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孙俊铭: 作品数：18 被引量：16H指数：2; 供职机构：广西壮族自治区畜牧研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生艺术更多>>

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VPA处理对猪手工克隆重构胚体外发育潜能的影响: 表观遗传修饰可以影响体细胞核移植的重编程效率和重构胚的发育潜能,目前研究比较多的表观遗传修饰之一是组蛋白乙酰化,组蛋白富含带有正电荷的赖氨酸,组蛋白高乙酰化可以降低DNA和组蛋白的结合,使转录调控因子等更容易进入核小体,...; 陆杏蓉吕玲燕孙俊铭谢炳坤刘庆友石德顺崔奎青; 关键词：VPA 发育潜能

手工克隆程序中供-受体细胞粘合方式的改进方法: 本发明公开了手工克隆程序中供‑受体细胞粘合方式的改进方法，先用植物凝集素(PHA)把去核半卵和供体细胞粘合，形成半卵‑供体细胞配对体；然后再用另一个去核半卵与配对体粘合，形成卵‑供体‑卵式的粘合体(形成三角状)，移入电融...; 吕玲燕滕少花陆杏蓉孙俊铭周晓情汪燕玲孙如玉张家庆关志惠王献伟; 文献传递

不同去核方法对猪手工克隆重构胚发育效果的影响: 2015年; 为探讨不同去核方法对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响,本研究比较了盲切法,第一极体(Pb1)定位法及脱羰秋水仙碱(DM)辅助去核法3种不同的去核方法的去核效率及HMC胚胎发育的影响。结果表明:第一极体定位法和DM辅助去核法的整体去核效率显著高于盲切法去核法(P<0.05);应用0.4μg/m L DM处理卵母细胞60 min的突起率、整体去核效率显著高于其他浓度和时间处理组(P<0.05);DM辅助去核与pb1定位去核法2种不同去核方法对HMC重构胚的发育效果的影响差异不显著。本研究表明,添加适量的DM可以提高徒手克隆去核效率,且对后期重构胚发育没有显著影响。; 吕玲燕陆杏蓉孙俊铭潘翠玲崔奎青谢炳坤; 关键词：去核方法

猪卵母细胞电激活方法初探: 2012年; 本实验比较了已报道的4组常用的猪卵母细胞电激活方法,并对电激活参数进行系统探索。结果表明:电激活参数(125 V/mm,80μs,1 DC),激活液0.3 mol/L甘露醇+0.1 mmol/L MgSO4+0.1 mmmol/L CaCl2+0.01%PVA的激活方案,囊胚发育率显著优于其他3组方案(25.6%vs 12.6%vs 21.5%vs 15.2,P<0.05);脉冲电压100 V/mm时3次脉冲激活组囊胚发育率优于2次和1次脉冲组(27.3%vs 16.2%vs 21.7%,P<0.05);激活液中Ca2+浓度(0.1%,0.05%)对激活效果无显著影响,囊胚发育率分别为36.5%和40.9%;本实验结果中电激活效果明显优于化学激活(46.3%vs 29.4%,P<0.05)。通过上述实验本研究建立了一种优化的猪卵母细胞电激活方法,为生产单精子显微注射与体细胞核移植猪奠定了基础。; 刘帅吕玲燕孙俊铭刘庆友石德顺崔奎青; 关键词：卵母细胞电激活

DNA甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR对多能基因及甲基化相关基因在徒手克隆胚胎中表达模式的影响被引量：2: 2016年; 本试验通过实时荧光定量PCR方法对多能基因Oct4和Nanog及DNA甲基化相关基因Dnmt1和Tets在徒手克隆(handmade cloning,HMC)胚胎中的表达模式进行初步研究,并探讨5-Aza-CdR处理重构胚对这些基因表达模式的影响。结果显示,Oct4、Nanog和Tet3的表达在2细胞时期达到顶峰,Dnmt1和Tet2基因的表达随HMC胚胎发育而下降,而Tet1基因随HMC胚胎发育表达上升。使用5-Aza-CdR处理重构胚没有改变Oct4、Tet1和Tet3基因的表达模式,使Nanog基因在胚胎发育初期表达增加,Dnmt1和Tet2基因在胚胎发育初期表达降低。研究初步确立了Oct4、Nanog、Dnmt1和Tets基因在HMC胚胎的表达模式,5-Aza-CdR对重构胚的处理可对HMC胚胎的甲基化模式产生影响。; 陆杏蓉李志鹏孙俊铭吕玲燕许钟峯刘庆友石德顺崔奎青; 关键词：5-AZA-CDR 基因

甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理对德保猪手工克隆胚胎体外发育潜能的影响被引量：3: 2014年; 供体细胞的不完全重编程是动物克隆效率低的主要原因。本研究采用不同浓度(0.00(对照)、0.25、0.50和1.00μmol·L^(-1))的DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理德保猪耳成纤维细胞,将处理后成纤维细胞作供体进行手工克隆。结果显示:各处理组细胞生长曲线均呈"S"型,其中0.25μmol·L^(-1)组细胞生长曲线与对照组最相近。随着5-Aza-CdR浓度增加,细胞均有不同程度的畸变、生长抑制甚至致死。0.00~0.50μmol·L^(-1)5-Aza-CdR处理对德保猪成纤维细胞不会显著改变其细胞染色体整倍性。5-Aza-CdR不同程度下调了德保猪耳成纤维细胞中Dnmtl、Tet1、Tet2和Tet3的相对表达,对Dnmt1、Tet1和Tet3表达量的下调呈剂量相关。以处理后成纤维细胞作供体,猪手工克隆重构胚体外发育的卵裂率(24、48 h)和桑椹胚率各组间差异不显著(P>0.05),其中0.25μmol·L^(-1)组和0.50μmol·L^(-1)组囊胚发育率显著高于1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与对照组差异不显著(P>0.05)。0.50μmol·L^(-1)组囊胚细胞数显著高于对照组和1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与0.25μmol·L^(-1)组之间差异不显著(P>0.05)。综上表明:高浓度5-Aza-CdR对德保猪成纤维细胞增殖和染色体具有副作用,低浓度(≤0.25μmol·L^(-1))的5-Aza-CdR可用于供体处理以降低克隆胚胎甲基化水平及提高手工克隆猪胚胎发育潜能。; 陆杏蓉孙俊铭李志鹏李兰玉谢炳坤刘庆友石德顺崔奎青; 关键词：5-AZA-CDR 重编程

芒果甙在促进动物卵母细胞成熟方面的应用: 本发明涉及胚胎工程技术领域，具体是芒果甙在促进动物卵母细胞成熟方面的应用。本发明公开了芒果甙可以促进动物卵母细胞成熟，尤其是猪的卵母细胞成熟；可以提高卵母细胞体外成熟效率；可以降低卵母细胞的凋亡比率，提高卵母细胞后续的发...; 廖晓光吕玲燕袁朝原杨楷方治山胡湘云吴强姚娜罗翔周俊华吴亮韦京城曹慧慧张家庆王献伟刘庆友崔奎青孙俊铭粟小平杨桂芳

丙戊酸处理对猪手工克隆重构胚体外发育潜能的影响: 2014年; 为探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对猪手工克隆(HMC)胚胎发育潜能的影响,本研究比较了不同浓度(0、25、50、75和100nmol/L)VPA处理猪HMC重构胚对后期胚胎发育率、内细胞团数和组蛋白乙酰化程度的影响。结果表明,50、75nmol/L VPA处理组HMC重构胚的卵裂率和囊胚发育率均显著高于0、25和100nmol/L VPA处理组(P<0.05);与0、25、75和100nmol/L相比,50nmol/L VPA处理组能显著提高囊胚内细胞团细胞数(P<0.05),囊胚阶段VPA处理组的组蛋白H3K14乙酰化(AcH3K14)水平高于空白组和孤雌激活囊胚。因此,应用VPA处理可提高猪HMC重构胚胎分裂率、囊胚率及增加内细胞团细胞数,提高了猪HMC胚胎的体外发育潜能。; 谢炳坤吕玲燕陆杏蓉崔奎青孙俊铭覃兆鲜石德顺刘庆友; 关键词：丙戊酸发育潜能

猪无透明带卵母细胞孤雌激活培养体系的优化: 2015年; 为了探讨猪无透明带卵母细胞孤雌激活培养体系,为手工克隆法生产小猪奠定理论和实验基础,本研究比较了不同浓度链霉蛋白酶对猪卵母细胞透明带的消化率及后期发育的卵裂率;比较了不同电激活参数对无透明带卵母细胞激活效率的影响,并探索了最适宜容纳孤雌激活胚胎的微穴大小。结果表明:2 mg/m L链霉蛋白酶能得到最高的消化率及后期发育的卵裂率;最佳电激活参数为:70 V/mm电压,80滋s脉冲时间,2次脉冲;较适宜容纳孤雌激活胚胎的微穴大小为:底部直径约为l20μm,深度约为150μm。; 吕玲燕孙俊铭陆杏蓉潘翠玲关志惠潘天彪谢炳坤; 关键词：孤雌激活

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对猪手工克隆胚胎发育潜力的研究: 引言/目的组蛋白乙酰化是表观遗传修饰的重要组成部分,但不同组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胚胎发育有不同效果。本研究旨在探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)对猪手工...; 孙俊铭崔奎青李志鹏刘庆友石德顺

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