- DC-CIK细胞联合化疗治疗初发多发性骨髓瘤疗效及其对Treg细胞影响的分析被引量：14
- 2015年
- 目的:研究树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合化疗治疗初发多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效和免疫机制。方法:选取22例初发MM患者并将他们分为2组:单纯化疗组12例,给予适合的化疗方案;联合治疗组10例,除接受合适的化疗外,还给予DC-CIK细胞免疫治疗。记录所有患者在治疗前后外周血中的调节性T细胞(Tregs)的比例变化,并比较治疗后两组患者的临床疗效。结果:治疗后,单纯化疗组12例MM患者的总有效率(ORR)50.00%(6/12),其中完全缓解(CR)2例(16.67%),非常好的部分缓解(VGPR)2例(16.67%),部分缓解(PR)2例(16.67%)。联合治疗组MM患者ORR 70.00%(7/10),其中CR3例(30.00%),VGPR 2例(20.00%),PR 2例(20.00%)。与健康者相比,治疗前单纯化疗组及联合治疗组MM患者外周血中Treg细胞比例均明显升高(P<0.05),而治疗后,单纯化疗组及联合治疗组MM患者外周血中Tregs比例均明显下降(P<0.05),且联合治疗组患者相比单纯化疗组患者Tregs比例下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步分析发现,两组中临床无效的MM患者外周血中Tregs比例治疗前后均无明显变化(P>0.05),而临床有效(至少达PR)的MM患者Tregs明显下降(P<0.05)。结论:DC-CIK细胞免疫治疗能够协同或增强化疗药物缓解MM患者免疫功能紊乱,DC-CIK细胞免疫治疗与化疗联合有望提高初发MM患者的临床疗效。
- 鲁光邢建刘国强徐敏赵霞韩芳丁慧芳
- 关键词：多发性骨髓瘤DC-CIK细胞
- 输注间充质干细胞治疗小鼠原发性免疫性血小板减少症的疗效观察及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨输注间充质干细胞（MSC）对小鼠原发性免疫性血小板减少症（ITP）的治疗效果及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体的方法诱导建立雌性BAI，B／c小鼠ITP模型，取建模成功小鼠20只作为实验组，经尾静脉注射雄性BALB／c小鼠的MSC2×10’／个；另取20只建模成功小鼠作为对照组，不注射MSC。注射MSC14d后，取两组小鼠外周血，测定血小板数，应用流式细胞术检测外周血髓系树突细胞（mDC，Lin—HLA-DR’CDllc’细胞）绝对数及其表面共刺激分子CD80和CD86的表达水平，用酶联免疫吸附试验测定Tn1细胞因子7干扰素（INF-7）、白细胞介素2（IL-2）及Tn2细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果注射MSC14d后，实验组小鼠血小板数量为（623±78．9）X10’／L，明显高于对照组的（288±87．8）×10^9／i．（P〉0．05）。实验组mDC绝对数量为（16．24±9．97）／ml，明显低于对照组的（29．32±13．21）／ml（P〈0．05）；实验组mEK；表面的CDS0和0986的表达分别为（2．31±1．26）％和（46．25±20．21）％，明显低于对照组的（6．27±3．31）％和（62．21±16．41）％（P〈0．05）。实验组外周血INF7和IL-2水平分别为（3．1±1．7）和（3．2±2．1）pg／ml，明显低于对照组的（10．3±4．8）和（16．3±5．7）pg／ml（P〈0．05）；IL-4和IL-10水平分别为（88．6±15．2）和（38．3±11．8）pg／ml，明显高于对照组的（32．7±5．7）和（22．1±3．4）pg／ml（P〈0．05）。结论MS（2可以有效治疗小鼠ITP，其机制与MSC抑制小鼠IX；活化导致T。1细胞的极化有关。
- 徐敏路希敬丁慧芳刘国强鲁光邢健赵霞韩芳王椋尚应辉
- 关键词：小鼠间质干细胞免疫性血小板减少症TH1细胞树突细胞
- 间充质干细胞对原发免疫性血小板减少症患者T细胞分泌细胞因子及调节性T细胞水平影响的体外研究被引量：5
- 2013年
