张金文
- 作品数：199 被引量：1,243H指数：17
- 供职机构：甘肃农业大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- AGPase基因植物表达载体的构建及对烟草的转化被引量：6
- 2007年
- 将大肠杆菌BL21的AGPase基因定向连接在受体质粒pCAMBIA2301载体上,从而构建植物表达载体,转化烟草获得了转基因植株。经GUS组织化学染色、PCR、Southern blot以及RT-PCR鉴定证实,该基因已导入烟草基因组中。淀粉含量测定结果显示,转基因植株比非转基因植株淀粉含量平均增加了13.1%,由此验证了该载体构建的成功与可用性,为下一阶段用该载体转化木薯主栽品种提高块根淀粉含量的研究奠定了基础。
- 姚庆荣郭运玲孔华郭安平张金文
- 关键词：植物表达载体
- 野生罂粟COR、BBE基因片段融合及其RNAi载体构建被引量：5
- 2009年
- 可待因酮还原酶(COR)与小檗碱桥酶(BBE)是吗啡合成代谢途径的关键酶,其活性大小直接影响着吗啡合成途径中生物碱的代谢合成。采用RT-PCR从罂粟幼叶克隆出COR和BBE基因全序列,同源性比较结果显示,它们与GenBank上已报道的COR和BBE基因高度同源。利用blast及分子生物学软件DNAStar对COR和BBE基因的cDNA序列同源性进行分析比较,分别从各基因中筛选和克隆了一段同源性极低、约400～500bp的片段;并应用重叠PCR法将其拼接成744bp的融合基因BC,以中间载体pHANNIBAL和植物表达载体pART27为基础,构建了以CaMV35S启动子驱动的含有"正向BC融合片段-pdk内含子-反向BC融合片段"的ihRNAi植物表达载体,通过转化野生罂粟,初步研究了以COR和BBE基因为靶标的RNAi对内源吗啡合成的抑制效果,为进一步培育低吗啡高蒂巴因的罂粟种质提供了依据。
- 梁倩倩张金文魏玉杰王旺田何庆祥雷耀湖
- Artificial miRNA调控甘蓝型油菜芥酸的研究被引量：1
- 2019年
- 芥酸是重要的工业原料,主要来源是甘蓝型油菜种子,为调节甘蓝型油菜种子内芥酸含量,针对甘蓝型油菜芥酸合成过程中的关键酶基因Bnfad2设计特异性amiRNA,并构建种子特异表达载体,转化高芥酸甘蓝型油菜品种MY15和低芥酸甘蓝型油菜品种LEA01,并对转化植株T_0种子脂肪酸进行分析。结果表明,转化的高芥酸甘蓝型油菜芥酸的增加最高达到5.12%,最低2.11%;而转化的低芥酸品种,最高仅为0.45%,最低只有0.16%,而且所有转化低芥酸材料的芥酸含量都小于1%;同时转化种子内油酸的含量得到了明显的提高,最低为4.99%,最高达到了10.71%,亚油酸降低的幅度十分明显,最大降幅达到17%。表明amiRNA技术可以通过影响脂肪酸合成过程中特定基因的表达,有效改变种子内脂肪酸的组成,从而改变其营养结构,提高营养价值,进一步提高油菜种子的附加值。本研究为运用amiRNA技术调节油菜脂肪酸组成和改变其营养结构提供了一定理论依据。
- 王志伟王志伟张自阳张金文张金文刘明久
- 关键词：甘蓝型油菜芥酸脂肪酸
- 当归抽薹植株生理生化特征分析被引量：15
- 2011年
- 目的研究在蛋白质及酶水平上的当归抽薹发育机制,为进一步阐明当归抽薹过程所发生的生理生化指标变化及预防当归抽薹提供理论依据。方法观察当归抽薹与未抽薹植株的糖代谢及过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)等活性的变化,测定抽薹与未抽薹当归植株游离氨基酸、可溶性糖和可溶性蛋白的量。结果在抽薹前10 d,未抽薹植株的游离氨基酸量和POD活性、PPO活性分别比抽薹植株高1.3 mg/g和0.02 U/(min.g)、0.014 U/(min.g),抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量分别比未抽薹植株高2.2%、0.5%。在抽薹期,未抽薹植株的可溶性糖和可溶性蛋白量较高,而抽薹植株的游离氨基酸量和PPO和POD活性较高。结论当归抽薹过程多个生化指标发生变化,当归栽培中应防止早期抽薹的发生。
- 陆则权张金文任丽蓉黄惠英马占川漆琚涛
- 关键词：抽薹生理生化特征过氧化物酶多酚氧化酶
- 氮、磷、钾缺素培养对党参幼苗形态特征和生理特性的影响被引量：10
