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王卓智

作品数：14 被引量：63H指数：5
供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 13篇期刊文章
  • 1篇科技成果

领域

  • 11篇医药卫生
  • 4篇生物学

主题

  • 8篇抗体
  • 6篇基因
  • 5篇肿瘤
  • 4篇单克隆
  • 4篇克隆
  • 3篇单克隆抗体
  • 3篇人源
  • 3篇胃癌
  • 2篇单抗
  • 2篇蛋白
  • 2篇人源化
  • 2篇生物膜
  • 2篇双特异性
  • 2篇死因
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇球蛋白
  • 2篇肿瘤坏死因子
  • 2篇胃肿瘤
  • 2篇免疫

机构

  • 11篇中国人民解放...
  • 7篇北京医科大学...
  • 5篇北京市肿瘤防...
  • 4篇中国医学科学...
  • 2篇北京医科大学
  • 2篇中国医学科学...
  • 2篇中国医学科学...

作者

  • 14篇王卓智
  • 12篇王琰
  • 8篇朱迎春
  • 7篇李竞
  • 7篇董志伟
  • 6篇陈宇萍
  • 6篇刘群英
  • 3篇化冰
  • 3篇化冰
  • 2篇王欲晓
  • 2篇聂松青
  • 2篇高荣凯
  • 1篇林克椿
  • 1篇王刚
  • 1篇张海荣
  • 1篇乔媛媛
  • 1篇陈晓穗
  • 1篇王雅明
  • 1篇刘晓琳
  • 1篇骆训懿

传媒

  • 6篇中华微生物学...
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇生理科学进展
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇生物化学杂志
  • 1篇中华医学检验...
  • 1篇北京医科大学...