- 目的体外观察骨髓间充质干细胞（MSC）对原发免疫性血小板减少症（ITP）患者CD4＋CD25＋T细胞比例以及T细胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10功能的影响。方法采用Ficoll分离骨髓单个核细胞，体外培养扩增MSC；采用Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T细胞，应用流式细胞术（FCM）检测T细胞中CD4＋CD25＋T细胞比例；MSC经丝裂霉素（MMC）处理后分别以1×10^4、5×10^4、2×10^5／孔接种于培养板，然后分别接种体外分离纯化的异体ITP患者及正常人T细胞，共培养5d后用FCM检测CD4＋CD25＋T细胞比例，用ELISA法测定培养上清中IL-2、IFN—γ、IL-4、IL-10含量。结果2×10＋／孔MSC与ITP患者T细胞共培养5d后，CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋／CD4＋细胞均高于未加MSC的ITP患者T细胞[（4．56±0．70）％对（2．24±0．81）％，（9．91±1．18）％对（4．08±1．17）％]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与未加MSC的ITP患者T细胞组比较，培养上清中IL-2、IFN-γ浓度减低l（97．21±12．07）pg／ml对（280．47＋17．33）pg／ml，（72．75±7．81）pg／ml对（129．33＋16．34）pg／ml]，IL-4、IL-10浓度升高[（37．98±4．05）pg／ml对（16．34±2．60）pg／ml，（113．77＋5．68）pg／ml对（54．78±5．62）pg／m1]。结论MSC在体外可抑制ITP患者Thl细胞分泌IL-2、IFN-γ，促进Th2细胞分泌IL．4、IL-10，上调CD4＋CD25＋T细胞比例，进而诱导ITP患者免疫耐受形成。
- 赵霞丁慧芳郭成山路希敬徐敏邢健韩芳王椋鲁光刘国强
- 关键词：间质干细胞血小板减少调节性白细胞介素类干扰素Γ
- 多发性骨髓瘤化疗前后Treg细胞变化及其与化疗疗效肿瘤负荷关系研究被引量：4
- 2014年
- 目的分析硼替佐米为主联合化疗治疗多发性骨髓瘤(MM)患者前后Treg细胞变化及其与化疗疗效、肿瘤负荷的关系。方法分别采用流式细胞术、CCK-8法检测2010年1月至2013年1月胜利油田中心医院21例初治、16例复治MM患者接受硼替佐米为主联合化疗前后外周血中Treg细胞比例及活性,分析Treg细胞变化与疗效、血清β2-微球蛋白(β2-MG)浓度变化的关系。结果与健康志愿者相比,化疗前MM患者Treg细胞比例明显升高。经硼替佐米为主联合化疗后,初治组化疗有效MM患者的Treg细胞比例由(8.69±1.39)%下降为(6.07±1.21)%(P<0.05);复治组化疗有效MM患者的Treg细胞比例由(9.35±1.32)%下降为(7.33±1.06)%(P<0.05)。与化疗前相比,两组化疗有效的MM患者Treg细胞的免疫抑制功能活性明显降低(P<0.05);但两组化疗无效MM患者Treg细胞比例及免疫抑制功能活性与化疗前差异无统计学意义。进一步分析发现硼替佐米为主联合化疗后外周血中Treg细胞比例下降与血清β2-MG浓度下降呈线性相关。结论硼替佐米为主联合化疗治疗初治及复治性MM的疗效确切,Treg细胞可作为反映硼替佐米为主联合化疗疗效、肿瘤负荷的指标。
- 邢健鲁光刘国强徐敏路希敬赵霞韩芳王椋尚应辉丁慧芳
- 关键词：多发性骨髓瘤
- DC-CIK联合化疗对多发性骨髓瘤患者细胞免疫功能的影响被引量：27
- 2015年
- 目的:研究树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合化疗治疗多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效及对患者外周血T细胞亚群、CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的影响,从而探讨以上治疗对MM患者的细胞免疫调节功能。方法:将50例MM患者随机分为两组:化疗组24例,给予合适的化疗方案;联合组26例,除接受适合的化疗外,还给予DC/CIK免疫治疗,比较两组患者的临床疗效及外周血T细胞亚群、CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞比例,并比较两组患者细胞免疫指标(Th1/Th2比值、Ag NORs比值、TGF-β)的差异。结果:3周期治疗后,联合组患者的生活质量和临床疗效[PS评分为2.10±0.49;瘤细胞百分比为(28.55±7.11)%;β2微球蛋白表达水平为(10.21±3.03)mg/L;血清M蛋白水平为(27.11±6.87)g/L;24h尿液轻链为(9.11±3.66)mg;肌酐水平为(159.33±29.68)μmol/L]均优于化疗组患者[2.59±0.52;(37.34±12.89)%;(17.22±4.21)mg/L;(35.26±12.32)g/L;(14.87±4.06)mg;(254.19±37.46)μmol/L](P值均<0.05)。联合组CD3+CD8+比例[(24.68±7.38)%]、CD4+CD25+[(1.22±0.26)%]、CD4+CD25+/CD4+[(3.58±1.69)%]、TGF-β含量[(1.32±0.39)ng/m L]均明显低于化疗组[(27.56±6.59)%、(1.45±0.40)%、(4.67±2.77)%、(1.49±0.59)ng/m L](P<0.05);CD3+CD4+/CD3+CD8+比值[(1.46±0.33)%]、Th1/Th2比值(1.49±0.29)、Ag NOR比值[(5.06±0.69)IS%]均明显高于化疗组[(1.38±0.28)%、(1.32±0.31)、(4.37±0.67)IS%](P<0.05),提示联合治疗组对MM具有更有效的免疫调节功能。结论:DC/CIK免疫治疗联合化疗治疗MM有良好的临床疗效和应用价值,可能通过免疫调节使MM患者Th2向Th1逆转,从而增强机体抗肿瘤效应。
