李志鹏
- 作品数：30 被引量：24H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 乳腺特异性表达轮状病毒VP6基因的初步研究
- 引言/目的人A组轮状病毒是引起婴幼儿重症腹泻的主要原因之一。接种疫苗降低感染率是减少轮状病毒危害最有效的方法,轮状病毒疫苗被世界卫生组织列为优先发展疫苗。轮状病毒第6个基因编码的VP6蛋白在轮状病毒各血清组中具有共同的抗...
- 李志鹏张海航刘福航石德顺刘庆友
- 一种基于全基因组SNP信息追溯水牛血统来源以及进行基因组选配的方法
- 本发明提供一种基于全基因组SNP信息追溯水牛血统来源以及基因组选配的方法，包括以下步骤：从待血统测验的水牛个体中提取DNA并测序，通过从数据库中下载世界主要水牛品种的二代测序数据，得到基因组SNP的基因型信息；将基因组S...
- 刘庆友罗西尔阮珏石德顺周宇崔奎青李志鹏李辉冯彤王晓波
- 文献传递
- 乳腺特异性表达轮状病毒VP6基因的初步研究
- ＜正＞引言/目的人A组轮状病毒是引起婴幼儿重症腹泻的主要原因之一。接种疫苗降低感染率是减少轮状病毒危害最有效的方法,轮状病毒疫苗被世界卫生组织列为优先发展疫苗。轮状病毒第6个基因编码的VP6蛋白在轮状病毒各血清组中具有共...
- 李志鹏张海航刘福航石德顺刘庆友
- 抗HER2人鼠嵌合单克隆抗体载体构建及功能验证
- 引言/目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其中HER2阳性者占20%。HER2基因高表达为判断上述肿瘤恶性程度的独立预后指标。作为肿瘤抗原,HER2是一个理想的肿瘤治疗靶点。美国罗氏公司应用体外培养的动物细胞表达生产的...
- 张海航李志鹏陈忠毅刘福航崔奎青石德顺刘庆友
- 一种固定水牛采血并同时称重的装置
- 本实用新型公开了一种固定水牛采血并同时称重的装置，涉及牲畜养殖技术领域。包括基板、斜板和检测桩，所述基板的前侧设置有斜板，所述基板的左侧设置有检测桩，所述基板的上表面开设有活动槽，所述活动槽的内部滑动连接有踏板，所述踏板...
- 刘庆友李志鹏崔奎青罗西尔覃朝斌羊玉凤
- 文献传递
- 甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理对德保猪手工克隆胚胎体外发育潜能的影响被引量：3
- 2014年
- 供体细胞的不完全重编程是动物克隆效率低的主要原因。本研究采用不同浓度(0.00(对照)、0.25、0.50和1.00μmol·L^(-1))的DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理德保猪耳成纤维细胞,将处理后成纤维细胞作供体进行手工克隆。结果显示:各处理组细胞生长曲线均呈"S"型,其中0.25μmol·L^(-1)组细胞生长曲线与对照组最相近。随着5-Aza-CdR浓度增加,细胞均有不同程度的畸变、生长抑制甚至致死。0.00~0.50μmol·L^(-1)5-Aza-CdR处理对德保猪成纤维细胞不会显著改变其细胞染色体整倍性。5-Aza-CdR不同程度下调了德保猪耳成纤维细胞中Dnmtl、Tet1、Tet2和Tet3的相对表达,对Dnmt1、Tet1和Tet3表达量的下调呈剂量相关。以处理后成纤维细胞作供体,猪手工克隆重构胚体外发育的卵裂率(24、48 h)和桑椹胚率各组间差异不显著(P>0.05),其中0.25μmol·L^(-1)组和0.50μmol·L^(-1)组囊胚发育率显著高于1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与对照组差异不显著(P>0.05)。0.50μmol·L^(-1)组囊胚细胞数显著高于对照组和1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与0.25μmol·L^(-1)组之间差异不显著(P>0.05)。综上表明:高浓度5-Aza-CdR对德保猪成纤维细胞增殖和染色体具有副作用,低浓度(≤0.25μmol·L^(-1))的5-Aza-CdR可用于供体处理以降低克隆胚胎甲基化水平及提高手工克隆猪胚胎发育潜能。
- 陆杏蓉孙俊铭李志鹏李兰玉谢炳坤刘庆友石德顺崔奎青
- 关键词：5-AZA-CDR重编程
- 乳腺特异性表达人Amylin基因载体、转基因动物的构建方法及应用
- 本发明提供乳腺特异性表达人Amylin基因载体，还提供乳腺特异性表达人Amylin基因转基因动物及其应用。本发明利用β‑酪蛋白启动子启动人Amylin基因，构建了乳腺特异性表达人Amylin基因载体，并将该载体转入动物基...
