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钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的原核表达及纯化被引量：3: 2013年; 目的原核表达并纯化钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)。方法利用PCR技术扩增钝顶螺旋藻sod基因,克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-sod,转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。表达的重组融合蛋白SOD-GST利用蛋白纯化树脂Glutathione SepharoseTM4 Fast Flow纯化后,采用改进的邻苯三酚自氧化法测定重组SOD的活性。结果重组表达质粒pGEX-4T-sod经双酶切和测序证实构建正确;表达的融合蛋白SOD-GST的相对分子质量约为49 000,表达量占菌体总蛋白的30.2%,在重组菌裂解上清和沉淀中均有融合蛋白的表达;纯化的融合蛋白纯度为82.4%,浓度为2.8 mg/ml,从可溶性表达产物中纯化的酶的比活性为1 440 U/mg。结论在大肠埃希菌中成功表达并纯化了具有生物学活性的钝顶螺旋藻SOD,为其产业化生产奠定了基础。; 赫慧琛姜晓杰高金亮徐萌杰王英王文杰李炜祁美荣; 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶原核细胞基因表达纯化

钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白α、β亚基基因的克隆及其原核表达被引量：2: 2015年; 目的克隆钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)α、β亚基的基因序列,分别构建该蛋白的α和β亚基的原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达。方法 PCR扩增钝顶螺旋藻APC基因(apc)序列,克隆至p GEM-T easy载体中,测序分析插入片段的正确性。以克隆的apc基因为模板,分别扩增APC的α和β亚基的编码基因apc A和apc B,测序分析正确后,分别克隆入表达载体p GEX-4T-1中,构建重组质粒p GEX-4T-apc A和p GEX-4T-apc B。将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞中,IPTG诱导表达,表达产物经Glutathione Sepharose TM 4Fast Flow树脂纯化,Bradford法测定纯化蛋白的浓度。结果成功克隆了钝顶螺旋藻的APCα和β亚基的编码基因apc A和apc B,构建的重组质粒经测序证明构建正确,表达的融合蛋白α-APC-GST和β-APC-GST的相对分子质量均为43 000,其中α-APC-GST主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的32.1%,纯化后的蛋白纯度达85%,蛋白浓度为0.3 mg/ml;β-APC-GST主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的31.4%,纯化后的蛋白纯度达65.4%,蛋白浓度为0.1 mg/ml。结论已成功克隆并在大肠埃希菌中表达了钝顶螺旋藻APC的α和β亚基。; 姜晓杰高金亮祁美荣徐萌杰王文杰李炜; 关键词：钝顶螺旋藻基因原核表达

鄂尔多斯市2013年手足口病实验室检测结果分析: 2017年; 目的对手足口病(HFMD)进行病原学监测,了解鄂尔多斯市HFMD的流行特征。方法收集2013年鄂尔多斯市手足口病临床诊断病例257份,采用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)对肠道病毒通用性(EV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)进行了特异性RNA检测。结果 257份手足口患者标本中,EV71阳性率34.6%(89/257),CoxA16阳性率23.7%(61/257)。5岁以下儿童肠道病毒感染病例占所有感染者的84.9%(146/172),男女性别构成比为1.16:1。结论鄂尔多斯市2013年手足口病病原主要以EV71为主,并且有其它型的肠道病毒出现,5岁以下的儿童是肠道病毒感染的高危人群。; 冀林立祁美荣李炜徐萌杰; 关键词：手足口病 EV71 COXA16

2009年-2015年鄂尔多斯市流感监测结果分析被引量：9: 2016年; 目的通过对鄂尔多斯市2009年-2015年流感监测结果分析,探寻流感流行趋势和变化规律,为流感防控工作提供有力的科学依据。方法采用real-time PCR方法对该市国家级流感监测哨点医院送检的咽拭子监测样本进行流感病毒核酸检测分析。结果 2009年-2015年共检测样本2 619份,检出流感病毒核酸阳性310份,总阳性率为11.84%。其中乙型129份（41.61%）,季节性H3亚型83份（26.77%）,新甲型H1N1亚型82份（26.45%）,季节性H1亚型1份（0.32%）,其余15份为甲型未分型。流感流行曲线以冬春峰为主,发病年龄构成以0岁~5岁年龄组人群为主。结论 2009年-2015年鄂尔多斯市流感在冬季、春季高发,新甲型H1N1亚型、季节性H3亚型和乙型流感病毒株交替成为流行优势毒株。进一步加强对疑似流感样病例的监测分析,可快速确定流行病毒株,实时监测变异病毒株,精准定位疫苗病毒株,为预防流感暴发流行和决策流感疫情防控等工作提供重要依据。; 徐萌杰祁美荣李炜杨春燕张迪冀林立; 关键词：流感实时荧光定量PCR

鄂尔多斯市牧区住宿生营养调查: 为了评价鄂尔多斯市牧区中小学生的营养状况，为科学地指导学生营养和保健工作提供依据，某中心食品与环境卫生科于2002年3月5日对旗下俩所中小学蒙古族住宿生进行了连续5天的膳食营养调查，采取了整群抽样方法，对抽取的264名住...; 郭浩楠赵秋月白东浩李炜; 关键词：膳食结构营养素摄入量健康教育; 文献传递

钝顶螺旋藻sod基因真核表达载体的构建与表达被引量：1: 2014年; 目的:在毕赤酵母中表达钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶SOD。方法:以质粒p ET30-sod为模板,采用PCR扩增sod基因,并将其与表达载体p PIC9K相连,构建重组表达质粒p PIC9K-sod。将重组质粒p PIC9K-sod用限制性内切酶PmeⅠ线性化,并电转化入毕赤酵母GS115。利用单菌落PCR筛选整合有重组质粒的阳性转化子,用甲醇进行诱导表达,并在5L发酵罐内进行发酵表达目的蛋白。用改进的邻苯三酚自氧化法测定重组SOD的活性。结果:成功构建了钝顶螺旋藻的sod的真核表达载体,并在毕赤酵母中表达了分子量为22k Da的重组蛋白SOD。发酵罐高密度发酵所获目的蛋白的平均浓度为0.36±0.4 mg/m L,比活性为409±17U/mg。结论:在毕赤酵母中表达了分子量为22k Da的钝顶螺旋藻SOD。; 姜晓杰王文杰高金亮李炜祁美荣; 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(SOD)毕赤酵母发酵

钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的原核表达: 目的：构建钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体并在大肠杆菌内表达螺旋藻SOD. 方法：利用PCR技术扩增钝顶螺旋藻的sod基因,将此基因克隆入表达载体pGEX--4T-1,获得重组质粒pGEX-4T...; 高金亮王文杰姜晓杰李炜祁美荣; 关键词：钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶原核表达; 文献传递

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李炜