- 赵霞许庆丁慧芳徐敏邢健鲁光孙彩凤刘国强
- 关键词：多发性骨髓瘤免疫疗法树突细胞杀伤细胞
- DC-CIK联合化疗治疗初发多发性骨髓瘤的疗效及对其Treg细胞功能的影响被引量：9
- 2016年
- 目的:探讨树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合化疗治疗初发多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效及对患者外周血CD4^+CD25^+调节性T(Treg)细胞影响。方法:42例MM患者随机分为两组:化疗组20例,给予合适的化疗方案;联合组22例,除接受合适的化疗外,还给予DC/CIK免疫治疗,比较两组患者的临床疗效及CD4^+CD25^+调节性T(Treg)细胞比例的差异。结果:治疗3个周期后,联合组患者的生活质量和临床疗效:YS评分2.09,瘤细胞15.56%,β2微球蛋白11.36 mg/L,血清M蛋白26.58 g/L;24 h尿液轻链9.86 mg和肌酐120.33μmol/L,而化疗组上述指标检测分别为:2.66.28.22%、17.52 mg/L,36.26 g/L、14.76mg和200.19μmol/L(P值均<0.05)。联合组CD4^+CD25^+/CD4^+细胞数为3.54%,CD4^+CD25^+FoxP3^+/CD4^+CD25^+比值为15.20%,均明显低于化疗组4.68%和27.55%(P<0.05)。结论:DC/CIK免疫治疗可使CD4^+CD25^+Treg细胞活化增强,配合化疗可进一步清除残存的肿瘤细胞,两者具有协同作用。
- 赵霞丁慧芳徐敏邢健鲁光王椋刘国强
- 关键词：多发性骨髓瘤杀伤细胞调节性T淋巴细胞
- 多发性骨髓瘤患者骨髓中Treg/Th17细胞失衡研究被引量：9
- 2014年
- 本研究通过检测多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓微环境中调节性T细胞(Treg)和Th17细胞的比例,探讨Treg/Th17细胞失衡与多发性骨髓瘤发生发展的关系。应用流式细胞术检测37例MM患者和12例正常对照者骨髓中Treg和Th17细胞的表达量,对其中19例MM患者同时检测了外周血中Treg和Th17细胞的表达量。结果表明:MM组骨髓中Treg细胞比例高于正常对照组(P<0.05),自ISS分期的Ⅰ+Ⅱ期至Ⅲ期逐渐增高(P<0.05);进一步研究发现,MM患者骨髓中Treg细胞水平高于外周血,差异有统计学意义(P<0.05)。MM组骨髓中Th17细胞比例与正常对照组无差别(P>0.05),临床分期间无差别(P>0.05)。MM患者骨髓中Th17细胞比例与外周血无差别(P>0.05)。MM组Treg/Th17的比值高于正常对照组(P<0.05),自ISS分期的Ⅰ+Ⅱ期至Ⅲ期逐渐增高(P<0.05)。结论 MM患者骨髓微环境中存在Treg/Th17比例失衡,这种失衡可能促进了MM的病程进展。
- 邢健鲁光刘国强徐敏赵霞韩芳王椋丁慧芳
- 关键词：多发性骨髓瘤骨髓TREG细胞免疫平衡
- 间充质干细胞治疗提升免疫性血小板减少症小鼠的血小板数并影响其外周血单核细胞中 T-bet 和 GATA-3基因表达被引量：3
- 2013年
- 目的：探讨间充质干细胞（ MSC）对原发免疫性血小板减少症（ ITP）小鼠血小板数目的影响及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（ MWReg30单抗）的方法诱导BALB/c小鼠产生ITP后，取20只作为实验组，20只作为对照组。之后通过鼠尾静脉给实验组小鼠注射MSC 2×107个/只。注射后5 d、7 d、14 d，测定实验组与对照组小鼠外周血血小板数；14 d时应用逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）检测小鼠外周血单个核细胞（ PBMC）中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的表达；应用酶联免疫法测定Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果7 d、14 d后，注射MSC实验组小鼠血小板值[（588．0±81．6）×109/L、（623．0±78．9）×109/L]明显高于未注射MSC对照组[（317．0±90．1）×109/L、（288．0±87．8）×109/L]（P＜0．05）；14 d时，实验组PBMC中T-bet mRNA表达水平低于对照组[（0．04±0．