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高海峰

作品数：8 被引量：35H指数：3
供职机构：复旦大学上海医学院免疫学系更多>>
发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇循环DNA
  • 2篇细胞
  • 1篇电击法
  • 1篇血清
  • 1篇血清DNA
  • 1篇移植排斥
  • 1篇移植排斥反应
  • 1篇疫苗
  • 1篇银染
  • 1篇原核表达
  • 1篇杂合性
  • 1篇杂合性丢失
  • 1篇增敏
  • 1篇增敏作用
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇上皮
  • 1篇上皮性
  • 1篇上皮性癌
  • 1篇生物活性

机构

  • 6篇复旦大学上海...
  • 2篇复旦大学附属...
  • 2篇上海市肿瘤研...
  • 1篇上海交通大学
  • 1篇南京医科大学
  • 1篇中国科学院

作者

  • 8篇高海峰
  • 4篇储以微
  • 4篇熊思东
  • 3篇屠红
  • 2篇蒋正刚
  • 2篇傅士龙
  • 1篇王缨
  • 1篇钱静
  • 1篇刘荣花
  • 1篇邵先安
  • 1篇熊凌云
  • 1篇洪晓武
  • 1篇陈颢
  • 1篇刘小明
  • 1篇徐薇
  • 1篇汪晓华
  • 1篇郑一诫
  • 1篇何球藻
  • 1篇任学芳
  • 1篇岳艳