- 2013年
- 目的:研究N、P、K缺素培养时,党参幼苗表现出的营养缺乏症状和生理特性变化,为大田栽培的营养诊断和施肥提供理论依据。方法:采用溶液培养法,设全素与氮、磷、钾营养元素缺乏4个处理组,培养期间每7d进行1次表型测定,培养结束时进行茎叶、根的干鲜重、叶绿素含量和根系活力的测定。结果:缺素培养第7天,缺素植株普遍较全素植株生长缓慢,第29天时生长基本停滞,植株较对照处理组矮小,叶片小,须根量少,且各有其特有的症状,生理指标的测定结果均与对照处理组有明显的差异。结论:通过本试验得出党参N、P、K缺乏时的症状和生理特性的变化,可为党参合理施肥提供理论依据。
- 张延红晋玲高素芳王桂花张金文
- 关键词：党参缺素症状生理指标
- 野生罂粟RNAi表达载体的构建及遗传转化被引量：1
- 2011年
- 通过PCR方法从质粒pGEM-bc中克隆野生罂粟BBE-COR融合基因片段约760 bp,以pHANNIBAL和植物表达载体pCAMB IA3300为基础,将克隆到的BBE-COR融合基因正向和反向片段分别插入pdk内含子的两边,经酶切、PCR鉴定及序列分析表明,特异性RNA i表达载体p3300-pHR构建成功。采用直接转化法,将重组子导入根癌农杆菌AGL1中。以野生罂粟茎尖生长点为转化受体,用农杆菌介导法将目的基因转入野生罂粟中。经卡那霉素和除草剂筛选后,共获得53株转基因植株,PCR检测后,其中14株表现阳性,可初步确定目的基因已经整合到野生罂粟基因组中。
- 任丽蓉张金文魏玉杰何庆祥雷耀湖陆则权
- 关键词：RNAI根癌农杆菌茎尖
- 东方百合鳞片组织培养研究被引量：9
- 2009年
- 以鳞片为外植体,研究了7个东方百合品种的组织培养方法。结果表明,东方百合不同品种之间鳞片不定芽的分化率以及单个外植体上再分化不定芽的数量存在显著差异,以西伯利亚最高,分化率为68.04%,瑞塔较低,仅为12.96%,索蚌最差。不同部位鳞片不定芽的分化率也存在显著差异,分化能力由大到小依次为中层、外层、内层。适宜东方百合鳞片不定芽分化和增殖的最适培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.05 mg/L,不定芽生根最适培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L。
- 王延秀张金文师桂英
- 关键词：东方百合鳞片不定芽分化率
- 农杆菌介导胡萝卜遗传转化体系的建立与转基因胡萝卜栽培试验被引量：7
- 2006年
- 选黑田五寸胡萝卜栽培种,通过农杆菌介导的转化方法,获得转基因植株。结果表明:抗性愈伤和芽分化用不同浓度Kan筛选,Kan抗性芽的分化频率可达52%,Carb 500 mg/L能够完全抑制农杆菌的生长并能促进芽的分化;适当浓度的Cef对根形成有一定促进作用。转基因植株炼苗,采用塑料布覆盖并逐渐打开通风口通风的方法,抗性植株长势好,抗性强,成活率可以提高35%。低温春化,大棚和陆地相比,死亡率降低了49.5%。对7个株系T1植株的PCR分析,得出其中两株系接近1∶1,另两株系为1∶3。
- 郭蓉李霞张金文李兴涛杨慧刘玲
- 关键词：胡萝卜低温春化农杆菌介导
- 转基因抗旱耐盐及抗病马铃薯新品系培育研究
- 王蒂张俊莲李金花司怀军王丽秦舒浩柴兆祥张峰张金文杨宏羽刘玉汇余斌
- 《转基因抗旱耐盐及抗病马铃薯新品系培育研究》课题是甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(项目编号：GNSW-2006-01，2006年6月-2009年6月，20万元)，由甘肃省作物遗传改良及种质创新重点实验室、甘肃农业大...
- 关键词：
- 关键词：马铃薯
- 人参果PVM病毒的克隆与鉴定被引量：1
- 2013年
- 通过对武威市凉州区人参果感病植株所表现出来的花叶、皱缩、植株矮小等症状观察,初步判断可能感染了马铃薯M病毒(PVM)。结合分子生物学手段,提取感病人参果叶片总RNA,采用RT-PCR方法扩增到一段长300 bp的基因序列,连接至PMD19-T载体并测序。测序结果同GeneBank中PVM CP基因序列[GI:361071296]同源性达到了98.97%,说明成功克隆到了PVM基因片段,即供试人参果确实感染了PVM病毒。
- 张菲菲张金文高宜峰姚攀锋
- 关键词：人参果克隆