- 刘庆友黄孔威李志鹏崔奎青石德顺刘福航赵海潞张晓溪
- 文献传递
- 铁蛋白Ferritin原核表达和纯化及纳米颗粒胞外自组装被引量：3
- 2018年
- 旨在使用原核表达系统表达幽门螺杆菌铁蛋白Ferritin,获得具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,从而通过表面修饰等方法应用于疾病治疗和抗原呈递等研究。将铁蛋白氨基酸序列按照大肠杆菌常用密码子进行优化,合成重组铁蛋白基因并克隆至原核表达载体。使用镍柱进行亲和层析纯化重组蛋白,并在透析复性后利用透射电子显微镜对体外自组装纳米颗粒进行鉴定。结果显示,本研究成功构建了pET-32a-Ferritin原核表达载体,并使用IPTG进行诱导表达获得His-Ferritin重组铁蛋白,且主要以包涵体形式存在。通过镍柱进行亲和层析纯化获得纯度为96%的重组蛋白,使用脱盐柱将重组蛋白梯度透析至2mol·L-1尿素缓冲液中进行复性后,使用电子显微镜观察胞外自组装重组蛋白为粒径在12~20nm的均一的纳米结构,与天然铁蛋白纳米粒子类似。本研究成功建立了Ferritin蛋白原核表达体系,通过诱导表达、亲和层析纯化及复性获得了具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,为其在生物医药领域的应用奠定基础。
- 李志鹏刘福航崔奎青石德顺刘庆友
- 关键词：铁蛋白原核表达
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对猪手工克隆胚胎发育潜力的研究
- 引言/目的组蛋白乙酰化是表观遗传修饰的重要组成部分,但不同组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胚胎发育有不同效果。本研究旨在探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)对猪手工...
- 孙俊铭崔奎青李志鹏刘庆友石德顺
- SAHA处理对猪手工克隆胚胎体外发育潜能的影响被引量：1
- 2018年
- 为了探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸（SAHA）对德保猪手工克隆胚胎（HMC）发育潜能的影响,试验摸索SAHA的适宜处理浓度[0（对照）,1.0,2.5,5.0,7.5,10.0μmol/L]和时间（0,6,12,24 h）;之后分为4组,SAHA组、体外受精（IVF）组、孤雌激活（PA）组、对照（HMCC）组,分别在体外发育的1细胞期、2细胞期、4细胞期、囊胚期收集胚胎,在相同时期下比较各组胚胎组蛋白H4K8乙酰化（Ac H4K8）水平差异和相关基因（HDAC1、HAT1、ASF1A、OCT-4）相对表达量。结果表明：7.5μmol/L SAHA处理囊胚率显著高于对照（P〈0.05）,12 h囊胚率显著高于0 h（P〈0.05）;所以适宜处理浓度为7.5μmol/L,适宜处理时间为12 h。在1细胞期、2细胞期、囊胚期,SAHA组Ac H4K8水平接近IVF组水平（P〉0.05）。在囊胚期,SAHA组HDAC1基因相对表达量接近IVF组（P〉0.05）;在囊胚期,SAHA组OCT-4基因相对表达量接近IVF组（P〉0.05）。说明SAHA可以使HMC胚胎Ac H4K8水平接近IVF水平,并纠正克隆胚胎乙酰化的异常,从而提高克隆胚胎发育潜能。
- 孙俊铭崔奎青李志鹏陆杏蓉许钟峯刘庆友黄奔石德顺
- 关键词：组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶抑制剂