传媒

  • 2篇现代免疫学
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇遗传
  • 1篇复旦学报（医...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇中国实用妇科...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2008
  • 3篇2005
  • 1篇2004
  • 1篇2002
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
SARS-CoV N蛋白的原核表达及其免疫原性研究被引量：1
2005年
为了研究SARS-CoV病毒N蛋白基因的原核表达及其免疫原性,为进一步的研究奠定基础,我们以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长N基因,分别克隆到pcDNA3和pET32a载体中获得重组质粒pcDNA3-N和pET32a-N。以亲和层析方法分离纯化pET32a-N转化的BL21细菌裂解液中的重组N融合蛋白,并以ELISA方法检测pcDNA3-N质粒基因免疫小鼠诱导后血清中的特异性抗体。结果pET32a-N转化BL21细菌后可检测到重组SARS-CoVN融合蛋白表达并分离纯化,pcDNA3-N基因免疫能够诱导产生N特异的体液免疫应答。研究的结果表明,SARS-CoVN蛋白可以在原核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以为进一步的功能研究和血清学诊断提供条件。
高海峰熊凌云汪晓华储以微王缨熊思东
关键词：SARS-COVN蛋白基因免疫
MicroRNA-7对非小细胞肺癌表柔比星化疗的增敏作用被引量：2
2012年
目的:研究microRNA-7(miR-7)对非小细胞肺癌A549和H1299细胞表柔比星(epirubicin,EPI)化疗的增敏作用及其机制。方法:EPI、miR-7 mimics单独或联合处理A549和H1299细胞后,CCK-8法检测A549和H1299细胞的增殖,Annexin-V/PI染色流式细胞术检测A549和H1299细胞的凋亡,实时定量PCR检测A549和H1299细胞中EGFR及Raf-1mRNA的表达。结果:单独使用EPI或转染miR-7 mimics均可抑制A549和H1299细胞的增殖(P<0.05),而转染miR-7 mim-ics后再以50～400 ng/ml EPI处理,较单独EPI处理显著增强对A549和H1299细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。当miR-7mimics与EPI联用时,A549和H1299细胞的凋亡率则分别较EPI单独处理组增加(54.9±0.4)%和(67.2±0.5)%(均P<0.01),且伴随EGFR及Raf-1 mRNA表达量的显著下降(P<0.01),A549细胞中分别降低(68.0±6.0)%和(78.2±3.9)%,H1299细胞中分别降低(94.8±6.2)%和(87.8±4.3)%。结论:miR-7可通过下调EGFR及Raf-1 mRNA的表达,协同EPI抑制非小细胞肺癌A549和H1299细胞的增殖,并促进细胞凋亡。
钱静刘荣花刘小明姜佩郑一诫储以微高海峰
关键词：表柔比星非小细胞肺癌
卵巢上皮性癌患者循环DNA的定量研究被引量：11
2005年
目的通过对患者血浆游离DNA的定量检测,探索一种可用于卵巢上皮性癌早期诊断和疗效监控的新方法。方法2001年4月至2003年2月上海市肿瘤研究所等单位以微量基因组抽提试剂盒抽提血浆DNA,以SYBR Green I斑点荧光染色法分别检测93例卵巢上皮性癌、25例卵巢良性肿瘤及100例健康对照标本血浆游离DNA含量。结果卵巢上皮性癌血浆游离DNA质量浓度为(82.1±60.6)μg/L,卵巢良性肿瘤为(21.1±17.6)μg/L,健康对照组为(14.9±8.2)μg/L,卵巢上皮性癌患者血浆游离DNA质量浓度明显高于正常对照及卵巢良性肿瘤,差异有显著性(P<0.001)。血浆游离DNA质量浓度与病理类型及组织学分级无关,但与临床分期相关,IV期癌较其他三期升高明显(P=0.016)。在I期卵巢上皮性癌患者中,血浆游离DNA质量浓度已达(68.8±46.1)μg/L,显著高于卵巢良性肿瘤和健康对照人员(P<0.001)。结论卵巢上皮性癌游离DNA定量检测有可能成为一种新的卵巢上皮性癌血浆标志物检测方法。
傅士龙傅士龙屠红李子庭高海峰
关键词：卵巢上皮性癌循环DNA肿瘤标志物
人猿超科和旧大陆猴7种高等灵长类FKN全基因序列的测定及进化分析被引量：2
2008年
测定人猿超科(人、黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩和长臂猿)和旧大陆猴(猕猴和叶猴)7种高等灵长类FKN全基因序列,探讨其系统进化分析。用简并引物PCR(Degenerated PCR)法分别扩增FKN的3个外显子,其产物经琼脂糖凝胶回收、纯化后测序,然后用BioEdit软件剪切拼接FKN基因全序列,用DNAStar比对后比较基因和氨基酸序列同源性,Mega软件重构FKN基因进化树,应用Datamonkey分析FKN的负选择位点。序列分析发现人猿超科较旧大陆猴FKN基因除了有散在的点突变外,还有一明显的30bp的核苷酸缺失突变;人FKN基因序列与黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩、长臂猿、猕猴和叶猴的同源性分别是99.2%、98.4%、98.1%、96.5%、95.9%和93.8%,由此推导的氨基酸序列同源性分别是98.5%、98.0%、97.7%、94.7%、93.7%和90.5%;FKN基因进化树表明人与黑猩猩关系更近,FKN基因进化和通常认为的物种进化一致;Datamonkey分析结果显示FKN存在3个负选择位点53Q、84D、239N。成功获得人、黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩、长臂猿、猕猴和叶猴7种高等灵长类物种FKN全基因序列,为后续探讨FKN在高等灵长类物种进化过程中免疫学功能演变及其结构与功能的关系奠定基础。
洪晓武张亚平储以微高海峰蒋正刚熊思东
关键词：FKN测序进化分析
肿瘤循环DNA的临床研究被引量：4
2002年
高海峰屠红许凯黎
关键词：DNA
pHSP65疫苗增强结核杆菌特异性T细胞产生IFN-γ被引量：2
2008年
为提高BCG的免疫效果,以BCG进行初次免疫,比较pHSP65基因疫苗和BCG疫苗加强免疫的效果,寻找新型结核疫苗的初免-加强免疫策略。于第0周皮下接种BCG,第6、8周给予pHSP65滴鼻免疫或BCG加强免疫,末次免疫后2周检测全身及肺脏局部IFN-γ的产生。与BCG初免/BCG加强免疫相比,经pHSP65基因疫苗滴鼻加强免疫后,ELISPOT结果显示脾脏和肺局部分泌IFN-γ的淋巴细胞数量显著增加,流式检测显示IFN-γ+CD4+T细胞数量显著增加,ELISA结果证实淋巴细胞IFN-γ的分泌显著增高,提示经BCG初次免疫后,以pHSP65 DNA滴鼻加强免疫可显著增强全身和肺局部T淋巴细胞IFN-γ的产生,具有良好的抗结核感染潜能。
岳艳高海峰胡林昆蒋正刚徐薇熊思东
关键词：结核基因疫苗HSP65
肿瘤患者循环DNA的定量研究被引量：13
2004年
目的建立纳克水平DNA定量方法,并探讨循环DNA检测在肿瘤诊断中的应用价值。方法对483例恶性肿瘤患者以微量基因组抽提试剂盒抽提血清DNA,以SYBRgreenⅠ荧光染色法行DNA定量;BRCA1(D17S579、D17S855)和p53(TP53,D17S786)微卫星位点的杂合性丢失检测采用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染的方法进行。同时与150例健康人血清的检测结果进行对照。结果SYBRgreenⅠ荧光染色可精确定量2～10ngDNA。483例恶性肿瘤患者血清DNA平均水平为(81.3±98.3)ng/ml,150例健康人血清DNA平均水平为(22.2±13.4)ng/ml,两者间差异有显著性(P<0.001);50例良性肿瘤患者血清DNA未见显著升高。在33例血清DNA含量增高的卵巢癌患者中,27例(81.8%)能测及BRCA1和p53微卫星标记中至少1个位点的杂合性丢失。结论循环DNA的定量有可能成为一种新的恶性肿瘤标志物。
屠红高海峰傅士龙陈颢
关键词：血清DNA循环DNADNA定量杂合性丢失SYBR银染
mB7AP-exCD40L融合蛋白的分子设计及其在Pichia pastoris中的表达和生物活性
2005年
目的小鼠B7反义肽与小鼠CD40L胞外区融合蛋白(mB7AP-exCD40L)的分子模拟设计及其酵母表达体系的建立,研究其酵母表达产物的生物活性。方法分子模拟设计mB7AP-exCD40L;构建pPIC9K-mB7AP-exCD40L质粒并用电击法转化PichiapastorisGS115。Westernblot鉴定融合蛋白的表达,混合淋巴细胞反应(MLR)研究mB7AP-exCD40L对淋巴细胞增殖的影响。结果构建的重组Pichiapastoris实现了mB7AP-exCD40L的分泌表达,表达蛋白质的相对分子质量约2.6×103,对MLR具有抑制作用。结论分子模拟设计的mB7AP-exCD40L在Pichiapastoris表达体系成功表达,为进一步研究mB7AP-exCD40L在抗移植排斥反应中的作用奠定了基础。
陈晋储以微邵先安任学芳张洪勇高海峰何球藻熊思东
关键词：PASTORIS融合蛋白生物活性分子设计抗移植排斥反应电击法
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