03） vs （0．27±0．05）]（P＜0．05）；GATA-3 mRNA的表达水平高于对照组[（0．14±0．04） vs （0．07±0．05）]（P＜0．05）；实验组Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平[（3．1±1．7） pg/ml、（3．2±2．1） pg/ml]明显低于对照组[（10．3±4．8） pg/ml、（16．3±5．7） pg/ml]（P＜0．05）；实验组外周血 Th2类细胞因子 IL-4、IL-10水平[（88．6±15．2） pg/ml、（38．3±11．8） pg/ml]明显高于对照组[（32．7±5．7） pg/ml、（22．1±3．4） pg/ml]（P＜0．05）。结论 MSC可以有效提升ITP小鼠的血小板数，机制可能与抑制了T-bet和GATA-3的表达失常导致的Th1细胞极化有关。
- 徐敏王椋刘国强鲁光丁慧芳邢健赵霞韩芳尚应辉
- 关键词：免疫性血小板减少症小鼠转录因子T-BET转录因子GATA-3
- DC-CIK免疫治疗联合化疗对多发性骨髓瘤患者外周血T细胞亚群及Treg细胞的影响被引量：7
- 2015年
- 为研究树突状细胞和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)为效应细胞的过继免疫联合化疗治疗多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效及对患者外周血T细胞亚群、CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的影响,探讨以上治疗对MM患者的细胞免疫调节功能。将36例MM患者随机分为两组:化疗组18例,给予合适的化疗方案;联合组18例,除接受适合的化疗外,还给予DC/CIK免疫治疗,比较两组患者的临床疗效及外周血T细胞亚群、CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞比例。结果显示,3周期治疗后,联合组患者的生活质量和临床疗效均比化疗组患者显著提高(P<0.05)。联合组CD3+CD8+比例、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+FoxP3+/CD4+CD25+比值均明显低于化疗组(P<0.05);CD3+CD4+/CD3+CD8+比值明显高于化疗组(P<0.05),提示联合治疗组对MM具有更有效的免疫调节功能。研究结果表明DC/CIK免疫治疗联合化疗治疗MM有良好的临床疗效和应用价值,可能是通过免疫调节使MM患者Th2向Th1逆转,从而增强机体抗肿瘤效应的。
- 赵霞丁慧芳刘国强徐敏邢健鲁光路希敬
- 关键词：多发性骨髓瘤树突细胞杀伤细胞
- 恶性血液肿瘤中ADAMTS13活性与TSP1水平改变被引量：4
- 2016年
- 目的:观察血管性血友病因子裂解蛋白酶(von Willebrand factor cleaving protease,ADAMTS13)活性、血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)及凝血酶敏感蛋白1(thrombospondin 1,TSP1)水平在恶性血液肿瘤患者治疗前后的变化,并探讨其相关的临床意义。方法:收集82例恶性血液肿瘤(包括20例急性白血病,48例恶性淋巴瘤,14例多发性骨髓瘤)患者和45例与之匹配的健康对照者的血浆标本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组血浆中的v WF抗原和TSP1水平,用残余胶原结合试验(R-CBA)检测2组血浆中的ADAMTS13活性水平。结果:初发恶性血液肿瘤患者血浆中ADAMTS13活性(71.48±19.62)%明显低于正常对照组(92.31±21.82)%(P<0.05);v WF抗原水平和TSP1水平高于正常对照组(P<0.05)。初发组血浆中ADAMTS13活性(71.48±19.62)%低于治疗后缓解组(89.84±20.70)%(P<0.05);初发组v WF抗原水平高于治疗后缓解组(P<0.05)。在82例初发恶性血液肿瘤中有25例合并感染,治疗前合并感染者的ADAMTS13活性(49.80±18.44)%明显低于无感染组(73.82±21.41)%(P<0.05);感染组v WF抗原水平与TSP1水平明显高于无感染组(P<0.05)。治疗过程中有8例发生了血栓事件,发生血栓事件的患者血浆中ADAMTS13活性较无血栓组明显降低(P<0.05);8例急性早幼粒细胞白血病中有1例合并弥散性血管内凝血。结论:恶性血液肿瘤患者中ADAMTS13活性降低和TSP1水平升高,而发生感染及血栓事件的恶性血液肿瘤患者中ADAMTS13活性进一步降低。检测恶性血液肿瘤患者血浆中的ADAMTS13活性和TSP1水平有可能更好地预防感染及血栓事件的发生。
- 孙彩凤赵霞韩芳贾琦王椋鲁光丁慧芳
- 关键词：恶性血液肿瘤血管性血友病因子凝血酶敏感蛋白1血管性血友病因子裂解蛋白酶