年份

  • 1篇2007
  • 4篇1999
  • 5篇1998
  • 2篇1997
  • 2篇1994
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
抗胃癌单抗3H11可变区氨基端序列对抗体活性的影响被引量：5
1999年
采用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 方法， 利用第一骨架区通用引物扩增重链 Ｆｄ 段和κ链的基因， 克隆到 Ｆａｂ 表达载体中， 在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性． 根据已克隆的３ Ｈ１１ Ｖ Ｌ、 Ｖ Ｈ 的真实序列， 重新设计κ链及 Ｆｄ 段５′端引物， 分别将骨架区引物在κ链及 Ｆｄ 段５′端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列， 构建分别含有矫正后κ链或矫正后 Ｆｄ 以及二个链均得到矫正的 Ｆａｂ 表达载体， 这些载体在大肠杆菌中均获得类似水平的表达， 对任何一个链的矫正均可部分恢复 Ｆａｂ 段胃癌细胞的结合活性． 结果说明在构建小分子抗体时， Ｐ Ｃ Ｒ 引物引入的轻。
李竞王琰王卓智刘群英化冰陈宇萍朱迎春董志伟
关键词：免疫球蛋白可变区基因单克隆抗体
抗原表位定向选择的人源抗TNF-α Fab的鉴定被引量：4
1999年
目的对通过抗原表位定向选择技术（ＥＧＳ）所筛选到的２株人源化ＴＮＦ－α抗体Ｆａｂ段进行分析鉴定。方法测定可变区基因的序列，用亲本鼠单抗Ｚ８进行竞争ＥＬＩＳＡ，用Ｌ９２９细胞检测其体外中和ＴＮＦ－α的活性，并用硫氰酸铵洗脱法比较与亲本鼠单抗的亲和力。结果基因测序表明２株抗体ＶＨ相同，属人ＶＨⅠ亚群；Ｖκ分别属人ＶκⅠ、ＶκⅢ亚群；竞争抑制实验表明所获人源抗体片段与亲本鼠源抗体是针对ＴＮＦ－α的同一抗原表位；体外中和实验证明此抗体片段能中和ＴＮＦ－α对Ｌ９２９细胞的毒性；该抗体片段的亲和力略低于原鼠单抗Ｚ８。
王卓智王琰李竞刘群英化冰陈宇萍朱迎春李振甫董志伟
关键词：肿瘤坏死因子EGS
抗人TNF-α单抗基因的克隆及鉴定被引量：3
1999年
目的克隆抗人ＴＮＦ－α鼠单抗得可变区基因以构建人－鼠嵌合抗体表达载体。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，以前导肽序列的引物从１个分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆抗体轻链、重链可变区基因（Ｖκ，ＶＨ），在大肠杆菌中表达Ｆａｂ段核实其功能活性。结果分别得到了２个Ｖκ和２个ＶＨ基因。ＤＮＡ序列测定表明，其中１个轻链可变区基因为骨髓瘤细胞系中固有的无功能基因。１个重链可变区基因经原核系统表达测活表明无抗体活性。另一个轻链和重链可变区基因的成熟蛋白编码部分与从第一骨架区引物所克隆的、可在大肠杆菌表达出抗体活性的Ｖκ、ＶＨ序列相符。将该轻链、重链基因分别克隆到了人－鼠嵌合轻链、重链表达载体中。结论通过原核表达系统核实。
骆训懿王琰王欲晓王卓智
关键词：人TNF-Α基因单克隆抗体
紫外线照射清除聚合酶链反应的污染被引量：4
1997年
紫外线照射清除聚合酶链反应的污染王卓智王琰李振甫董志伟聚合酶链反应（ＰＣＲ）用于临床检测肿瘤、病毒、支原体、衣原体和细菌，具有极高的灵敏度，但ＰＣＲ扩增体系又很容易被污染，产生假阳性。利用紫外线照射可以清除ＰＣＲ污染，其原理是紫外线能诱导ＤＮＡ上相邻...
王卓智王琰李振甫董志伟
关键词：聚合酶链反应污染紫外线照射
TNF-α单抗Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达被引量：6
1998年
目的进行ＴＮＦ－α单抗Ｆａｂ段基因的克隆并在大肠杆菌中表达。方法用逆转录－聚合酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）从分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆重链Ｆｄ段和κ链基因；并用ＥＬＩＳＡ和免疫印迹分析证明表达的Ｆａｂ段特异结合ＴＮＦ－α。结果从分泌抗人ＴＮＦ－α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆出了重链Ｆｄ段和κ基因。经ＤＮＡ序列测定表明，ＶＨ、Ｄ、ＪＨ分别属于ＶＨ３Ｄ、ＤＳＰ２和ＪＨ４；Ｖκ和Ｊκ分别属于Ｖκ１和Ｊκ１。将该Ｆｄ和κ链ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＣｏｍｂ３Ｈ中，在大肠杆菌中获得了表达。结论ＥＬＩＳＡ和免疫印迹分析表明，表达的Ｆａｂ段可特异地和ＴＮＦ－α结合。
王卓智王卓智王琰王力民董志伟
关键词：肿瘤坏死因子
膜融合与脂的多形性被引量：1
1994年
膜融合是生物细胞在完成其功能时非常重要的生理现象，它受多种因素如ｐＨ、Ｃａ￣（２＋）、磷脂组成及多肽等的影响，有关膜融合分子机理的研究日益受到生物膜研究工作者的重视，本文较详细地介绍脂多型性、影响脂多型性的因素以及其在膜融合中作用的分子机理。
聂松青王卓智
关键词：生物膜膜融合脂类多形性
抗胃癌鼠单抗3H11 scFv的包含体表达及柱上在位复性被引量：5
1998年
目的：在大肠杆菌高效表达抗胃癌单抗３Ｈ１１的ｓｃＦｖ。方法：利用ＰＣＲ技术将３Ｈ１１ｓｃＦｖ基因从分泌型表达载体转移至高效表达载体，获得３Ｈ１１ｓｃＦｖ包含体的表达，经超声裂解、洗涤、变性后，尝试透析复性和凝胶过滤色谱柱上在位复性，结果：透析复性未能得到有活性的３Ｈ１１ｓｃＦｖ，而柱上在位复性效果良好，获得有功能性的３Ｈ１１ｓｃＦｖ。结论：成功进行了３Ｈ１１ｓｃＦｖ的柱上复性，不同ｓｃＦｖ在表达和复性中显示出明显差异，在基因工程抗体研制中值得注意。
李竞王琰王卓智朱迎春董志伟
关键词：胃肿瘤基因转移
抗胃癌鼠单抗3H11 Fab段载体的构建、表达及抗体活性检测被引量：6
1999年
目的构建和表达抗胃癌鼠单抗３Ｈ１１的Ｆａｂ段小分子抗体。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ方法，利用第一骨架区通用引物扩增重链Ｆｄ段和κ链的基因，克隆到Ｆａｂ表达载体中。并根据已克隆的３Ｈ１１ＶＬ的真实序列，重新设计κ链５’端引物，将骨架区引物在κ链５’端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列，再次构建Ｆａｂ表达载体。结果利用第一骨架区通用引物构建的Ｆａｂ在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性，将骨架区引物在κ链５’端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列后，在大肠杆菌中表达出了可与抗原ＭＧＣ８０３细胞结合的Ｆａｂ段。结论在构建小分子抗体时，ＰＣＲ引物引入的氨基酸残基的改变可影响所表达抗体的活性。
李竞王琰王卓智董志伟
关键词：单克隆抗体肿瘤抗体免疫球蛋白胃癌
人源化和人源抗体制备的研究
王琰陈晓穗周丽君王刚王卓智李竞乔媛媛刘晓琳王欲晓张海荣白银朱迎春
该研究旨在建立人源或人源化抗体的制备技术。克隆了多种鼠单抗的可变区基因，并在大肠杆菌获得功能性表达；构建了以上相应的多种人-鼠嵌合抗体并在真核细胞成功表达；建立了抗原表位定向选择法对鼠单抗进行人源化的技术，并进一步建立了...
关键词：
关键词：人源化人源抗体单克隆基因文库
pH降低和短杆菌肽D诱发的PE脂质体融合
1994年
ｐＨ降低和短杆菌肽Ｄ诱发的ＰＥ脂质体融合王卓智，聂松青，林克椿（北京医科大学生物物理教研室，北京１０００８３）生物膜的融合是其在执行生理功能时的一种重要现象，如精子与卵子的融合，吞噬细胞形成吞噬体，出胞和入胞，以及病毒感染细胞等，都经历膜融合过程，此...
王卓智聂松青林克椿
关键词：PH值短杆菌肽生物膜
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