华芳
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定与毒力测定被引量：5
- 2008年
- 从长春地区疑似猪传染性胸膜肺炎发病猪采集病料,经形态学检查、生化实验、卫星生长现象、溶血试验、PCR鉴定等,分离到7株猪胸膜肺炎放线杆菌;血清定型试验表明,其中血清7型3株,血清5型2株,血清3型1株,血清1型1株。将分离菌株在37℃BHI液体培养基中培养6～8h,无菌条件下离心收集菌体,用灭菌生理盐水洗涤菌体3次,腹腔接种健康昆明小鼠,每只小鼠1.0×10^8CFU/0.2mL,结果5型和7型对小鼠的平均致死率最高,分别为100%和66.5%。
- 雷连成华芳王丽哲李耿冯新韩文瑜
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌毒力测定
- 猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立
- 猪胸膜肺炎放线杆菌可引起猪接触传染性胸膜肺炎,该病危害严重,已被列为猪的三大呼吸道疾病之一。猪胸膜肺炎放线杆菌是多血清型菌,各血清型之间不能提供足够的交叉保护,且各国与各地区流行的血清型也不相同。目前预防和控制猪接触传染...
- 华芳
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:建立抗血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP-1)脂多糖(LPS)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后建立该菌的分型诊断技术奠定基础。方法:腹腔注射APP-1标准株的甲醛固定抗原免疫BALB/c小鼠,ELISA检测血清中LPS抗体滴度并选择值最高的小鼠用于细胞融合,且于融合前3天加强免疫1次。常规方法进行融合,HT、HAT培养液选择培养融合后的细胞,ELISA检测细胞培养上清中的LPS抗体,阳性杂交瘤细胞用有限稀释法克隆传代。结果:获得3株稳定分泌抗APP-1LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其小鼠腹水单克隆抗体效价1∶16000～1∶32000。结论:已成功建立3株稳定分泌抗APP-1LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其产生的单克隆抗体与呼吸道其它常见致病菌及APP-3,5,7,9,型无交叉反应。
- 华芳韩文瑜雷连成
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体脂多糖
- 养殖场的消毒处理
- 2007年
- 养殖场不仅仅要搞好防疫．还要特别重视消毒。因为打防疫针不可能所有的病都能预防。有的虽然免疫注射了．但还不能达到100％的免疫效果．一旦场区和畜舍的某种病毒细菌大量繁殖．就容易爆发某种疫病。养殖场消毒的主要目的是杀灭传染源的病原体．防止疫病蔓延流行。
- 华芳刘畅张弢王跃恒
- 关键词：消毒处理养殖场免疫效果免疫注射传染源疫病
- 猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:建立抗血清1型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP-1)脂多糖(LPS)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后建立该菌的免疫检测技术奠定基础。方法:腹腔注射APP-1标准株的甲醛固定抗原免疫BALB/c小鼠,ELISA检测血清中LPS抗体滴度并选择值最高的小鼠用于细胞融合,且于融合前3天加强免疫1次。常规方法进行融合,HT、HAT培养液选择培养融合后的细胞,ELISA检测细胞培养上清中的LPS抗体,阳性杂交瘤细胞用有限稀释法克隆传代。结果:获得2株稳定分泌抗APP-1LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其小鼠腹水单克隆抗体效价132000～164000。结论:已成功建立2株稳定分泌抗APP-1LPS抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后建立该菌的免疫胶体金分型诊断技术奠定基础。
- 华芳雷连成解殿玉雷雨韩文瑜
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体脂多糖
- IL-10_(23-57)-PE40分泌表达的初步研究被引量：3
- 2006年
- 将IL-1023-57-PE40基因与pelB信号肽融合置于pET-20b构建分泌表达质粒pET-20b-IL-1023-57-PE40,然后将pET-20b-IL-1023-57-PE40分别转化至BL21(DE3),BL21(DE3)pLysS,Rosetta(DE3),E·coliK12TB1,ER2566中。无论是在37℃或是在26℃,亦或在培养基中添加葡萄糖的情况下,IPTG诱导后,IL-1023-57-PE40蛋白只在BL21(DE3)pLysS菌中以可溶分泌形式表达,其中以37℃时培养基中不添加葡萄糖表达量为最高,占菌体蛋白总量的15%,说明蛋白的分泌表达与菌种的选择有关。表达产物经免疫印记检测可被抗PE40的特异抗体识别。通过质粒稳定性实验证明,pET-20b-IL-1023-57-PE40在BL21(DE3)中不稳定,导致蛋白的不表达,在Rosetta(DE3)BL21,E·coliK12TB1,ER2566中稳定但不表达,因此,以Rosetta(DE3)BL21为例,通过SDS-PAGE、DNAStar和ANThewin蛋白分析软件对本室构建的几种PE重组毒素进行比较分析,我们发现:并不是所有PE重组毒素融合信号肽序列后,就能分泌表达,PE重组毒素分泌表达还可能与导向部分的性质有关。
- 彭其胜李月红雷连成华芳朱平
- 关键词：分泌表达质粒稳定性
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌1型与5型差减文库构建及差异基因分析
- 目的:建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型差减文库,克隆差异表达基因并分析筛选不同血清型间免疫保护相关基因.方法:采用cDNA代表性差异分析法(cDNARDA),通过三轮消减杂交后获得特异性差异表达基因,克隆...
- 雷连成韩文瑜华芳王丽哲李耿冯新
- 关键词：放线杆菌差减文库差异基因
- 文献传递
