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细胞间黏附分子1的MRM-MS测定方法建立与优化被引量：1: 2018年; 目的建立并优化室间隔缺损潜在生物标记物细胞间黏附分子1(ICAM-1)MRM-MS测定方法。方法借助Uni Prot数据库和辅助软件Skyline建立ICAM-1多重反应监测质谱定量(MRM-MS)方法,进一步筛选其各肽段及母子离子对,并通过改变MS的碰撞能量CE值和去簇电压DP值进一步优化其MRM质谱扫描方法。结果从ICAM-1的11个肽段88对离子对中优选出3个肽段9对离子对作为ICAM-1的定量依据。采用优化后的MRMMS进行检测,10个血清样本中ICAM-1蛋白含量为(318.40±97.20)ng/m L,与经酶联免疫法测定的结果(330.30±130.24)ng/m L相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论借助Uni Prot数据库和辅助软件Skyline,经过多个循环可以建立并优化ICAM-1蛋白的MRM-MS测定方法。; 黄东萍李洪涛曾小云龙静铧臧宁周怡仇小强; 关键词：ICAM-1

质谱技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的作用被引量：2: 2012年; 目的:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的肝组织中蛋白质的表达差异。方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,试验分为正常对照组、模型组和联合用药治疗组。在试验的第10周末取大鼠肝组织,提取肝组织总蛋白质,应用SELDI-TOF-MS检测肝组织差异表达的蛋白。结果:SELDI-TOF-MS共检测到176个蛋白峰,其中表达差异2倍以上的蛋白有12个,包括在模型组中表达有降低趋势的10个蛋白质和升高趋势的2个蛋白质;经过联合用药治疗后,这些蛋白表达恢复到正常水平。对这12个差异表达蛋白进行蛋白质组数据库的检索,获得4个蛋白质,涉及负调控细胞生长、抑制细胞增殖和参与细胞信号转导。结论:联合用药能够通过调节大鼠肝脏组织蛋白质的表达,改善和修复肝脏功能。; 廖明莫财锋周怡何敏卓朗; 关键词：联合用药肝纤维化 SELDI-TOF-MS

肺结核患者血清caspase-3活性研究被引量：5: 2014年; 目的：观察肺结核患者血清 caspase-3活性。方法选取广西医科大学第一附属医院感染科2010年12月住院肺结核患者38例，其中肺结核初治结核杆菌痰涂片阳性13例、肺结核初治结核杆菌痰涂片阴性15例、肺结核复治耐药10例，于入院次日采集外周静脉血，同时选取健康体检者22例为对照组采用分光光度法检测肺结核患者血清 caspase-3酶活力单位，即 caspase-3催化产生的4-硝基苯胺（pNA）的吸光度（A）。结果肺结核初治结核杆菌痰涂片阳性组、肺结核初治结核杆菌痰涂片阴性组、肺结核复治耐药组、正常对照组血清 caspase-3酶活力单位分别为37.15±5.06，50.38±6.29，45.32±3.32和23.89±2.29。各组之间 caspase-3活性差异具有统计学意义（F＝10.68，P＜0.01）。与正常对照组相比，肺结核初治涂阳组（q＝3.51，P＝0.016）、肺结核初治涂阴组（q＝7.5，P＜0.001）、肺结核复治耐药组（q＝5.34，P＝0.001） caspase-3活性差异具有统计学意义。肺结核患者各亚组（耐药组、涂阳组、涂阴组）之间 caspase-3活性差异无统计学意义（P＞0.05）。各组之间性别构成比[χ2＝0.38（DL＝3），P＝0.94]差异无统计学意义；各组之间年龄差异亦无统计学意义（F＝0.82，P＝0.49）。结论 caspase-3与肺结核发生和发展的过程密切相关，其机制可能通过 caspase-3的激活促进了病变细胞的细胞凋亡从而产生机体抗结核的免疫过程。; 赵英伦胡溪源李翠萍周怡李洪涛何敏罗蓉; 关键词：肺结核 CASPASE-3

黑色素瘤激活因子CXCL1与不同亚型IL-8在恶性卵巢肿瘤组织中的表达研究: 第一章卵巢恶性肿瘤蛋白组学研究现况(文献综述)卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，由于临床症状隐匿，缺乏有效的早期诊断方法，超过70％的患者就诊时已为晚期，死亡率居妇科恶性肿瘤之首。肿瘤标志物CA125特异性不强...; 周怡; 关键词：黑色素瘤卵巢肿瘤; 文献传递

LCM、IMB联合MALDI-TOF-MS技术在恶性卵巢上皮瘤相关标志物分离检测中的应用被引量：3: 2011年; 目的排除混杂细胞的干扰,获取人卵巢上皮瘤细胞,分离、检测特异相关标志物。方法采用激光捕获显微切割（LCM）技术获取无间质混杂的人正常、良性、恶性卵巢上皮瘤细胞,分别提取细胞总蛋白,用免疫磁珠（IMB）技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术分离检测黑色素瘤激活因子CXCL1及IL-8（1~77 aa）、IL-8（6~77 aa）和IL-8（9~77 aa）。结果利用LCM获取的卵巢上皮细胞数量级达106~107。IMB可将CXCL1及不同亚型IL-8从卵巢正常、良性和恶性上皮瘤细胞的蛋白裂解液中分离并用于MALDI-TOF-MS检测。结论 LCM、IMB联合MALDI-TOF-MS技术可以准确有效地获取卵巢上皮癌细胞的特异标志物。; 周怡王琪张玮李力; 关键词：激光捕获显微切割技术免疫磁珠技术

