手段。 王娉 劳华均 胡玥 袁飞 杨海荣 陈颖关键词:金黄色葡萄球菌 多重PCR方法 乳源蜡样芽胞杆菌耐药性、毒力因子检测及分子特征研究 被引量:10 2021年 为了解乳品来源蜡样芽胞杆菌携带的毒力因子、分子特征及耐药性,对2016—2019年分离自乳品的122株蜡样芽胞杆菌,采用纸片扩散法(K-B纸片法)测定了分离株对氯霉素、庆大霉素等9种抗生素的耐药性,使用聚合酶链式反应法检测了菌株携带的毒力因子,同时采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)检测分离株的分子特征。结果表明,122株蜡样芽胞杆菌均对氯霉素、庆大霉素、阿米卡星敏感;对红霉素、克林霉素和环丙沙星的中介率分别为5.74%、4.92%和0.82%,9.84%的菌株对复方新诺明具有耐药性,8.20%的菌株对四环素具有耐药性,4.10%的菌株对利福平具有耐药性。122株蜡样芽孢杆菌都检出了蜡样芽孢杆菌的非溶血型肠毒素基因nheA、nheB及肠毒素FM基因entFM;nheC、bceT、cytK、hblA、hblC、hblD、ces和EM1基因的检出率分别为99.18%、37.70%、31.15%、29.51%、24.59%、8.20%、6.56%和6.56%。122株蜡样芽胞杆菌被分成15簇,未见明显的优势带型。由此可见,2016—2019年收集的蜡样芽胞杆菌乳品分离株携带多种毒力基因,约10%的菌株对复方新诺明、四环素、利福平等具有耐药性,PFGE呈现多种带型,为蜡样芽孢杆菌引起的食源性疾病的预警、预防和治疗提供参考。 郭佳 王娉 王娉 赵晓美 赵晓美 陈颖关键词:乳品 蜡样芽胞杆菌 耐药性 毒力基因 分子分型 一种用于预测乳品中耐药菌耐药基因与宿主对应关系的方法 本发明涉及一种预测乳品中耐药菌耐药基因与宿主对应关系的方法,其包括(1)原料乳预处理;(2)细菌宏基因组DNA提取;(3)Shotgun测序;(4)菌种注释与ARGs注释;(5)ARGs细菌潜在宿主预测等步骤。本发明的预... 陈颖 王娉 梁丽姣 赵晓美 曲天铭 姬庆龙一种基于微滴数字PCR技术的快速检测双歧杆菌Bi-07的引物探针组合及方法 本发明涉及一种用于检测双歧杆菌Bi‑07的引物对及探针。本发明还涉及用于测定双歧杆菌Bi‑07的微滴数字PCR检测方法,所述方法包括使用针对双歧杆菌Bi‑07检测的特异性寡核苷酸引物及探针。本发明还涉及用于双歧杆菌Bi‑... 王娉 陈颖 赵晓美 姬庆龙 赵勇胜 杨海荣一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法 本发明公开了一种对食源致病性气单胞菌菌株的检测和分离方法:包括专用增菌液和显色培养基两部分,增菌液由特殊蛋白胨、胆盐和水组成;显色培养基由蛋白胨、糊精、麦芽糖、甜菜碱、胆盐、氯化钾、碳酸钾、硫酸镁、氨苄青霉素、头孢唑林、... 陈颖 姬庆龙 赵贵明 赵勇胜 王娉 赵晓美 杨海荣基于流式细胞仪技术的快速检测试剂盒在生乳菌落总数检测中的应用 2023年 本研究将市售流式细胞仪技术快速检测试剂盒应用于生乳中菌落总数的检测。通过对不同浓度、不同死/活细菌比的金黄色葡萄球菌菌悬液的流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测,并将检测结果与标准分离分离培养法进行对比,证实了试剂盒染色液对常见微生物的荧光标记能力良好,样品染色液A和染色液B联用可以有效实现对死/活细菌的区分与计数。通过向生乳样品中添加不同浓度金黄色葡萄球菌、不同死/活细菌比例细菌或不同种细菌制备人工污染生乳样品并进行FCM检测,证实了该FCM试剂盒方法能够适用于实际生乳制品菌落总数定量检测与死/活细菌区分计数,且方法稳定性良好,可以应用于实际生乳菌落计数。该试剂盒方法在生乳检测流程上的应用证实了利用FCM法替代传统分离检测法的实际应用可行性,可以为第三方检测机构和乳品企业提供一种更为高效、便捷和准确的流程参考。 赵晓美 王娉 曲天铭 梁丽姣 姬庆龙 陈颖关键词:流式细胞技术 菌落总数 生乳 克罗诺杆菌的随机多态性扩增DNA(RAPD)基因分型研究 被引量:7 2012年 研究了克罗诺杆菌标准菌株和样品中分离菌株的分子特征,为克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源提供一种有效手段。采用随机引物扩增多态性DNA分析对38株菌株进行基因分型。筛选出1条随机引物,每一菌株可扩增出1~7条DNA片段,片段在400-3500bp,可将8株标准菌株的种间区分开来。以相似性50%为标准,38株克罗诺杆菌按照其遗传差异可以分为8个基因型类群。所建立的RAPD技术可用于克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源研究。 杨海荣 赵贵明 王娉 赵勇胜 袁飞 胡玥 陈颖关键词:基因分型 一种用于乳酸菌耐药性测定的通用培养基及其应用 本发明公开了一种用于乳酸菌耐药性测定的通用培养基,其中每1000mL的培养基包括:蛋白胨7~15g,牛肉浸粉3~7g,酵母粉2~4g,葡萄糖15~25g,抗坏血酸棕榈酸酯0.8~1.2g,维生素B6为2.6mg,半胱氨酸... 赵贵明 陈颖 赵勇胜 姬庆龙 王娉 杨海荣