利用亲和层析法检测乙酰化蛋白的研究: 2012年; 目的建立一种快速、相对定量检测乙酰化蛋白方法，并初步应用其检测药物作用后Jurkat细胞乙酰化总蛋白水平。方法用不同浓度的曲古菌素A（TSA）诱导Jurkat细胞蛋白高乙酰化后，利用抗乙酰化赖氨酸抗体亲和层析柱富集纯化乙酰化总蛋白，经酸洗脱后固定于酶标板，ELISA法检测乙酰化蛋白相对总量，并用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪（MALDI—TOF／TOF）分析验证其成分；同法检测不同浓度的没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A三种药物作用Jurkat细胞后乙酰化总蛋白水平的变化，筛查诱导Jurkat细胞蛋白乙酰化药物。结果1μmol／LTSA作用于4×10^5Jurkat细胞24h，乙酰化总蛋白相对水平最高。MALDI—TOF／TOF分析显示，TSA诱导Jurkat细胞产生的乙酰化蛋白共有22种，其中15种为乙酰化组蛋白。没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A作用Jut-kat细胞后所导致的乙酰化程度不同，以1μmol／L浓度TSA为阳性对照组，无药物为空白对照组，35．09μmol／L和17．54μmol／L大黄素处理的Jurkat细胞乙酰化蛋白相对水平分别为4．3％和14．2％；1．47μmol／L和2．94μmol／L没食子酸处理组乙酰化蛋白相对水平分别为28．7％和11．5％；152．91μmol／L和30．58μmol／L单乙酰化大黄素组分别为22．O％和3．6％；其中1．47μmol／L没食子酸所诱导的乙酰化蛋白水平最高。结论初步建立了活细胞基础上纯化富集并检测乙酰化总蛋白水平的方法，该法可快速、简便的筛选以组蛋白去乙酰化酶为靶点的抗癌药物。; 郑力钟艳平萧浩周怡罗蓉李洪涛李刚廖明何敏; 关键词：组蛋白类曲古菌素A 色谱法亲和 JURKAT

iTRAQ结合MALDI-TOF/MS检测涂阴肺结核患者血清差异蛋白被引量：4: 2015年; 目的利用差异蛋白质组学方法检测涂阳和涂阴肺结核患者血清差异表达蛋白,以发现涂阴肺结核相关的潜在标志物,为临床治疗提供参考依据。方法分析2011年医院的住院患者39例临床资料,采用iTRAQ标记结合MALDI-TOF/MS筛选30例痰涂片阴性和9例痰涂片阳性的肺结核患者血清的差异表达蛋白,并进行生物信息学分析,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果 3次独立重复试验一共筛选和鉴定到344种蛋白质,其中置信度在>95.0%有271种蛋白质;与涂阳肺结核患者血清蛋白多肽图谱相比,涂阴肺结核患者血清中11种蛋白表达水平显著增高,7种蛋白表达降低(P<0.05);生物信息学分析发现差异蛋白主要定位在细胞外,参与酶抑制剂活性和应激反应过程。结论涂阴和涂阳肺结核患者血清蛋白多肽图谱存在明显差异;处于关键节点上的6个蛋白可能与涂阴结核病的发生发展有密切联系。; 胡水秀李翠萍何晓李洪涛周怡臧宁郑艳燕何敏; 关键词：肺结核差异蛋白

高血压患者颈动脉粥样硬化的危险因素被引量：3: 2013年; 颈动脉粥样硬化（AS）是全身AS的标志,与心脑血管疾病密切相关。本文旨在探索高血压患者颈AS发生率及其有关的危险因素。1对象与方法1.1对象符合1999年WHO诊断标准的高血压患者162人,其中男性94人,女性68人,平均（70.4±7.8）（32～89）岁,; 罗蓉周怡吴秀山; 关键词：高血压颈动脉粥样硬化

纤维连接蛋白作为室间隔缺损血清标志物的研究被引量：3: 2013年; 目的:验证纤维连接蛋白是否可以作为室间隔缺损(VSD)患者血清标志物。方法:收集室间隔缺损患者血清和与之年龄、性别、民族匹配的房间隔缺损患者、法洛氏四联症患者和健康对照者血清各20例,应用免疫印迹法(Westernblot)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清样本中纤维连接蛋白表达水平。结果:免疫印迹法检测结果显示,纤维连接蛋白在VSD组、ASD组、TOF组和健康体检者血清中均能检测到,但在VSD组中的表达水平明显高于其他3组(P<0.05);ELISA检测显示VSD组患者血清中纤维连接蛋白浓度为(67.08±27.67)μg/L,ASD组患者为(37.65±15.07)μg/L、TOF组患者为(28.08±11.24)μg/L、健康体检者为(31.15±11.18)μg/L,4组间差异有统计学意义(P<0.05);进一步进行两两比较,VSD组与其他3组差异均有统计学意义(P<0.05),而其他3组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:纤维连接蛋白在VSD患者血清中的含量较高,有可能作为VSD的血清标志物,但有待于进一步的临床大样本验证。; 何武金仇小强余红平何敏周怡曾小云; 关键词：室间隔缺损纤维连接蛋白血清标志物

胆癌潜在治疗靶点凝溶胶蛋白gelsolin(GSN)抑制肝癌细胞凋亡的作用机制研究: 周怡李洪涛臧宁李刚邓小芳刘坤方芳; GSN蛋白是一种钙调节的肌动蛋白结合蛋白，包含782个氨基酸，分子量约为90KD，亚细胞定位在细胞质和细胞骨架，也可分泌至胞外。GO分析指出GSN主要通过分解细胞组分参与细胞凋亡过程；Richard等在Jurkat 细胞...; 关键词：; 关键词：肝癌细胞凋亡肿瘤治疗

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周怡

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